Bél-Agy tengely: Célok az idősek megismerésének javítására (SmartAge)

Tantárgyak és módszerek:

Longitudinális vizsgálat:

Korábban a Kórház Endokrinológiai, Diabetes és Táplálkozási Szolgálatánál (UDEN) jelentkező T2DM-es betegek "Dr. Josep Trueta" Gironából (Spanyolország) felveszik és tanulmányozzák.

A CSOPORT

Ez a vizsgálat egy kezdeti szakaszból áll, ahol a pácienst egyedüli kezelésként kiegyensúlyozott étrendnek vetik alá energiabevitellel, amelyet egyénileg számítanak ki aszerint, hogy normál testsúlyú (25 kcal x kg) vagy túlsúlyos (20 kcal x). kg súlyú).

Ezt a kezdeti fázist követően, a kiegyensúlyozott diétás kezelés folytatása mellett, a betegek szájon át adott metforminnal kezdik a kezelést 425 mg/nap kezdeti adaggal 12 óránként az első 15 napon, majd 850 mg/nap adaggal folytatják. a tanulmány végéig.

Egy glikémia-érzékelőt helyeznek be tíz napig, valamint egy aktivitás- és alváskövető eszközt (Fitbit), amely rögzíti a fizikai aktivitást ebben az időszakban. Az intersticiális szubkután glükózkoncentrációt ambulánsan, 10 egymást követő napon keresztül, az FDA által jóváhagyott glükózérzékelő (Dexcom G6 ®) segítségével ellenőrizzük. Az érzékelőt a 0. napon helyezik be, és a 10. napon délelőtt leáll.

Ezt a folyamatot 10 nappal a metformin-kezelés megkezdése előtt és 10 nappal a metforminnal végzett 6 hónapos vizsgálati fázis vége előtt meg kell ismételni. A vizsgálat során 6 látogatásra kerül sor, és minden betegbe összesen 3 glikémia-érzékelőt és 3 fizikai aktivitás-monitort helyeznek be. Összefoglalva, a glikémiás szenzor és a fizikai aktivitás monitorozása az 1., 3., 5. viziten indul, és a 2., 4., 6. vizitnél megszűnik.

1. látogatás (1. nap): fizikális vizsgálat, táplálkozási felmérés, bioimpedancia, denzitometria, CGM és aktivitás- és alváskövető eszköz. Beleegyező nyilatkozat

2. látogatás (10. nap): Minta: vér, vizelet és széklet. Diéta, neuropszichológiai teszt, CGM-elvonás, aktivitás- és alváskövető eszköz megvonása, MRI.

3. látogatás (170. nap): fizikális vizsgálat, táplálkozási felmérés, bioimpedancia, CGM és aktivitás- és alváskövető eszköz

4. látogatás (180. nap): Minta: vér, vizelet és széklet. Étrendkövetés, neuropszichológiai teszt, CGM-megvonás és aktivitás- és alváskövető eszköz kivonása. A metformin kezelés megkezdése.

5. látogatás (350. nap): fizikális vizsgálat, táplálkozási felmérés, bioimpedancia, CGM és aktivitás- és alváskövető eszköz.

6. látogatás (360. nap): Minta: vér, vizelet és széklet. Étrendkövetés, neuropszichológiai teszt, CGM-megvonás és aktivitás- és alváskövető eszköz kivonása. A metformin megvonása.

B CSOPORT:

A vizsgálat során 5 látogatásra kerül sor ehhez a csoporthoz:

1. látogatás (1. nap): fizikális vizsgálat, táplálkozási felmérés, bioimpedancia, denzitometria és aktivitás- és alváskövető eszköz. Beleegyező nyilatkozat.

2. látogatás (10. nap): Minta: vér, vizelet és széklet. Diéta, neuropszichológiai teszt és aktivitás- és alváskövető eszköz kivonása.

3. látogatás (180. nap): Diéta követése.

4. látogatás (350. nap): fizikális vizsgálat, táplálkozási felmérés, bioimpedancia és aktivitás- és alváskövető készülék.

5. látogatás (360. nap): Minta: vér, vizelet és széklet. Diéta követése, neuropszichológiai teszt és aktivitás- és alváskövető eszköz megvonása.

TÁRGYAK ADATGYŰJTÉSE HOSSZÚ TANULMÁNYOK:

1. Kiegészítő adatok: életkor, nem és születési dátum.

2. Klinikai változók:

   • Súly
   • magasság,
   • testtömeg-index
   • derék és csípő kerülete
   • derék-csípő arány
   • vérnyomás (szisztolés és diasztolés)
   • zsírtömeg és zsírmentes tömeg (bioelektromos impedancia és DEXA)
   • dohányzás állapota
   • alkoholfogyasztás
   • szokásos gyógyszerek nyilvántartása
   • vérátömlesztés és/vagy véradás személyes története
   • az elhízás, a szív- és érrendszeri események és a cukorbetegség családi anamnézisének nyilvántartása
   • pszichiátriai és evészavar kórtörténet.

3. Laboratóriumi változók: 15 cm3 vért vesznek ki éhezett alanyokból a következő változók meghatározásához a klinikai laboratórium szokásos rutin technikáival:

   • hemogram
   • szőlőcukor
   • bilirubin
   • aszpartát-aminotranszferáz (AST/GOT)
   • alanin aminotranszferáz (ALT/GPT)
   • gamma-glutamil-transzpeptidáz (GGT)
   • karbamid
   • kreatinin
   • húgysav
   • összes fehérje,
   • albumin
   • összkoleszterin | HDL koleszterin | LDL-koleszterin
   • trigliceridek,
   • glikált hemoglobin (HbA1c)
   • ferritin | oldható transzferrin receptor
   • ultraérzékeny C-reaktív fehérje
   • vérsüllyedés
   • lipopoliszacharid kötő fehérje
   • szabad tiroxin (szabad T4) | pajzsmirigy-stimuláló hormon (TSH) | kiindulási kortizol-plazma inzulin
   • gyulladásjelzők | interleukin 6 (IL-6). További 15 cc vért (plazma-EDTA) vonnak ki további elemzésekhez.

