Livelli MTB cfDNA in TBP (MYDNITE)

La tubercolosi (TBC) è una delle principali minacce per la salute globale, con un'incidenza globale stimata di 9,87 milioni di casi nel 2020 ed è la seconda principale causa di morte infettiva dopo il COVID-19. A parte il coinvolgimento polmonare, che è la manifestazione più comune della tubercolosi, la tubercolosi extrapolmonare (EPTB) ha colpito il 22,3% dei pazienti affetti da tubercolosi a Hong Kong ed è stata associata a un esito terapeutico peggiore rispetto alla tubercolosi polmonare. Tra gli EPTB, la pleurite tubercolare (TBP) è la forma più diffusa, rappresentando il 41,2% a Hong Kong e circa il 50% in due studi multicentrici cinesi.

Analogamente ad altri tipi di EPTB, la diagnosi microbiologica di TBP è spesso difficile a causa del coinvolgimento paucibacillare (malattia tubercolare causata da un piccolo numero di batteri) degli organi infetti. Pertanto, una percentuale significativa di pazienti ha ricevuto un trattamento anti-TBC empirico sulla base di presentazioni cliniche compatibili (versamento pleurico essudativo con livelli elevati di adenosina deaminasi nel liquido pleurico), in assenza di risultati di indagini diagnostiche e spiegazioni cliniche alternative. I test diagnostici convenzionali per TBP mediante colorazione di bacilli acido-resistenti (AFB) e coltura dal liquido pleurico non sono sufficientemente sensibili e il lungo tempo di risposta della coltura ritarderebbe la gestione clinica iniziale. Sebbene un riscontro istologico positivo di infiammazione granulomatosa dalla biopsia pleurica sia considerato equivalente diagnostico per TBP, il rischio procedurale della biopsia pleurica, in particolare il sanguinamento e la lesione viscerale, è ancora motivo di preoccupazione [9]. Dalla coorte storica di tubercolosi extrapolmonare a Hong Kong, solo il 10,6% e il 39,7% di TBP sono stati diagnosticati rispettivamente mediante coltura e istologia. Allo stesso modo, anche l'efficacia dei test molecolari sull'EPTB è limitata, presumibilmente a causa della bassa carica batterica e del livello di DNA MTB. In una revisione sistematica, la sensibilità e la specificità combinate di Xpert® MTB/RIF (Xpert; Cepheid; Sunnyvale, CA, USA) sulla rilevazione del DNA di MTB nel liquido pleurico rispetto alla coltura erano del 50,9% e del 99,2% in TBP. Data la bassa sensibilità, un risultato Xpert negativo non è affidabile per escludere TBP. La versione più recente di Xpert, Xpert® MTB/RIF Ultra (Xpert Ultra), è stata sviluppata per migliorare la sensibilità della diagnosi della tubercolosi e migliorare l'identificazione della resistenza alla rifampicina. Tuttavia, la sua utilità diagnostica in TBP è ancora non ottimale. Mekkaoui et al hanno riferito che la sensibilità e la specificità di Xpert Ultra nel liquido pleurico erano del 66,7% e del 99,5% di specificità. In un altro studio che confrontava le prestazioni diagnostiche di Xpert Ultra e Xpert su EPTB di Christopher et al, Xpert Ultra aveva una sensibilità maggiore di Xpert (53,8% vs 46,2%) per il liquido pleurico rispetto alla coltura MTB e allo standard di riferimento composito, ma non raggiungeva significato statistico.

Come forma di biopsia liquida, il DNA privo di cellule MTB (MTB cfDNA) nel liquido pleurico può rappresentare un'opzione rapida, nuova e praticabile per diagnosticare la TBP. Con questo nuovo strumento, i pazienti potrebbero non aver bisogno di sottoporsi a una biopsia pleurica per stabilire la diagnosi di TBP. Yang et al. hanno riferito che la sensibilità di MTB cfDNA e Xpert era rispettivamente del 79,5% e del 38,5% utilizzando lo standard di riferimento composito prespecificato (che incorpora i risultati della coltura dell'espettorato, dell'espettorato Xpert, della coltura del versamento pleurico, del versamento pleurico Xpert o della biopsia pleurica), mentre il le sensibilità aumenterebbero rispettivamente al 96,6% e al 79,7% nei campioni di liquido pleurico Xpert e/o TBP positivi alla coltura. La ragione delle diverse sensibilità di MTB cfDNA nella diagnosi di TBP sulla base di endpoint compositi e metodi microbiologici non era chiara, sebbene potesse essere dovuta alla diversa carica batterica MTB riflessa dallo stato colturale nel liquido pleurico. Tuttavia, questo risultato favorevole può essere tradotto nell'evitare oltre il 60% di biopsie pleuriche invasive non necessarie se MTB cfDNA è considerato un gold standard per la diagnosi di TBP.

Prima di introdurre la misurazione di MTB cfDNA nella diagnosi di TBP, la correlazione tra livello di MTB cfDNA e TBP positivo alla coltura MTB, TBP negativo alla coltura MTB e vari tipi di versamento pleurico non TBP dovrebbe essere valutata a fondo. Ipotizziamo che il cfDNA MTB superi la cultura MTB nella diagnosi di TBP; con un alto tasso di concordanza tra il livello di MTB cfDNA e la diagnosi di TBP, con livelli alti, intermedi e bassi di MTB cfDNA rispettivamente in TBP positivo alla coltura MTB, TBP negativo alla coltura MTB e versamenti pleurici non TB rispettivamente. Tale concordanza è un passaggio fondamentale per convalidare la sua accuratezza diagnostica prima dell'introduzione in ambito clinico.

Stanno emergendo dati che suggeriscono l'interazione tra il microbiota intestinale e la suscettibilità alla tubercolosi. Tuttavia, il legame tra microbiota intestinale e TBP non è stato esplorato

Lo scopo del presente studio è correlare i livelli di MTB cfDNA con varie cause di versamento pleurico e valutare le prestazioni diagnostiche di diversi test nella diagnosi di TBP.