Úrovně MTB cfDNA v TBP (MYDNITE)

Tuberkulóza (TBC) je jednou z hlavních globálních zdravotních hrozeb s odhadovaným celosvětovým výskytem 9,87 milionu případů v roce 2020 a je druhou hlavní infekční příčinou úmrtí po COVID-19. Kromě plicního postižení, které je nejčastějším projevem TBC, postihla mimoplicní TBC (EPTB) 22,3 % pacientů s TBC v Hong Kongu a byla spojena s horším léčebným výsledkem než plicní TBC. Mezi EPTB je nejrozšířenější formou TBC pleuritida (TBP), která představuje 41,2 % v Hongkongu a přibližně 50 % ve dvou multicentrických čínských studiích.

Podobně jako u jiných typů EPTB je mikrobiologická diagnostika TBP často obtížná kvůli paucibacilárnímu postižení (onemocnění TBC způsobené malým počtem bakterií) infikovaných orgánů. Významná část pacientů proto dostávala empirickou léčbu proti TBC založenou na kompatibilních klinických projevech (exsudativní pleurální výpotek se zvýšenou hladinou adenosindeaminázy v pleurální tekutině), při absenci výsledků diagnostického vyšetření a alternativního klinického vysvětlení. Konvenční diagnostické testy na TBP pomocí acidorezistentních bacilů (AFB) barvení a kultivace z pleurální tekutiny jsou nedostatečně citlivé a dlouhá doba obrátky kultivace by oddálila počáteční klinickou léčbu. I když je pozitivní histologický nález granulomatózního zánětu z pleurální biopsie považován za diagnostický ekvivalent pro TBP, procesní riziko pleurální biopsie, zejména krvácení a viscerální poranění, je stále problémem [9]. Z historické kohorty extrapulmonální TBC v Hongkongu bylo kultivačně diagnostikováno pouze 10,6 % a 39,7 % TBP histologicky. Podobně je také omezená účinnost molekulárních testů na EPTB, pravděpodobně kvůli nízké bakteriální zátěži a hladině MTB DNA. V systematickém přehledu byla souhrnná senzitivita a specificita Xpert® MTB/RIF (Xpert; Cepheid; Sunnyvale, CA, USA) při detekci MTB DNA v pleurální tekutině proti kultuře 50,9 % a 99,2 % u TBP. Vzhledem k nízké citlivosti není negativní výsledek Xpert spolehlivý k vyloučení TBP. Nejnovější verze Xpert, Xpert® MTB/RIF Ultra (Xpert Ultra), byla vyvinuta s cílem zlepšit citlivost diagnostiky TBC a zlepšit identifikaci rezistence na rifampicin. Jeho diagnostická využitelnost u TBP je však stále suboptimální. Mekkaoui et al uvedli, že senzitivita a specificita Xpert Ultra v pleurální tekutině byla 66,7 % a 99,5 % specificita. V další studii porovnávající diagnostický výkon Xpert Ultra a Xpert na EPTB od Christophera et al měl Xpert Ultra vyšší citlivost než Xpert (53,8 % vs 46,2 %) pro pleurální tekutinu proti kultivaci MTB a kompozitnímu referenčnímu standardu, ale nedosáhl statistická významnost.

Jako forma tekuté biopsie může DNA bez buněk MTB (MTB cfDNA) v pleurální tekutině představovat rychlou, novou a životaschopnou možnost diagnostiky TBP. S tímto novým nástrojem nemusí pacienti ke stanovení diagnózy TBP podstupovat pleurální biopsii. Yang et al uvedli, že senzitivita MTB cfDNA a Xpert byla 79,5 % a 38,5 % při použití předem specifikovaného kompozitního referenčního standardu (zahrnujícího výsledky kultivace sputa, Xpert sputa, kultivace pleurálního výpotku, Xpert pleurálního výpotku nebo biopsie pleury), zatímco citlivost by se zvýšila na 96,6 % a 79,7 % ve vzorcích Xpert pleurální tekutiny a/nebo kultivačně pozitivních vzorcích TBP. Důvod pro různé citlivosti MTB cfDNA při diagnostice TBP na základě složených cílových bodů a mikrobiologických metod byl nejasný, i když to může být způsobeno rozdílnou bakteriální zátěží MTB, jak se odráží ve stavu kultivace v pleurální tekutině. Nicméně tento příznivý výsledek lze převést na zamezení více než 60 % zbytečných invazivních pleurálních biopsií, pokud je MTB cfDNA považována za zlatý standard pro diagnostiku TBP.

Před zavedením měření MTB cfDNA do diagnostiky TBP by měla být důkladně vyhodnocena korelace mezi hladinou MTB cfDNA a TBP pozitivní na kultivaci MTB, TBP s negativní kulturou MTB a různými typy non-TBP pleurálního výpotku. Předpokládáme, že MTB cfDNA překonává MTB kultivaci v diagnostice TBP; s vysokou mírou shody mezi hladinou MTB cfDNA a diagnózou TBP, s vysokými, středními a nízkými hladinami MTB cfDNA v MTB kultivačně pozitivním TBP, MTB kultivačně negativním TBP a non-TB pleurálních výpotcích, v daném pořadí. Taková shoda je kritickým krokem k ověření její diagnostické přesnosti před zavedením do klinického prostředí.

Objevují se údaje, které naznačují souhru mezi střevní mikroflórou a náchylností k tuberkulóze. Spojení mezi střevní mikrobiotou a TBP však nebylo prozkoumáno

Cílem této studie je korelovat hladiny MTB cfDNA s různými příčinami pleurálního výpotku a vyhodnotit diagnostickou výkonnost různých testů při diagnostice TBP.