Fysiologinen tutkimus allergisen ihon aktiivisuuden määrittämiseksi erilaisten ihon valmistelujen jälkeen

TAUSTA TIETOA Allergisten sairauksien esiintyvyys on jatkuvasti lisääntynyt ja saavuttanut jopa 30 %:n esiintyvyyden teollisuusmaissa. Sveitsissä noin 2 miljoonaa ihmistä kärsii IgE-välitteisistä allergioista, kuten Sveitsin allergia-, iho- ja astmakeskus ja Sveitsin allergologian ja immunologian yhdistys (SSAI) ovat raportoineet. Asteittain kasvavien allergeeniannosten ihonalaisilla injektioilla tavanomaisen ihonalaisen SIT:n (SCIT) havaitaan vähentävän sopimattomia T-auttaja (Th) 2 -vasteita ja IgE-tuotantoa. Systeemien allergisten sivuvaikutusten riskin, tyypillisen 3–5 vuoden hoidon keston ja 50–80 injektion vaatimuksen vuoksi potilas hyväksyy SCIT:n vähän ja alle 5 % allergiapotilaista valitsee SCIT:n. Äskettäin uudelleen löydetty allergeenin antoreitti on epidermiksen kautta menetelmässä, jota kutsutaan epikutaaniseksi immunoterapiaksi (EPIT).

Iho on houkutteleva immunoterapian antoreitti, sillä se on sekä helposti saatavilla että sillä on tärkeä rooli immuunijärjestelmässä, joka koostuu keratinosyyteistä, Langerhans-soluista (LC), dermaalisista dendriittisoluista (DC). Suuri haaste EPIT:ssä on voittaa ihon fysiologinen estetoiminto. Jotta allergeeni toimitettaisiin ihon immunologisiin efektorisoluihin, allergeeni on kuljetettava orvaskeden uloimman keratinisoituneen kerroksen, nimeltään stratum corneum, läpi. Tarvekerros on 10-20 μm paksu ja läpäisemätön yli 500 Da:n molekyyleille. Proteiinit, kuten allergeenit, eivät tunkeudu passiivisesti ihon läpi, ja siksi tarvitaan tehostamisstrategioita tämän siirron mahdollistamiseksi. Mikroteknologian edistyminen saattaa osaltaan parantaa tilannetta mahdollistamalla mekaniikan ja rakenteiden miniatyrisoinnin. Koska sarveiskerros on vain 10-20 μm paksu, Henry ym. ovat ehdottaneet, että jopa muutamasta kymmenestä muutamaan sataan mikrometriin mikroneuloja voitaisiin käyttää marrasketeen tunkeutumiseen.

Tällaiset uudet menetelmät ihoesteen voittamiseksi herättävät kysymyksen erilaisten ihovauriomallien vaikutuksesta ihon allergiseen reaktiivisuuteen. Nimittäin kuinka tärkeä rooli on paljastetulla alueella (mikroneulat), vaurion syvyydellä (ihon pistely) ja keratinosyyttien aktivaatiolla. Tämä fysiologinen kysymys on tämän tutkimuksen painopiste.

TUOTTEET Eri ihosairauksiin ja allergeenialtistumiseen liittyvien fysiologisten reaktioiden tutkimiseksi on valittu seuraavat tuotteet/tekniikat, joiden tarkoituksena on saada aikaan erilaisia ​​ihosairauksia toistettavalla tavalla.

Piikkilansetti:

Ihon pistosvalmisteluun käytetään steriilejä pistolansetteja 1 mm:n pisteen ihotestaukseen: prick lansettia, valmistaja Entaco LTD., Redditch, Worcestershire, UK ja jakelija Stallergenes®. Niitä käytetään allergiadiagnostiikkaan päivittäisessä rutiinissa.

Teippi:

Teipin irrotuksen ihon valmistelussa käytetään tavanomaista teippiä (Tesafilm®).

Mikroneulasarja:

Suuren määrän mikrokanavia, joiden enimmäissyvyys on 150 μm, indusoimiseksi sarveiskalvokerrokseen käytetään 3M®:n kiinteää Microstructured Transdermal System (sMTS) -järjestelmää. Tämä järjestelmä on pieni 351 pienestä neulasta koostuva laastari, joka on markkinoilla Yhdysvalloissa ja on tarkoitettu ihon valmistelemiseen paikallisten ihotautituotteiden transdermaalista käyttöä varten.

Epikutaaninen allergeeniliuos:

Epikutaanista antoa varten neljä kymmenkertaista sarjalaimennusta (10 HEP, 1 HEP, 0,1 HEP ja 0,01 HEP/ml) koivun siitepölyn (Betula verrucosa) (Soluprick®, ALK-Abelló A/S, Hørsholm, Tanska) allergeeniuutteita ) käytetään kuten jokapäiväisessä allergiadiagnostiikkakäytännössä. Histamiinia positiivisena kontrollina käytetään 10 mg/ml ja liuosta, joka sisältää vain apuaineita, toimii negatiivisena kontrollina.

Tämä on avoin fysiologinen tutkimus allergisen ihon reaktiivisuudesta epikutaaniselle allergeenialtistukselle allergisilla potilailla, jossa verrataan erilaisia ​​ihonkäsittelymenetelmiä. Tutkimuksen painopiste on ihon preparaatiossa eikä tietyssä allergeenissa tai allergiassa, vaan homogeenisyyden vuoksi testauksen perustaksi valittiin yksittäinen allerginen sairaus, koivun siitepölyallergia. Erilaisten ihonkäsittelytekniikoiden vaikutusten arvioimiseksi valittiin yksilöllinen ihon reaktiivisuuden vertailu koivun siitepölyuutteiden sarjalaimennosten välittömässä faasin I reaktiossa. Sarjalaimennusmenetelmä mahdollistaa annoksesta riippuvan vaikutuksen arvioinnin ja keskimääräisen allergeenikonsentraation määrittämisen, mikä tuottaa samanlaisia ​​ihoreaktioita - joten erot selittyvät pääasiassa erilaisilla ihon valmisteluilla, mikä mahdollistaa näiden tekniikoiden kvantitatiivisen vertailun.

HYPOTEESI Määrittelemme, mikä kolmesta eri ihonkäsittelytekniikasta käyttää korkeampaa allergeenivalmisteen proteiinipitoisuutta (Ch10), mikä saa aikaan samankokoisen kudosalueen kuin histamiini 10 mg/ml.

Nolla-hypoteesi olisi siis:

Ch10 ei eroa merkittävästi kolmen ihonkäsittelytekniikan välillä.