A TB vakcina biztonsága és immunogenitása; MVA85A, Egészséges önkéntesek, akik HIV-fertőzöttek

Új tuberkulózis elleni vakcina szükségessége A tuberkulózis (TB) évente körülbelül hárommillió ember halálát okozza. Becslések szerint a világ lakosságának egyharmada látensen Mycobacterium tuberculosis (M.tb) fertőzött (Dye, 1999). Ezeket a látensen fertőzött egyéneket fennáll a fertőzés újraaktiválódásának veszélye, ha immunszupprimálttá válnak. Világszerte a HIV-fertőzés az immunszuppresszió leggyakoribb oka, és az életre szóló 10%-os kockázatról évi 10%-ra növeli a reaktiváció esélyét (Corbett, 1996). A jelenleg elérhető vakcina, az M. bovis BCG, nagyrészt nem hatékony a felnőttkori tüdőbetegségek elleni védelemben az endémiás területeken, és széles körben egyetértés van abban, hogy egy új, hatékonyabb tuberkulózis elleni vakcina a globális közegészségügyi prioritás (Colditz, 1994). Előfordulhat azonban, hogy etikátlan és nem praktikus olyan vakcinastratégia tesztelése és alkalmazása, amely nem tartalmazza a BCG-t, mivel a BCG értékes védelmet nyújt a tbc agyhártyagyulladás és lepra ellen. A BCG-t is tartalmazó immunizálási stratégia azért is vonzó, mert azokat a populációkat, amelyekben ezt a vakcinajelöltet tesztelni kell, már immunizálták BCG-vel. Tekintettel az M.tb-fertőzés magas prevalenciájára, a látensen fertőzött egyéneknek beadható és a látens fertőzést felszámoló vakcina óriási hatással lenne a tbc-vel kapcsolatos mortalitásra és morbiditásra. Az M.tb egy intracelluláris szervezet. A CD4+ Th1 típusú sejtreakciók elengedhetetlenek a védelemhez, és egyre több állat- és humánvizsgálatból származó bizonyíték támasztja alá, hogy a CD8+ T-sejtek is védő szerepet játszanak (Flynn, 2001). Általában azonban nehéz volt erős sejtes immunválaszt indukálni emberben alegység vakcinákkal. A DNS-vakcinák, a rekombináns vírusvektorok és a fehérje/adjuváns kombinációk mind CD4+, mind CD8+ T-sejteket indukálnak, azonban ezen antigénszállító rendszerek egyike sem indukál magas szintű antigénspecifikus T-sejteket, ha önmagukban alkalmazzák.

A heterológ prime-boost immunizálási stratégiák két különböző, ugyanazt az antigént kódoló oltóanyag beadását foglalják magukban, több hét különbséggel. A DNS prime-rekombináns módosított vacciniavírus Ankara (MVA) boost alkalmazása magasabb szintű antigén-specifikus CD4+ és CD8+ T-sejteket indukál, mint a homológ emlékeztető oltás ugyanazzal a vektorral számos különböző betegségmodellben (Schneider, 1998; McShane, 2001). Tekintettel a BCG gyermekkori védőhatékonyságára, ideális esetben a BCG lenne a bevezető immunizálás egy ilyen prime-boost stratégiában. Ennek érdekében a 85A antigénre, mint antigénjelöltre összpontosítottunk. A 85A antigén erősen konzervált az összes mikobaktériumfaj között, és a BCG összes törzsében jelen van. A 85A antigén az M. tuberculosis egyik fő szekretált antigénje, amely a 85 antigén komplex (A, B és C) részét képezi. Ez a komplex képezi mind az M.tb, mind a BCG szekretált fehérjéinek nagy részét. Részt vesz a fibronektin sejtfalon belüli megkötésében, és mikoliltranszferáz aktivitással rendelkezik. A 85A antigén immundomináns egér- és emberkísérletekben, és védő hatású kis állatokban (Huygen, 1996).

