微生物成分と草花粉を用いたヒト鼻チャレンジモデルの開発

研究デザインと方法論

この研究には、被験者に投与されるさまざまな点鼻薬課題を含む 3 つの部分が含まれます。

1. 特定の患者において以下のいずれかを含む細菌またはウイルス成分；

   1. MPLA（モノホスホリル脂質A）は細菌のリポ多糖に似ています
   2. PolyIC (ポリイノシン酸とシチジル酸): ウイルス成分
   3. PolyICLC（ポリリジンで安定化されたポリIC）：ウイルス成分
   4. レシキモド：ウイルスミミック
2. ツベルクリン：結核を引き起こすバクテリアであるウシ型結核菌から部分的に精製されたタンパク質誘導体（PPD）。
3. アレルゲン: 点鼻スプレーのチャレンジ エージェントはチモシー草の花粉です。

募集

目標は、合計174人の被験者を募集することです。 被験者は、新聞の広告、キャンパス内のポスター、GP サービス、セント メアリー病院の結核診療所を含むセント メアリー病院の外来診療所を通じて特定されます。 私たちは完全なインフォームドコンセントを得る。 すべてのデータは、GCP および地域の情報ガバナンス ガイドラインに従って管理されます。

被験者数と投与量

パート 1: MPLA、ポリ IC、ポリ ICLC、およびレシキモドを使用した微生物成分による経鼻投与チャレンジ。 こちらはAパートとBパートに分かれています。

パート 1A (n=32): 忍容性および SAM に基づく漸増用量試験。 8 人の健康なボランティアの 4 つのコホート (8 人中 4 人が草花粉、イエダニに対するアレルギー、または花粉症の病歴)。 微生物成分ごとに 1 つのコホート。 各コホートには、鼻の生理食塩水コントロールチャレンジと、鼻の微生物成分チャレンジの3回の漸増用量が与えられます。

• 生理食塩水100μl中の微生物成分10μg
• 生理食塩水100μl中の微生物成分100μg
• 生理食塩水100μl中の微生物成分500μg

パート 1B (n=64): 追加の特別サンプリング プローブ (SSP) および掻爬術を伴う単回投与、最大 16 人の健康なボランティアの単一コホート (草花粉、ハウスダスト ダニ、花粉症の病歴に対する 16 のアレルギーのうちの 8 つ)。 忍容性と SAM 反応を確立した後、各被験者に生理食塩水コントロールと 1 回の最高用量を与えました。

レシキモッド:

パート B では、鼻孔あたり 10 μg が 36 人のボランティアに投与されます。

12名のアレルギー性喘息患者 12名のアトピー性ボランティア 12名の非アトピー性ボランティア

パート 2: ツベルクリンによる経鼻用量漸増チャレンジ。 こちらはAパートとBパートに分かれています。

パート 2A (n=16): これは、合計 16 人の潜在性結核 (LTB) 被験者から構成されます。

• 100μlの0.1 TU、n = 4
• 100μlで1.0 TU、n = 4
• 100μlで2.0 TU、n = 4
• 100μl で 5.0 TU、n = 4 各コホートには 1 つのチャレンジしかありません。 開始線量は 0.1 TU と非常に低いです。 忍容性が良好な場合、被験者は次に高い用量の 1.0 TU に進みます。 これも十分に許容される場合、被験者は次に高い用量の 2.0 TU に進み、次にこのグループの最高用量の 5.0 TU に進み、常に被験者の安全を確保します。

パート 2B (N=16): 追加のサンプリングによる最高用量。 これは、2 つのグループ (8 人の健康なボランティアと 8 人の潜在性結核患者) の 16 人で構成されています。

グループ 1: 潜在性結核患者、No.人数 = 8 このグループは最高用量 (5-10.0 TU) ツベルクリン チャレンジの。 各グループの8人の被験者のうち、2人はプラセボ（生理食塩水ダミースプレー）を受け取り、残りの6人はツベルクリンスプレーチャレンジを与えられます.

