Studio fisiologico per determinare l'attività della pelle allergica dopo una diversa preparazione della pelle

INFORMAZIONI DI BASE La prevalenza delle malattie allergiche è in continuo aumento, raggiungendo una prevalenza fino al 30% nei paesi industrializzati. In Svizzera, circa 2 milioni di persone sono affette da allergie IgE-mediate, come riportato dal Centro svizzero per l'allergia, la pelle e l'asma e dalla Società svizzera di allergologia e immunologia (SSAI). Mediante iniezioni sottocutanee di dosi di allergene gradualmente crescenti, si è scoperto che la SIT sottocutanea convenzionale (SCIT) riduce le risposte inappropriate di T-helper (Th) 2 e la produzione di IgE. A causa del rischio di effetti collaterali allergici sistemici, della durata tipica della terapia di 3-5 anni e della necessità di 50-80 iniezioni, l'accettazione da parte dei pazienti della SCIT è bassa e meno del 5% dei pazienti allergici sceglie di sottoporsi a SCIT. Una via di somministrazione di allergeni recentemente riscoperta è attraverso l'epidermide in una procedura chiamata immunoterapia epicutanea (EPIT).

La pelle è un'attraente via di somministrazione per l'immunoterapia essendo sia facilmente accessibile che svolgendo un ruolo importante nel sistema immunitario costituito da cheratinociti, cellule di Langerhans (LC), cellule dendritiche dermiche (DC). Una sfida importante nell'EPIT è superare la fisiologica funzione di barriera della pelle. Per fornire l'allergene alle cellule effettrici immunologiche nella pelle, l'allergene deve essere trasportato attraverso lo strato cheratinizzato più esterno dell'epidermide, chiamato strato corneo. Lo strato corneo ha uno spessore di 10-20 μm ed è impermeabile per molecole superiori a 500 Da. Le proteine, come gli allergeni, non permeano passivamente attraverso la pelle e pertanto sono necessarie strategie di potenziamento per consentire questo trasferimento. I progressi nella microtecnologia potrebbero contribuire a migliorare la situazione consentendo la miniaturizzazione della meccanica e delle strutture. Poiché lo strato corneo ha uno spessore di soli 10-20 μm, è stato proposto da Henry et al. Che microaghi piccoli da poche decine a poche centinaia di micron potrebbero essere utilizzati per penetrare nello strato corneo.

Tali nuovi metodi per superare la barriera cutanea sollevano la questione dell'influenza di diversi tipi di lesioni cutanee sulla reattività cutanea allergica. Vale a dire, quanto è importante il ruolo dell'area esposta (microaghi), la profondità della lesione (puntura della pelle) e l'attivazione dei cheratinociti. Questa domanda fisiologica è al centro di questo studio.

PRODOTTI Al fine di studiare le reazioni fisiologiche relative a diverse condizioni della pelle e all'esposizione agli allergeni, sono stati scelti i seguenti prodotti/tecniche allo scopo di indurre diverse condizioni della pelle in modo riproducibile.

Lancetta pungente:

Per la preparazione della puntura della pelle, verranno utilizzate lancette pungenti sterili per test cutanei con punta da 1 mm: puntura lancetta, prodotta da Entaco LTD., Redditch, Worcestershire, Regno Unito e distribuita da Stallergenes®. Sono utilizzati per la diagnostica delle allergie nella routine quotidiana.

Nastro adesivo:

Per la preparazione della pelle di strippaggio del nastro verrà utilizzato un nastro convenzionale (Tesafilm®).

Matrice di microaghi:

Per indurre un gran numero di microcanali con una profondità massima di 150 μm nello strato corneale, verrà utilizzato il solido sistema transdermico microstrutturato (sMTS) di 3M®. Questo sistema è un piccolo cerotto di 351 minuscoli aghi, che è sul mercato negli Stati Uniti ed è destinato alla preparazione della pelle per l'applicazione transdermica di prodotti dermatologici topici.

Soluzione allergenica epicutanea:

Per la somministrazione epicutanea quattro diluizioni seriali dieci volte (10 HEP, 1 HEP, 0,1 HEP e 0,01 HEP/ml) di estratti allergenici registrati di polline di betulla (Betula verrucosa) (Soluprick®, ALK-Abelló A/S, Hørsholm, Danimarca ) sarà utilizzato come nella pratica diagnostica quotidiana delle allergie. L'istamina come controllo positivo verrà utilizzata a 10 mg/ml e una soluzione contenente solo gli eccipienti fungerà da controllo negativo.

Questa è un'indagine fisiologica in aperto sulla reattività cutanea allergica all'esposizione epicutanea di allergeni in pazienti allergici che confronta diversi metodi di preparazione della pelle. Il focus dello studio è sulla preparazione della pelle e non sullo specifico allergene o allergia, ma per motivi di omogeneità è stata scelta come base per il test una singola malattia allergica, l'allergia al polline di betulla. Per valutare gli effetti delle diverse tecniche di preparazione della pelle è stato scelto un confronto intra-individuale della reattività cutanea in termini di reazione immediata di fase I a diluizioni seriali di estratti di polline di betulla. L'approccio della diluizione seriale consente una valutazione dell'effetto dose-dipendente e la determinazione della concentrazione media dell'allergene producendo reazioni cutanee simili - pertanto le differenze saranno spiegate principalmente dalla diversa preparazione della pelle consentendo un confronto quantitativo di queste tecniche.

IPOTESI Si determinerà quale delle tre diverse tecniche di preparazione della pelle utilizza una maggiore concentrazione proteica della preparazione allergenica (Ch10) provocando un'area del pomfo delle stesse dimensioni dell'istamina 10 mg/ml.

L'ipotesi nulla sarebbe quindi:

Ch10 non è significativamente diverso tra le tre tecniche di preparazione della pelle.