Rekombináns módosított vacciniavírus Ankara (rMVA). Sok vírust potenciális rekombináns vakcinaként vizsgáltak. A himlő élő vaccinia vírussal történő vakcinázással történő sikeres világméretű felszámolása rávilágított a vaccinia rekombináns felhasználásra. Az elmúlt évek felismerése, hogy a himlővírus nem replikálódó törzsei, mint például az MVA és avipox vektorok immunogénebbek lehetnek, mint a hagyományos replikáló vaccinia törzsek, növelte ennek a megközelítésnek a vonzerejét. Az MVA (módosított vacciniavírus Ankara) egy vacciniavírus-törzs, amelyet több mint 570-szer passzáltak madársejteken keresztül, emberi sejtvonalakban nem replikálódik, és jó biztonsági eredményekkel rendelkezik. Több mint 120 000 oltottnak adták be a himlő felszámolási program részeként, káros hatások nélkül, a magas kockázatú csoportok szándékos vakcinázása ellenére (Stickl, 1974; Mahnel, 1994). Ez az emberben tapasztalható biztonság összhangban van az MVA állatmodellekben tapasztalt avirulenciájával. Az MVA-nak hat fő genomi deléciója van a szülői genomhoz képest, ami súlyosan veszélyezteti az emlőssejtekben való replikáció képességét (Meher, 1991). Nem dokumentáltak replikációt nem transzformált emlőssejtekben. A vírus replikációja a sejtek fertőzésének késői szakaszában blokkolódik, de fontos, hogy a vírus és a rekombináns fehérje szintézise még ezen abortív fertőzés során sem károsodik. A vírusgenom stabilnak bizonyult csirkeembrió-fibroblasztok nagy sorozata révén. A replikációhiányos rekombináns MVA-t kivételesen biztonságos vírusvektornak tekintették. Állatmodellekkel végzett vizsgálatok során a rekombináns MVA-k avirulensnek bizonyultak, ugyanakkor védőoltásként immunogének vírusos betegségek és rák elleni vakcinaként. A súlyosan immunszuppresszált makákókon végzett közelmúltbeli vizsgálatok alátámasztották azt a nézetet, hogy az MVA-nak biztonságosnak kell lennie immunhiányos emberekben (Akira, 2001; Stittelaar, 2001). Jelenleg számos rekombináns MVA-ról állnak rendelkezésre biztonsági adatok, amelyek jelenleg az I/II. fázisú vizsgálatokban vannak az Egyesült Királyságban és Afrikában. A rekombináns MVA vakcina különböző dózisainak biztonságosságára és hatásosságára vonatkozó hasznos adatok olyan klinikai vizsgálatokból származnak, amelyek olyan rekombináns MVA-val végzett klinikai vizsgálatokból származnak, amelyek a Plasmodium falciparum pre-eritrocita antigénekből származó CTL epitópokat expresszálják egy komplett pre-eritrocita stádiumú antigénhez, a Thrombospondin Related Adhesionhoz. Fehérje (TRAP). A mai napig az MVA ME-TRAP-ot több mint 600 egészséges önkéntesnek (felnőtteknek és gyermekeknek) adták be Oxfordban és Afrikában (Gambiában és Kenyaban), súlyos mellékhatások nélkül (Adrian Hill, nem publikált, személyes kommunikáció). Az önkéntesek háromhetes időközönként 1-3 adagot kaptak, 3-15 x 107 pfu adagonként intradermális vakcinából. Minden alany átmenetileg helyi bőrpírt észlel, jellemzően egy 5 mm-es középső vörös terület, halványabb rózsaszín környező területtel, amely körülbelül 1-7 cm átmérőjű, és a vakcinázás után 48 órával éri el a csúcsot. Az oltás után hét nappal általában csak a központi vörös terület marad meg. Ez a következő hetekben elmúlik, és általában nem tűnik fel 2 hónappal az oltás után. A rekombináns MVA-vakcina kialakulóban lévő biztonsági profilja kiváló, és három másik, Oxfordban készült MVA-rekombináns klinikai vizsgálatából származó adatok is alátámasztják, és jelenleg olyan klinikai vizsgálatok zajlanak, amelyek MVA-kat alkalmaznak HIV, HBV és melanoma kezelésére. Eddig ezeket a vakcinákat több mint 600 embernek adták be súlyos nemkívánatos események nélkül (Hill; személyes kommunikáció). 40 HIV-pozitív személyt, akiket nagyon aktív antiretrovirális terápiával (HAART) kezeltek, legalább 5 × 107 PFU MVA-val oltottak be, amely HIV-t tartalmaz. súlyos mellékhatások nélküli antigének (Dorrell, nem publikált adatok; Cosma és mtsai 2003; Harrer és mtsai, 2005). 7 HIV-pozitív személyt oltottak be malária-antigéneket tartalmazó MVA-val, súlyos mellékhatások és a vírusterhelés jelentős vagy tartós növekedése nélkül (Bejon et al, CID 2006, sajtó alatt).

