Estudo Fisiológico para Determinar a Atividade Alérgica da Pele Após Diferentes Preparações de Pele

INFORMAÇÃO ANTECEDENTE A prevalência de doenças alérgicas tem vindo a aumentar continuamente, atingindo uma prevalência de até 30% nos países industrializados. Na Suíça, cerca de 2 milhões de pessoas são afetadas por alergias mediadas por IgE, conforme relatado pelo Centro Suíço de Alergia, Pele e Asma e pela Sociedade Suíça de Alergologia e Imunologia (SSAI). Por injeções subcutâneas de doses de alérgenos gradualmente crescentes, a SIT subcutânea convencional (SCIT) reduz as respostas inapropriadas de T-helper (Th) 2 e a produção de IgE. Devido ao risco de efeitos colaterais alérgicos sistêmicos, a duração típica da terapia de 3 a 5 anos e a necessidade de 50 a 80 injeções, a aceitação do paciente à SCIT é baixa e menos de 5% dos pacientes alérgicos optam por se submeter à SCIT. Uma rota recentemente redescoberta de administração de alérgenos é através da epiderme em um procedimento chamado imunoterapia epicutânea (EPIT).

A pele é uma via de administração atraente para a imunoterapia, sendo facilmente acessível, bem como desempenhando um papel importante no sistema imunológico composto por queratinócitos, células de Langerhans (LC), células dendríticas dérmicas (DC). Um grande desafio no EPIT é superar a função de barreira fisiológica da pele. Para entregar o alérgeno às células efetoras imunológicas na pele, o alérgeno deve ser transportado através da camada queratinizada mais externa da epiderme, chamada estrato córneo. O estrato córneo tem 10-20μm de espessura e é impermeável para moléculas maiores que 500 Da. Proteínas, como alérgenos, não permeiam passivamente pela pele e, portanto, estratégias de aprimoramento são necessárias para permitir essa transferência. Avanços na microtecnologia podem contribuir para melhorar a situação ao permitir a miniaturização da mecânica e das estruturas. Como o estrato córneo tem apenas 10-20 μm de espessura, foi proposto por Henry et al., que microagulhas tão pequenas quanto algumas dezenas a algumas centenas de mícrons, poderiam ser usadas para penetrar no estrato córneo.

Esses novos métodos de superar a barreira da pele levantam a questão da influência de diferentes tipos de padrões de lesão da pele na reatividade alérgica da pele. Ou seja, quão importante é o papel da área exposta (microagulhas), a profundidade da lesão (picada na pele) e a ativação dos queratinócitos. Essa questão fisiológica está no foco deste estudo.

PRODUTOS Para investigar as reações fisiológicas relativas a diferentes condições de pele e exposição a alérgenos, os seguintes produtos/técnicas foram escolhidos com o objetivo de induzir diferentes condições de pele de forma reprodutível.

Lanceta picada:

Para a preparação da pele para picadas, serão utilizadas lancetas para picadas estéreis para teste cutâneo de ponta de 1 mm: lanceta para picadas, produzida por Entaco LTD., Redditch, Worcestershire, Reino Unido e distribuída por Stallergenes®. Eles são usados ​​para diagnósticos de alergia na rotina diária.

Fita adesiva:

Para a preparação da pele com fita adesiva será utilizada uma fita convencional (Tesafilm®).

Conjunto de microagulhas:

Para induzir um grande número de microcanais com uma profundidade máxima de 150μm na camada da córnea, será utilizado o Sistema Transdérmico Microestruturado sólido (sMTS) da 3M®. Este sistema é um pequeno patch de 351 agulhas minúsculas, que está no mercado nos EUA e destina-se a preparar a pele para aplicação transdérmica de produtos dermatológicos tópicos.

Solução alergênica epicutânea:

Para a administração epicutânea, quatro diluições seriadas de dez vezes (10 HEP, 1 HEP, 0,1 HEP e 0,01 HEP/ml) de extratos de alérgenos registrados de pólen de bétula (Betula verrucosa) (Soluprick®, ALK-Abelló A/S, Hørsholm, Dinamarca ) será usado como na prática diária de diagnóstico de alergia. Histamina como controle positivo será utilizada na dose de 10 mg/ml e uma solução contendo apenas os excipientes servirá como controle negativo.

Esta é uma investigação fisiológica aberta da reatividade cutânea alérgica à exposição epicutânea a alérgenos em pacientes alérgicos, comparando diferentes métodos de preparação da pele. O foco do estudo está na preparação da pele e não no alérgeno ou alergia específica, mas por razões de homogeneidade, uma única doença alérgica, a alergia ao pólen de bétula foi escolhida como base para o teste. Para avaliar os efeitos das diferentes técnicas de preparação da pele, foi escolhida uma comparação intra-individual da reatividade da pele em termos da reação imediata de fase I a diluições seriadas de extratos de pólen de bétula. A abordagem de diluição em série permite uma avaliação do efeito dependente da dose e determinação da concentração média do alérgeno produzindo reações cutâneas semelhantes - assim, as diferenças serão explicadas principalmente pela preparação diferente da pele, permitindo uma comparação quantitativa dessas técnicas.

HIPÓTESE Determinaremos qual das três diferentes técnicas de preparação da pele usa maior concentração de proteína da preparação do alérgeno (Ch10), provocando uma área de pápula do mesmo tamanho que a histamina 10 mg/ml será calculada.

A hipótese nula, portanto, seria:

Ch10 não é significativamente diferente entre as três técnicas de preparação da pele.