Fysiologisk studie för att bestämma den allergiska hudaktiviteten efter olika hudförberedelser

BAKGRUNDSINFORMATION Prevalensen av allergiska sjukdomar har kontinuerligt ökat och nått en prevalens på upp till 30 % i industriländer. I Schweiz är cirka 2 miljoner människor drabbade av IgE-medierade allergier som rapporterats av det schweiziska centret för allergi, hud och astma och schweiziska föreningen för allergologi och immunologi (SSAI). Genom subkutana injektioner av gradvis ökande allergendoser visar sig konventionell subkutan SIT (SCIT) minska de olämpliga T-hjälpare (Th) 2-svaren och IgE-produktionen. På grund av risken för systemiska allergiska biverkningar, den typiska behandlingslängden på 3-5 år och kravet på 50-80 injektioner, är patientacceptansen av SCIT låg och mindre än 5 % av allergipatienterna väljer att genomgå SCIT. En nyligen återupptäckt administreringsväg för allergen är via epidermis i en procedur som kallas epikutan immunterapi (EPIT).

Huden är en attraktiv administreringsväg för immunterapi och är både lättillgänglig och spelar en viktig roll i immunsystemet som består av keratinocyter, Langerhans-celler (LC), dermala dendritiska celler (DC). En stor utmaning inom EPIT är att övervinna hudens fysiologiska barriärfunktion. För att leverera allergenet till de immunologiska effektorcellerna i huden måste allergenet transporteras genom det yttersta keratiniserade lagret av epidermis, kallat stratum corneum. Stratum corneum är 10-20μm tjockt och ogenomträngligt för molekyler större än 500 Da. Proteiner, såsom allergener, tränger inte passivt genom huden och därför behövs förbättringsstrategier för att möjliggöra denna överföring. Framsteg inom mikroteknik kan bidra till att förbättra situationen genom att möjliggöra miniatyrisering av mekanik och strukturer. Eftersom stratum corneum endast är 10-20μm tjockt, har det föreslagits av Henry et al., att mikronålar så små som några tiotal till några hundra mikroner skulle kunna användas för att penetrera stratum corneum.

Sådana nya metoder för att övervinna hudbarriären väcker frågan om hur olika typer av hudskademönster påverkar den allergiska hudreaktiviteten. Nämligen hur viktig är det exponerade områdets roll (mikronålar), djupet av skadan (hudstickning) och keratinocytaktiveringen. Denna fysiologiska fråga är i fokus för denna studie.

PRODUKTER För att undersöka de fysiologiska reaktionerna avseende olika hudtillstånd och allergenexponering har följande produkter/tekniker valts i syfte att framkalla olika hudtillstånd på ett reproducerbart sätt.

Pricklansett:

För förberedelse av prickhuden kommer sterila pricklansetter för 1 mm-punkts hudtestning att användas: pricklansett, producerad av Entaco LTD., Redditch, Worcestershire, Storbritannien och distribuerad av Stallergenes®. De används för allergidiagnostik i daglig rutin.

Tejp:

För tejpavlägsnande hudpreparering kommer en konventionell tejp att användas (Tesafilm®).

Microneedle array:

För att inducera ett stort antal mikrokanaler med ett maximalt djup på 150 μm in i hornhinnan, kommer det solida mikrostrukturerade transdermala systemet (sMTS) från 3M® att användas. Detta system är ett litet plåster med 351 små nålar, som finns på marknaden i USA och är avsett för att förbereda huden för transdermal applicering av topikala dermatologiska produkter.

Epikutan allergenlösning:

För epikutan administrering fyra tiofaldiga serieutspädningar (10 HEP, 1 HEP, 0,1 HEP och 0,01HEP/ml) av registrerade allergenextrakt av björkpollen (Betula verrucosa) (Soluprick®, ALK-Abelló A/S, Hørsholm, Danmark ) kommer att användas som i daglig allergidiagnostik. Histamin som positiv kontroll kommer att användas vid 10 mg/ml och en lösning som endast innehåller hjälpämnena kommer att fungera som negativ kontroll.

Detta är en öppen fysiologisk undersökning av den allergiska hudens reaktivitet mot epikutan allergenexponering hos allergiska patienter som jämför olika metoder för hudförberedelse. Fokus i studien ligger på hudpreparatet och inte på det specifika allergenet eller allergin, men av homogenitetsskäl valdes en enstaka allergisk sjukdom, björkpollenallergi som grund för testningen. För att utvärdera effekterna av de olika hudberedningsteknikerna valdes en intraindividuell jämförelse av hudens reaktivitet i termer av den omedelbara fas I-reaktionen på serieutspädningar av björkpollenextrakt. Tillvägagångssättet med serieutspädning tillåter en dosberoende effektutvärdering och bestämning av den genomsnittliga allergenkoncentrationen som ger liknande hudreaktioner - sålunda kommer skillnaderna främst att förklaras av de olika hudpreparaten som möjliggör en kvantitativ jämförelse av dessa tekniker.

HYPOTES Vi kommer att avgöra vilken av de tre olika hudförberedande teknikerna som använder högre proteinkoncentration av allergenpreparat (Ch10) vilket framkallar en svalarea av samma storlek som histamin 10 mg/ml kommer att beräknas.

Nollhypotesen skulle därför vara:

Ch10 skiljer sig inte signifikant mellan de tre hudförberedande teknikerna.