A 85A antigént kódoló rekombináns MVA MVA85A CD4+ és CD8+ epitópot is indukál, ha egerek immunizálására használjuk. Ha az egereket BCG-vel beindítják, majd MVA85A-t adnak be, akkor az indukált CD4+ és CD8+ T-sejtek szintje magasabb, mint a BCG vagy MVA85A önmagában történő alkalmazása esetén, és ez a rendszer jobban véd, mint bármelyik vakcina önmagában (Goonetilleke és mtsai, 2003). . Az érzékenyebb tengerimalac modellben a BCG, majd MVA85A, majd egy második vírusvektorral, a 85A antigént expresszáló baromfihimlővel vakcinázott tengerimalacok 6/6 tengerimalac életben van a kísérlet végén, szemben a 2/6 tengerimalacokkal. csak BCG-vel vakcinázott sertések és 0/6 kontrollállat (Williams és mtsai, 2005).

Rhesus makákókban ez a BCG prime-MVA85A és Fowpox85A oltás immunogénebb, mint bármelyik vakcina önmagában, és jobban véd, mint a BCG önmagában (verrek és munkatársai, nem publikált adatok).

Klinikai vizsgálatok MVA85A-val Az MVA85A-t (5 x 107 pfu dózisban) 48 egészséges önkéntesnek adták be az Egyesült Királyságban, 21 egészséges önkéntesnek Gambiában és 18-nak Dél-Afrikában, súlyos mellékhatások nélkül. Fázisú vizsgálatainkat úgy terveztük meg, hogy lehetővé tegyük az önkéntes csoportok egymás utáni vakcinázását a mikobakteriális expozíció fokozatos növelésével, hogy minimalizáljuk a Koch-reakció lehetőségét. A Koch-reakció az immunpatológia kialakulását írja le egy tuberkulózisban szenvedő személyben vagy állatban, amikor az M.tb-vel szembeni túlzott immunválaszt stimulálják. Ezt TB-betegségben szenvedő betegeknél írták le, amikor Koch elvégezte eredeti vizsgálatait, amelyekben mikobaktériumokat alkalmaztak a terápiás vakcinázás egyik típusaként. Mostanra a terápiás vakcinázás egérmodelljében kimutatták (Taylor, 2003). A rendelkezésre álló állati adatok azt sugallják, hogy ezek a reakciók nem fordulnak elő M.tb-vel látensen fertőzött egerekben, ami arra utal, hogy az ilyen reakciók korrelálhatnak a magas baktériumterheléssel, és hogy a Koch-jelenség nem jelenthet problémát az egészséges, bár látensen fertőzött emberek vakcinázásában. Ezeket a vizsgálatokat egészséges önkénteseken kezdtük, akik a lehető legnaivabbak voltak a mikobakteriálisan. Bőrteszt-negatív és Elispot-negatív volt PPD-re, ESAT 6-ra és CFP10-re, és korábban nem oltották be őket BCG-vel. Mostanra befejeztük a korábban BCG-vel beoltott önkéntesek beoltásával kapcsolatos vizsgálatokat az Egyesült Királyságban (McShane, Nature Med, 2004), valamint Gambiában.

Két tanulmány van folyamatban Oxfordban. Az első az MVA85A biztonságosságának és immunogenitásának I. fázisú vizsgálata olyan egyéneknél, akik látensen M.tb.-vel fertőzöttek. Mostanra mind a 12 önkéntest beoltottuk súlyos mellékhatások nélkül. A második egy dóziskiválasztási vizsgálat, amely az MVA85A 2 különböző dózisának (1x10^8 és 1x10^7 pfu) biztonságosságát és immunogenitását értékeli egészséges felnőtt önkénteseken, akiket korábban BCG-vel oltottak be. Itt 11 személyt oltottunk be nagyobb dózissal (1x10^8), súlyos mellékhatások nélkül, a fő mellékhatás az oltást követő 24-48 órában fellépő láz, amely 24 óra alatt teljesen megszűnik. Az alacsony dózisú csoport eredményeit a következő néhány hónapban gyűjtik össze.