嚢胞性線維症の非侵襲的出生前診断 (NIPD)

母親の血液中を循環する胎児 DNA を分析する技術の最近の開発により、出生前診断 (PD) に新たな展望が開かれました。 非侵襲的 PND (NIPD) は現在、胎児の性別 (X 染色体に関連する遺伝的疾患) とアカゲザルの遺伝子型を決定するための最適な方法です。 NIPD は、父系伝染の変異による単一遺伝子疾患の診断への応用を見出し始めています。 しかし、多くの技術的課題が依然として日常的な診断応用を妨げており、コスト、信頼性（偽陰性...）、装置およびバイオインフォマティクス研究の複雑さの側面を考慮して解決する必要があります。

研究者らは、循環遊離胎児 DNA (cff-DNA) を分​​析して、CFTR 複合ヘテロ接合性を持つ家系における父親の変異を検索することにより、母体血液からの嚢胞性線維症の分析的および臨床的 NIPD 検査を開発および検証することを提案しています。

リアルタイムPCRプラットフォームと連携したMEMOに基づく検査手法を利用して、微量DNA変異体の検出が可能です。 この技術は、一般的ながんによく見られる遺伝子のモザイク (1% 未満) の変異によく使用されます。 父性突然変異の陽性検出は常に 2 番目のミニシーケンス技術によってチェックされます。

特定の CFTR 検査の前に、ケースワークの研究に適合した Mini STR の市販キットを使用して、各サンプルの DNA プロファイルが決定されます。 マーカーの三対立遺伝子プロファイルは、研究対象の標本に胎児 DNA が存在することを証明するため、cff-DNA の欠如または不十分な量に関連する偽陰性を制限します。

研究者の分析方法の検証ステップは、人工的に作成されたキメラ DNA 対照サンプルに対して行われます。 その後、この検査は、研究期間（2012年から2013年）中に研究室でCF要求のPNDまたはPGD（着床前診断）の対象となった妊婦の母体血清の遡及研究によって臨床的に検証される予定だ。

研究者の組織は、嚢胞性線維症の PGD、PND、および NBS (新生児スクリーニング) の参照センターです。 サンプルは現在の規制に従って収集されます。分析前のサンプル処理はリアルタイムで行われ、血漿は研究の第 2 段階のために保管されます。

提案されたテストの検証により、次のことが可能になります。

• 研究サンプル中の微量 DNA の存在を確認する外部品質管理 (QC) を行うため。 この QC は、母親のゲノムに存在しないゲノム配列の検索に基づいて、すべての NIPD 検査に使用できます。
• 同じ性質の突然変異を検出することにより、他の単一遺伝子疾患における新しいNIPD検査用に開発できる、微量の突然変異DNAを検出する高感度の方法を得る。

研究者らのプロジェクトは、CFTR複合ヘテロ接合性を持つ家系における父方対立遺伝子の検索に限定されているが、侵襲的処置を減らすために研究者らが開発を目指している嚢胞性線維症の出生前診断アプローチの実施における第一歩である。