이눌린과 S. Salivarius는 구취를 감소시킵니다

참가자 이 무작위, 통제, 이중 맹검, 병렬, 제2상 임상 시험에서 혀 코팅이 있는 상태에서 구취를 호소하는 성인 환자(18세 이상)가 참여하도록 초대되었습니다. 이들은 2015년 8월부터 11월까지 UPF(University of Passo Fundo) 치의학 병원에서 배포한 포스터 형태의 초대장으로 식별되었습니다. 치과 학교는 >200.000의 도시인 UPF, Passo Fundo의 메인 캠퍼스에 있습니다. 주민. 구강 구취는 처음에 혀 코팅 식별을 위한 구강 검사로 진단되었고, 구취를 확인하기 위한 관능 검사가 뒤따랐습니다. 총 표본 크기는 α = 5% 및 검정력 = 80%인 테스트에서 처리 간 Halimeter 감소의 80% 차이를 고려하여 45명의 참가자에서 추정되었습니다. 구취는 Halimeter 값 ≥ 75ppb로 정의되었습니다. 모든 참가자는 연구에 참여하기 전에 서면 동의를 받았습니다. 연구 프로토콜은 지역 윤리 위원회(CAAE: 40334914.0.0000.5342)의 승인을 받았습니다.

임상 검사 구강 검사는 숙련된 치과의사(CRM)가 수행하여 충치, 플라크, 치은염, 치주낭 및 모든 치과 보철물을 확인했습니다. 혀를 육안으로 검사한 후 코팅을 설명하고 코팅 지수를 4단계로 분류했습니다: 0 - 코팅 없음; 1 - 1/3의 얇은 코팅; 2 - 1/3 이상 얇은 코팅 또는 1/3만 두꺼운 코팅; 3 - 1/3.5 이상 두꺼운 코팅

구취의 평가 임상 검사 후 구취는 관능 및 Halimeter‡ 테스트로 정량화되었습니다. 이들은 전문 심사관(CKR)과의 테스트 및 재테스트 비교를 사용하여 관능 테스트 및 코팅 지수에 대해 80% 이상의 동의 및 재현성 수준으로 훈련되고 보정된 검사관(CRM)에 의해 수행되었습니다. 모든 환자는 오전 8시에서 11시 사이에 검사를 받았습니다. 환자들은 검사 전 이틀 동안 마늘, 양파 및 기타 식품 조미료 섭취를 피하고 마가린, 우유, 튀김, 정어리, 살라미 소시지, 볼로냐, 소시지, 붉은 고기, 치즈, 성분에 유황이 함유된 음식(양배추, 브로콜리 , 콜리플라워, 달걀), 음주 및 흡연, 다른 곳에서 보고된 프로토콜에 따름.5, 13, 15 검사 당일 아침에는 사탕과 껌을 피하고 아침 식사와 양치질은 물로만 허용하였다. 일단 연구에 포함되면, 환자들은 시험에서 제공된 잇몸 이외의 잇몸을 피하도록 요청받았습니다.

관능 검사 휴식 중인 환자는 1분 동안 코로 숨을 쉬면서 입안에 공기를 머금도록 지시받았다. 환자의 입에서 10cm 떨어진 곳에 검사관(CRM)이 있는 상태에서 입을 통해 불어냅니다. 환자의 호흡은 다음과 같이 0에서 5로 평가되었습니다: 0 - 냄새 없음, 1 - 거의 감지할 수 없는 냄새, 2 - 약간의 악취, 3 - 보통 냄새, 4 - 강한 악취 및 5 - 심한 악취.21 환자를 선택하기 위해 혀 코팅이 있는 상태에서 이 점수가 1 이상일 때 구취가 있는 것으로 간주했습니다.

Halimeter 환자들은 VSC 수준을 측정할 수 있는 Halimeter를 사용하여 객관적으로 호흡을 측정했습니다. 구취는 장치가 75ppb 이상을 기록할 때 식별됩니다.1, 22 일회용 빨대를 혀 위의 환자 입에 삽입하여 측정했습니다. 제조사에 따르면 최종 결과는 3회 측정의 평균값으로 나왔다.

프리바이오틱, 프로바이오틱 및 플라시보 락토바실러스 살리바리우스 G60, 이눌린 및 플라시보§(고마그론으로 구성)는 외형, 냄새, 맛 및 일관성이 동일한 껌 형태로 제조되어 다음 실험 그룹을 만들었습니다. LS+이눌린: 락토바실러스 살리바리우스 G60 10억 콜로니 형성 단위(CFU) + 이눌린 1g; LS: 락토바실러스 살리바리우스 G60 10억 CFU; 그리고 위약. 환자들은 10일 동안 12시간마다(아침 식사 후와 저녁 식사 후) 1개의 껌을 사용하도록 지시받았다.

삶의 질 평가 구강 관련 삶의 질(QOL)을 위해 브라질 포르투갈어로 번역 및 검증된 설문지 OHIP-14를 적용했습니다.23 최종 점수 범위는 0(최고)에서 56(최악)까지입니다. 참가자들은 0일과 14일에 설문지에 응답했습니다.

연구 프로토콜 그림 2에 설명된 단계에 따라 치과 진료소에서 환자를 평가했습니다. 정보에 입각한 동의서에 서명한 후 임상 및 삶의 질 데이터를 기록하고 혀 코팅을 평가하기 위한 구강 검사와 구취를 확인하기 위한 관능 검사를 실시했습니다. 이후 Halimeter를 이용하여 구취를 객관적으로 측정하였다.

