CLLにおける高フェノールEVOOによる食事介入

エクストラバージン オリーブ オイル (EVOO) は、地中海式食事の主要な構成要素です。 オリーブオイルには、脂肪酸、ステロール、カロテノイド、テルペノイド、フラボノイド、トコフェロール、オリーブポリフェノールなど、200 種類以上の化合物が検出されています。 バージン オリーブ オイルには、さまざまな重要なフェノール成分が含まれており、主にチロソール、ヒドロキシチロソール、オレオカンタール (OC)、オレアシン (OL)、リグストロシド、オレウロペイン アグリコンなどの化合物に対応しています。は EVOO から分離され、抗酸化、抗炎症、抗癌、神経保護、抗糖尿病などの幅広い生物学的効果を示し、このため、より科学的な注目を集めています。

西側諸国で最も一般的に診断される成人白血病である慢性リンパ性白血病 (CLL) は、すべての白血病の約 4 例に 1 例の原因です。 骨髄、末梢血、リンパ組織、脾臓にモノクローナル B 細胞が蓄積することを特徴としていますが、多くの場合、無症候性で発生が遅いです。 CLL 患者は、必ずしも即時治療を必要とするわけではありません。 ただし、症状が現れた患者さんの生存期間の中央値は、臨床病期に応じて 18 か月から 6 年です。 CLL の診断基準は、少なくとも 3 か月間の末梢血中のモノクローナル B リンパ球が 5000 個/ml 以上、前リンパ球が 55% 以下、分化クラスター (CD)5 と B 細胞表面抗原 CD 19 の共発現、 CD 20、および CD 23、低レベルの CD 20、CD 79b、および表面免疫グロブリン (sIg) の低発現、およびカッパまたはラムダ軽鎖制限。 予後を推定するための標準的な臨床手順は、Rai らと Binet らによって開発された臨床病期分類システムです。

造血におけるアポトーシスのレベルは、前駆細胞および幹細胞の増殖の調節に関与するメカニズムに関する情報を提供する可能性があります。 アポトーシスの機能障害は、白血病と関連していることがわかっています。 CLL 患者の骨髄前駆細胞における Apo-1/fas (CD 95) アポトーシス マーカーの発現の増加と、それに対応するアポトーシス B 細胞リンパ腫 2 (BCL-2) 阻害剤の減少が報告されています。 最近の研究では、CLL患者のリンパ球の増加は、CLL細胞の増殖とアポトーシスの間のバランスの乱れによる可能性があることも示されましたが、アポトーシス関連タンパク質の発現の変化は、CLLのBinetのすべての段階で認識されます。 Ｂリンパ球の生存を高めるために、ｐ３８レベルが低下し（アポトーシスに対する抵抗性）、誘導性骨髄性白血病細胞分化タンパク質（Ｍｃｌ－１）およびサバイビンレベルが上昇する。

サバイビンは、カスパーゼを阻害し、細胞死をブロックするアポトーシスのタンパク質阻害剤です。 血液がんを含むほとんどのがんで高度に発現しており、臨床転帰不良と関連しています。 アポトーシス マーカー CD 95 (Apo-1/fas) およびそのリガンドである CD 95 は、免疫恒常性を維持するためにアポトーシス誘導を媒介するデス レセプター リガンドであり、癌細胞でアポトーシス誘導を媒介する能力を持ち、18 キロダルトンを生成します。カスパーゼ切断サイトケラチン-18 (cCK-18) と呼ばれるフラグメント。

オレオカンタールは、ヒト急性前骨髄球性白血病および骨髄腫細胞において、in vitro で細胞毒性およびアポトーシスを誘発することが示されています。 また、さまざまながん細胞株でリソソーム膜透過性を誘導することにより、一次壊死と細胞アポトーシスを引き起こす可能性があります。

in vitro でのオレオカンタールの強力なアポトーシス特性を考慮したこの研究の目的は、実際の臨床環境下で、血液学的および生化学的プロファイルに影響を与えるその能力を調査することでした。また、疾患の進行を考慮した後の CLL 患者における細胞アポトーシス マーカー Survivin、cCK18- (カスパーゼ活性マーカー)、および Apo1fas/CD 95。 このため、CLL 患者におけるオレオカンタールが豊富な EVOO の抗腫瘍効果を比較する食事介入研究が実施されました。

