Физиологическое исследование для определения аллергической активности кожи после различной подготовки кожи

СПРАВОЧНАЯ ИНФОРМАЦИЯ Распространенность аллергических заболеваний постоянно растет, достигая 30% в промышленно развитых странах. По данным Швейцарского центра аллергии, кожи и астмы и Швейцарского общества аллергологии и иммунологии (SSAI), в Швейцарии около 2 миллионов человек страдают от аллергии, опосредованной IgE. Было обнаружено, что путем подкожных инъекций постепенно увеличивающихся доз аллергена обычная подкожная СИТ (ПКИТ) снижает неадекватные реакции Т-хелперов (Th) 2 и выработку IgE. Из-за риска системных аллергических побочных эффектов, типичной продолжительности терапии 3-5 лет и необходимости проведения 50-80 инъекций, пациенты не принимают ПКИТ, и менее 5% пациентов с аллергией выбирают ПКИТ. Недавно вновь открытый путь введения аллергена — через эпидермис в процедуре, называемой накожной иммунотерапией (EPIT).

Кожа является привлекательным путем введения иммунотерапии, так как она легкодоступна и играет важную роль в иммунной системе, состоящей из кератиноцитов, клеток Лангерганса (LC), дермальных дендритных клеток (DC). Основной задачей EPIT является преодоление физиологического барьера кожи. Чтобы доставить аллерген к иммунологическим эффекторным клеткам кожи, аллерген должен пройти через самый внешний ороговевший слой эпидермиса, называемый роговым слоем. Роговой слой имеет толщину 10-20 мкм и непроницаем для молекул более 500 Да. Белки, такие как аллергены, не проникают пассивно через кожу, и поэтому необходимы стратегии усиления, чтобы сделать возможной эту передачу. Достижения в области микротехнологий могут способствовать улучшению ситуации, позволяя миниатюризировать механику и конструкции. Поскольку толщина рогового слоя составляет всего 10-20 мкм, Генри и др. предложили использовать микроиглы размером от нескольких десятков до нескольких сотен микрон для проникновения в роговой слой.

Такие новые методы преодоления кожного барьера ставят вопрос о влиянии различных типов кожных повреждений на аллергическую реактивность кожи. А именно, насколько важна роль зоны воздействия (микроиглы), глубины повреждения (прокалывания кожи) и активации кератиноцитов. Этот физиологический вопрос находится в центре внимания настоящего исследования.

ПРОДУКТЫ Для исследования физиологических реакций, связанных с различными состояниями кожи и экспозицией аллергенов, были выбраны следующие продукты/методы с целью вызвать различные состояния кожи воспроизводимым образом.

Укол ланцета:

Для подготовки кожи к прокалыванию будут использоваться стерильные ланцеты для прокола кожи на расстоянии 1 мм: ланцет для укола, произведенный Entaco LTD., Реддич, Вустершир, Великобритания и распространяемый Stallergenes®. Они используются для диагностики аллергии в повседневной жизни.

Скотч:

Для подготовки кожи к зачистке лентой будет использоваться обычная лента (Tesafilm®).

Массив микроигл:

Чтобы создать большое количество микроканалов с максимальной глубиной 150 мкм в слое роговицы, будет использоваться твердая микроструктурированная трансдермальная система (sMTS) от 3M®. Эта система представляет собой небольшой пластырь из 351 крошечной иглы, который имеется на рынке в США и предназначен для подготовки кожи к трансдермальному применению местных дерматологических препаратов.

Эпикожный раствор аллергена:

Для накожного введения четыре десятикратных серийных разведения (10 HEP, 1 HEP, 0,1 HEP и 0,01 HEP/мл) экстрактов зарегистрированных аллергенов пыльцы березы (Betula verrucosa) (Soluprick®, ALK-Abelló A/S, Hørsholm, Дания). ) будет использоваться как в повседневной практике диагностики аллергии. В качестве положительного контроля будет использоваться гистамин в концентрации 10 мг/мл, а раствор, содержащий только эксципиенты, будет служить в качестве отрицательного контроля.

Это открытое физиологическое исследование аллергической реакции кожи на накожное воздействие аллергена у пациентов с аллергией, сравнивающее различные методы подготовки кожи. Основное внимание в исследовании уделяется подготовке кожи, а не конкретному аллергену или аллергии, а по соображениям однородности в качестве основы для тестирования было выбрано одно аллергическое заболевание, аллергия на пыльцу березы. Чтобы оценить влияние различных методов подготовки кожи, было выбрано индивидуальное сравнение реактивности кожи с точки зрения непосредственной реакции фазы I на серийные разведения экстрактов пыльцы березы. Подход серийных разведений позволяет проводить оценку эффекта в зависимости от дозы и определение средней концентрации аллергена, приводящего к сходным кожным реакциям. Таким образом, различия будут объясняться главным образом разной подготовкой кожи, что позволяет количественно сравнивать эти методы.

ГИПОТЕЗА Мы определим, какой из трех различных методов подготовки кожи использует более высокую концентрацию белка в препарате аллергена (Ch10), вызывая образование волдыря того же размера, что и гистамин 10 мг/мл.

Таким образом, нулевая гипотеза будет следующей:

Ch10 существенно не отличается между тремя методами подготовки кожи.