등록된 환자는 컴퓨터로 생성된 엔벨로프 코드를 사용하여 검사자(CRM)에 의해 무작위 배정되었으며 잇몸 제조업체에서 3명의 환자에 대해 1:1:1 블록으로 구성했으며 각각 3가지 치료(LS+이눌린, LS 및 위약) 중 하나를 포함했습니다. ). 따라서 심사관과 참가자는 치료에 대해 눈이 멀었습니다. 환자들은 면담 후 4일째부터 시작하여 1차 면담 후 2주(10일 치료)에 중단하여 12시간마다 1개의 껌을 사용하도록 지시받았다. 치료를 시작하기 전 4일의 지연은 OHIP-14에 대한 회상 편향의 감쇠를 위한 14일의 간격을 허용했습니다. 각 껌을 입에 넣어 완전히 용해시켜 부드러운 저작을 허용했습니다. 최종 검사는 치료 마지막 날, 마지막 잇몸 사용 12시간 후, 반복 코팅 지수, 관능 및 할리미터 테스트, 삶의 질 평가(OHIP-14)를 실시하였다. 구강 위생에 대한 지침은 심사관(CRM)이 제공했습니다. 환자는 혀 청소 또는 일상적인 칫솔질 변경과 같이 구취를 변화시킬 수 있는 새로운 접근 방식을 피하도록 요청받았습니다. 치료 순응도는 받은 잇몸의 총 수와 관련하여 사용하지 않은 잇몸의 수로 평가되었습니다. 안전성은 두통, 구강 불만 및 복부 증상(예/아니오)을 포함하여 환자가 설명한 부작용에 따라 특성화되었습니다. 1차 결과는 관능 검사, 할리미터 및 코팅 지수였고, 2차 결과는 삶의 질과 치료 순응도/안전성이었다. 3개의 처리군으로의 할당은 데이터 분석이 종료된 후에야 밝혀졌다.

Lactobacillus salivarius G60에 의한 이눌린의 대사 이눌린을 탄소원으로 대사하는 Lactobacillus salivarius G60의 능력은 5 ml의 환경 반액에 5 ml의 완충 생리 식염수에 세균 현탁액 LS(1x10⁸-⁹ 세포/ml)를 접종하여 테스트했습니다. 포도당과 자당이 없지만 이눌린이 보충된 방법(LDM)의 검출 한계로 정의됩니다. 다음 배양 배지를 준비하였다: PYG(펩톤 효모 + 1% 글루코스), PYI(펩톤 효모 + 1% 이눌린) 및 PY(펩톤 효모). 후자는 음성 대조군으로 사용되었습니다. 앞서 배양한 LS G60을 이들 3가지 용액에 각각 포함시키고 30℃에서 24시간 동안 배양하였다.

분광광도계(Genesys 10S VIS, 미국 매디슨 소재) 600 mm를 사용하여 광학 밀도(OD) 분석을 수행하였다. 흡광도를 측정하기 위해 C1.V1=C2.V2 공식(C1: 초기 농도, V1: 초기 부피, C2: 최종 농도 및 V2: 최종 부피)에 따라 LS G60을 사용한 용액을 OD=1로 조정했습니다. 측정은 초기 시간(0)과 2, 4, 6, 8, 10 및 12시간 후에 수행되었습니다. 확인을 위해 모든 테스트를 반복했습니다.

Lactobacillus salivarius G60 Well에 의한 병원성 세균 억제 확산 시험을 수행하였다. 완충 식염수에 담긴 세균 현탁액(1x10⁸-⁹ 세포/ml LS G60) 10ml 3방울을 대두 트립틱 한천에 넣고 최적의 혐기성 조건에서 3시간 동안 30°C에서 배양했습니다. 플레이트를 10ml의 soft soy triptic agar(0.7% agar)로 덮고 혐기성 조건에서 구취 유발 병원체(Porphyromonas gingivalis 및 Prevotella intermedia)의 완충 식염수에 박테리아 현탁액(1x10⁸-⁹ cells/ml) 1ml를 접종했습니다. 정황. 그것들을 30°C에서 배양하고 액적 주변의 미생물 성장 억제 영역을 24, 48 및 72시간에 조사했습니다.

통계 분석 중재에 대해 눈이 먼 저자 중 한 명(SMCJ)이 데이터를 통계적으로 분석했습니다. 환자 그룹 간의 초기 비교는 ANOVA(나이) 및 카이제곱(성별) 테스트를 사용하여 수행되었습니다. 0일과 14일의 치료 값은 쌍을 이룬 데이터에 대한 Wilcoxon 또는 t 테스트에 의해 각 그룹에서 먼저 비교되었습니다. 개입 전 값에 대해 조정된 치료 평균을 비교하기 위해 일반화 선형 모델(GZLM)을 사용했습니다. 공변인 성별 또는 연령의 포함은 Akaike 지수에 따라 결정되었습니다. Halimeter 분석에서는 성별을 공변량으로 입력하였고, OHIP-14에서는 연령을 모델에 포함시켰으나 관능 점수 분석에서는 공변량을 사용하지 않았다. Halimeter와 OHIP-14의 분석을 위해 Gama 분포와 로그 링크를 사용했고, 관능 점수와 코팅 지수에는 포아송 분포와 로그 링크를 사용했습니다. OHIP-14 값에 상수 1을 추가하여 로그를 사용할 수 있도록 했습니다. Least Significant Difference를 사용하여 그룹 간 쌍별 다중 비교를 수행했습니다. Lactobacillus salivarius G60에 의한 inulin의 대사 결과는 ANOVA와 Tukey post hoc test를 이용하여 분석하였다. 통계 분석은 Graph Prism 4.0 및 SPSS v.18 소프트웨어를 사용하여 수행되었습니다. 통계적 유의성에 대해 고려된 한계는 5%였습니다.