4. Székletminta gyűjtés: Minden betegtől székletmintát adunk. A mintát otthon vagy a kórházban kell gyűjteni, a gyűjtéstől számított 4 órán belül laboratóriumba kell küldeni, szétdarabolni és -80ºC-on kell tárolni.

   - A bél mikrobióta elemzése a székletben:

   • Bakteriális DNS és mRNS meghatározása és az LBP-kötő fehérje vizsgálata vérben a bakteriális transzlokáció kimutatására. LBP-kötő fehérje a vérben a bakteriális transzlokáció kimutatására. Hiseq és Nextseq technológia (qPCR és fehérjeanalízis (WB, ELISA), OMICS (RNAseq, 16S, Metabolomics, Metagenomics).
   • A gyulladásos és immunológiai markereket ELISA (enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat) és immunhisztokémiai (IHC) berendezéssel, valamint kvantitatív valós idejű PCR validációval határozzák meg. A qPCR-hez a teljes RNS-t különböző szövetekből izolálják és cDNS-sé írják át.
   • Metabolikus profil meghatározása és metabolitanalízis.
5. Bélgát funkció: Laktulóz:mannit tesztnek való kitettség műtét előtt/után. Plazmamintákat használnak a bélpermeabilitási markerek mérésére: bakteriális endotoxin, sCD14, LBP, ZO-1 és I-FABP.
6. Vizeletminta gyűjtése: Szükséges a triptofán metabolizmusában szerepet játszó metabolikus útvonalak változásainak meghatározásához, valamint a bélmikrobióta szerepének meghatározásához ezekben a metabolikus változásokban.
7. MRI: A BrainAGE biomarker kiszámításához és a kognitív funkciókban részt vevő hálózatok jellemzéséhez szükséges szekvenciák beszerzése megtörténik. Az akvizícióhoz 1,5 T-s szkenner (Ingenia; Philips Medical Systems) 1,5 T-s szkenner (Ingenia; Philips Medical Systems) kerül felhasználásra. Először is, a felépülés-inverziós szekvenciát (T2-FLAIR) használjuk a már meglévő agyi elváltozásokkal rendelkező alanyok kizárására. Ezt követően strukturális szekvenciákat kell beszerezni. A szekvenciákat az agyi szürkeállomány integritásának mérésére (T1 súlyozott), a súlyozott traktusokra, a fehérállományi traktusokra (DTI), a vas felhalmozódására (R2*) és (R2) mérik. *), és funkcionális szekvenciák nyugalmi állapotban (T2*-súlyozott echo-sík képalkotás, EPI).
8. Neuropszichológiai vizsgálat: A megismerés különböző területeit vizsgáljuk meg: memória (Test aprendizaje verbális-TAVEC, Rey-Osterrieth Complex Figure) figyelem és végrehajtó funkció (WAIS-IV, Trail maketing test (Part A y B), Stroop teszt). Ezenkívül a kognitív károsodást Lobo mini-kognitív vizsgájával értékelik. Ezek a tesztek hasznosak lesznek a kognitív profilban a metforminnal végzett farmakológiai beavatkozással összefüggő változások meghatározásában.

Az információk egy jegyzetfüzetben maradnak, és számítógépessé kerülnek a vizsgálat adatbázisába.

STATIKAI MÓDSZEREK:

Mintanagyság: Mivel ez kísérleti tanulmánynak készült, nincs szükség hivatalos mintaméret-számításra. Általános szabály, hogy 30 vagy több beteget kell toborozni egy paraméter becsléséhez, és csoportonként 15-20 résztvevőt, hogy ésszerű becsléseket kapjunk a közepes és nagy hatásméretekről.

Statisztikai elemzések: A kvantitatív paraméterek leíró elemzésén (átlag, szórás, mintanagyság, medián, minimum és maximum) és a többi kategorikus paraméter gyakoriságának feltüntetésén fog alapulni. A csoportok közötti összehasonlítás a páros minták t-próbáján vagy a khi-négyzet teszten alapul. Ezen elemzések eredményei hasznosak lehetnek annak felmérésében, hogy szükség van-e további elemzésekre a betegek kiindulási jellemzőinek esetleges egyensúlyhiányának kiigazításához.

A bél mikrobiota összetételében a metforminnal végzett beavatkozás után bekövetkezett változásokat Heatmaps, Principal Component Analysis (PCA) és PLSDA segítségével elemzik. Többváltozós statisztikai elemzéshez (PLSDA és hierarchikus klaszterezés). A bélmikrobióta és a kognitív tesztek jellemzőit tartalmazó változók logaritmikus transzformálása, interkvartilis tartománybecsléssel szűrése és autoskálás számítással (átlag és az egyes változók szórásával osztva) lépcsőzetes rendezése történik a Metaboanalyst platform segítségével.

A bélmikrobiótában és a kognitív változókban meghatározott változásokat a másodlagos változók (metabolikus, metabolóm, gyulladásos paraméterek) változásaihoz viszonyítva lineáris regressziós analízissel vizsgáljuk SPSS-ben. Az agykép változókat speciális programokkal (MATLAB, SPM12) elemezzük.