A cisztás fibrózis nem invazív prenatális diagnózisa (NIPD).

Az anyai vérben keringő magzati DNS elemzésére szolgáló technikák közelmúltbeli fejlesztése új távlatokat nyitott a prenatális diagnózis (PD) számára. A nem invazív PND (NIPD) ma a választott módszer a magzati nem (X-kromoszómához kapcsolódó genetikai rendellenességek) és a rhesus genotípus meghatározására. Az NIPD alkalmazásokat kezd találni a monogén eredetű betegségek diagnosztizálásában az apai átvitel mutációira. Számos technikai kihívás azonban még mindig gátolja a rutinszerű diagnosztikai alkalmazásokat, amelyeket a költségek, a megbízhatóság (hamis negatív ..) és a berendezések és a bioinformatikai vizsgálatok összetettségének figyelembevételével kell megoldani.

A kutatók egy analitikai és klinikai NIPD-teszt kidolgozását és validálását javasolják az anyai vérből származó cisztás fibrózisra a keringő szabad magzati DNS (cff-DNS) elemzésével, az apai mutáció keresésére a CFTR vegyület heterozigóta családokban.

A MEMO-n alapuló vizsgálati módszer, amely egy valós idejű PCR-platformhoz kapcsolódik, felhasználható nyomokban lévő DNS-mutánsok kimutatására. Ezt a technikát általában a rákos megbetegedések mozaikjában (kevesebb, mint 1%-ban) előforduló mutációk esetén alkalmazzák. Az apai mutáció pozitív kimutatását mindig egy második mini szekvenálási technikával ellenőrzik.

Bármely speciális CFTR-teszt előtt minden egyes minta DNS-profilját meghatározzák egy kereskedelmi forgalomban lévő Mini STR készlettel, amely az esetek tanulmányozására lett adaptálva. A markerek tri-allélikus profilja bizonyítja a magzati DNS jelenlétét a vizsgált mintában, és így korlátozza a cff-DNS hiányával vagy elégtelen mennyiségével kapcsolatos hamis negatívokat.

A kutatók analitikai módszereinek validálási lépése mesterségesen előállított kiméra DNS kontroll mintákon történik. Ezután a tesztet klinikailag validálják egy olyan terhes nők anyai szérumának retrospektív vizsgálatával, akiknél a vizsgálati időszak (2012-2013) során a laboratóriumban PND vagy PGD (preimplantációs genetikai diagnózis) kérték a CF-t.

A vizsgálói struktúra a cisztás fibrózis PGD, PND és NBS (újszülöttek szűrése) referenciaközpontja. A minták gyűjtése a hatályos előírásoknak megfelelően történik. Az analitikai mintakezelés valós időben történik, és a plazmát a vizsgálat második lépéséhez tárolják.

A javasolt tesztek validálása lehetővé teszi:

• Külső minőségellenőrzés (QC), amely megerősíti egy kisebb DNS jelenlétét a vizsgált mintában. Ez a minőségellenőrzés minden olyan NIPD-teszthez használható, amely az anyai genomból hiányzó genomiális szekvencia keresésén alapul.
• Rendkívül érzékeny módszerrel rendelkezni a nyommutáns DNS kimutatására, amely új NIPD tesztekhez fejleszthető más monogén betegségekben, azonos természetű mutációk kimutatásával.

A kutatók projektje, amely az apai allél felkutatására korlátozódik a CFTR vegyület heterozigóta családjában, az első lépés a cisztás fibrózis prenatális diagnosztikai megközelítésének megvalósításában, amelyet a kutatók az invazív eljárások visszaszorítása érdekében kívánnak kidolgozni.