グループ 2: 健康なボランティア、いいえ。人数 = 8 このグループも最高用量 (5-10.0 TU) ツベルクリン チャレンジの、忍容性の対象。 8人の被験者のうち、2人はプラセボ（生理食塩水ダミースプレー）を受け取り、残りの6人はツベルクリンスプレーチャレンジを与えられます

パート 3 (n=46): チモシーグラス花粉による鼻アレルゲンチャレンジ

最初に 30 人を調査します。12 人からなる 1 つのグループは花粉症、12 人からなる 1 つのグループは草花粉アレルギーを伴う喘息、6 人からなるグループは非アレルギー性で喘息のない人です。 追加のグループでは、花粉症の 16 人を対象に、鼻腔内スプレー チャレンジ後に特殊なサンプリング プローブ (SSP) を使用して、表面の鼻腔内液の連続サンプルを採取することによって調査する必要があります。

1. グループ 1: 花粉症の人、n = 12
2. グループ 2: アレルギー性喘息患者、n = 12
3. グループ 3: 健康でアトピーでない人、n = 6
4. 追加グループ 4: 花粉症の人、n=16

研究における鼻処置

1. 鼻洗浄（鼻洗浄）：一日の始まりに、少量の塩水（生理食塩水）を鼻に通して鼻洗浄を行います。 この手順は、鼻をきれいにする他の手順の前に実行されます。 鼻洗浄液から得られた液体は廃棄され、分析されません。
2. 鼻腔内液の吸収 (nasosorption または SAM): 柔らかいティッシュ ペーパーのように見える吸収性素材の小さなストリップを使用して、鼻孔の内側表面から水分を吸収します。 特殊な吸収紙を鼻の穴に入れ、2分間放置して鼻腔内の液体を吸収させ、あぶらとり紙のようにやさしく吸引します。 紙を鼻に入れるとくすぐり、目が少し涙ぐむことがあります。 しかし、経鼻吸収は害を及ぼさず、私たちの方法は赤ちゃん、子供、大人によく耐えられることが証明されています. 紙は鼻液を吸収し、鼻細胞によって生成された多くの物質が紙から抽出され、実験室で測定されます。
3. 鼻掻き（鼻掻爬またはRhinoprobe）：小型の滅菌使い捨てプラスチックプローブを鼻に挿入し、鼻孔の内側表面にそっと押し付けます。 長さ 3 インチのプローブには、端に小さなスクープがあり、ほとんど見えません。 各鼻孔から 24 個の小さなサンプル (ピンヘッド、2 mm の組織) が、不快感を抑えるために神経の供給が減少している鼻の部分から採取されます。 このサンプルを採取しても出血はしませんが、軽度の不快感が生じたり、目がわずかに涙が出たりすることがあります。 プローブは、鼻孔の表面から鼻細胞を収集し、分析のために送信します。 この方法は、多くの成人、子供、および乳児に対して実施されており、非常に忍容性が高い.
4. 特殊なサンプリング プローブ (SSP): 鼻の表面の粘膜液は、特殊なサンプリング プローブまたはエレクトロ スプレーを使用して鼻腔の粘膜液から液滴を跳ね返す SSP を使用して収集することもできます。 これは、単一の鼻孔から数時間連続してサンプリングすることによって行われます。 この特殊なサンプリング プローブ (SSP) を人の鼻に使用すると、サンプルが採取されている間、わずかにくすぐったい感覚があります。 これはなかなか気がつきません。

統計分析

データの分布は、ShapiroWilks 検定によって評価されます。これは、データが正規分布 (パラメトリック) か非正規分布 (ノンパラメトリック) かを判断します。

通常のデータは、次のようにグラフで表示されます。

• 算術平均と平均の標準誤差 (SEM)
• または SD 付きの手段
• または信頼区間 (CI) 付きの平均

非正規データは、次のようにグラフィカルに表示されます。

箱ひげ: 中央値、四分位数、範囲

非正常データについては、ベースラインからの差を、各時点でアクティブ チャレンジ エージェント (異なる用量) およびプラセボについて測定し、AUC を計算します。 プラセボ (活性プラセボ) からの AUC の差を計算し、有意性をノンパラメトリック ウィルコクソン符号順位検定 (単一母集団) で検定します。 曲線下面積 (AUC) は、鼻チャレンジ エージェントに応じて、定義されたさまざまな時間にわたって訴えられるものとします。