材料と方法

現在の研究では、2017-2018 シーズンに収穫されたオリーブ (Olea europaea L.) から得られた 300 の商用サンプル (>3000 サンプルのデータベースから選択) のスクリーニングが、次の基準を満たす油を特定するために: エクストラバージン油は、オレオカンタルとオレアシンの含有量が高く (D1 インデックス)、他のセコイリドイド共役フェノール類 (3-8) または遊離チロソールとヒドロキシチロソールの含有量が少ないか、まったくない。オレオカンタールは、ギリシャ、コルフのアギオス マタイオスの「ザ ガバナー」カンパニーから提供されたリアノリア ケルキラス品種の単変種油から得られました。 このオイルには、オレオカンタール 416±7 mg/Kg、オレアシン 284±10 mg/Kg、チロ​​ソール < 10 mg/Kg、ヒドロキシチロソール < 10 mg/Kg (D1 = 700 mg/Kg) が含まれていました。 qNMR分析とは別に、ヒドロキシチロソールとチロソールの含有量も、オリーブ油バイオフェノールの測定のための標準IOCメソッドによって測定されたことに言及する必要があります。 選択されたEVOOは、分析直後から研究期間の開始まで、化学組成の変化を最小限に抑えるために摂氏4度で保存されました。

対象 ラコニア総合病院 (ギリシャ) の血液クリニックの 21 人の患者が、食事介入に参加するために登録されました。 CLL の診断は、標準的な基準によって確認されました。 Rai ステージ 0 ～ II の患者は未治療でした。

食事介入 パイロット研究の開始時に、食事介入前の 3 か月目と 6 か月目の各患者の病歴の健康診断が記録されました。 食事介入前の臨床記録は、血液学的プロファイル、脂質プロファイル、空腹時血糖、肝臓および腎機能マーカーを含む生化学検査、ならびに骨髄生検、腫瘍マーカーおよび免疫表現型に関するデータに関するものです。 薬物治療または併存疾患も記録されました。

パイロット食事介入の開始時に、CLL 患者 21 人のグループが、食事の影響を調査するために、オレカンタールとオレアシン (OC/OL) が豊富な EVOO を 1 日 40 ml を食事の前に 6 か月間摂取しました。研究された血液学的、生化学的および分子マーカーに関するA-EVOOの。 消費されたEVOO OC / OLの量は、以前の研究に従って選択されました。 (15) 患者は通常の食事を継続するようにアドバイスされました。研究プロトコルの順守は、2 週間ごとに 2 回の 24 時間電話によるリコールによって評価されました。

21 人の CLL 患者からの末梢血サンプルが、食事介入の開始時、3 か月後、および 6 か月後に収集されました。 空腹時血糖、血中脂質プロファイル、および肝機能と腎機能のマーカーについて、全血球数と完全な生化学的検査が行われました。 血清分析は、生化学分析装置（Olympus AU-600、オリンパス、東京、日本）を使用して、同じ手順を使用し、同じラボで実施されました。

市販の酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を供給業者の指示に従って使用して、アポトーシスマーカーM30 Apoptosense-cCK18（VLVbio Hästholmsvägen、スウェーデン）、Apo-1 / Fas / CD 95（Novus Biologicals、コロラド州、米国）をアッセイしました。 ）および抗アポトーシスマーカーSurvivin（OriGene Technologies、Inc USA）を、調査したすべての時点ですべての患者の血漿サンプルに加えました。

SPSS v.24 (SPSS Inc., Chicago, IL. USA) であり、有意水準は 0.05 に設定されました。 最初に、年齢、性別、臨床的、生化学的および分子マーカーに関して、サンプルの記述的分析が行われました。 コルモゴロフ-スミルノフ検定を使用してチェックすると、マーカーは p < 0.05 有意水準で歪んでいることがわかりました。 したがって、ノンパラメトリック マンホイットニー U 検定を使用して、介入群と​​対照群の違いを見つけました。

介入の時間間隔の違いは、Friedman ノンパラメトリック検定とそれに続く多重比較のための Dunn 検定で評価されました。