RSV 및 세균성 공동 감염이 있는 어린이의 폐렴 지원 치료에서 LiveSpo Navax의 효능

폐렴은 어린이에게 흔한 질병이며 특히 1세 미만 어린이, 유아 및 영양실조 어린이의 주요 사망 원인 중 하나입니다. 세계보건기구(WHO)에 따르면 매년 약 1,290만 명의 어린이가 사망하고 그 중 430만 명(33.4%)이 폐렴으로 사망합니다. 베트남의 경우 전체 사망률이 30~35%인 데 비해 폐렴으로 인한 사망률은 호흡기 질환 중에서 가장 높다(75%). 통계에 따르면 평균적으로 소아는 1년에 1~2회의 폐렴을 포함하여 3~5회의 급성 호흡기 감염을 경험할 수 있습니다. 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 감염과 세균 동시 감염은 중증 폐렴의 주요 원인이며, 동시 감염률은 26.3%에서 43.6%까지 다양합니다. 일반적으로 관련된 박테리아에는 Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus 및 Moraxella catarrhalis가 포함됩니다. 이 박테리아는 RSV에 의한 호흡기 손상을 이용하여 하기도를 침범하여 2차 감염을 일으킬 수 있습니다.

현재 RSV 감염 아동을 위한 백신이나 특정 치료법이 없으며 일반적으로 호흡 부전을 경험하는 아동에게는 산소 요법이 권장됩니다. 단클론 항체 palivizumab과 항바이러스 뉴클레오티드 약물인 리바비린의 사용은 어린이에게 너무 비싸거나 위험한 것으로 간주되며 고위험 환자에게만 권장됩니다. 세균성 동시 감염은 종종 의심되거나 알려진 병원체에 근거한 항생제 치료가 필요하지만 항생제 사용은 상당한 부작용이 있으며 내성 발생에 대한 우려를 제기합니다.

최근 몇 년 동안, 프로바이오틱스는 호흡기 감염의 치료 및 감소를 돕는 것을 목표로 하는 호흡기 감염의 예방 및 지지 요법에 대한 유망하고 안전한 후보로 인기를 얻었습니다. 프로바이오틱스는 적절한 양을 섭취할 때 건강상의 이점을 제공하는 살아있는 미생물로 전통적으로 장 건강을 증진하는 데 사용되어 왔습니다. 그러나 호흡기 감염, 특히 RSV 폐렴에서의 잠재적인 역할은 광범위하게 조사되지 않았습니다. 일부 연구에 따르면 프로바이오틱스의 특정 계통은 바이러스와 직접 상호 작용하여 바이러스를 포획하고 2차 성장을 유도하여 바이러스 유입 및 성장을 억제하거나 면역 반응을 조절하여 호흡기 감염 위험을 줄일 수 있다고 합니다. 그럼에도 불구하고 유아의 기도에 대한 경구 프로바이오틱스의 영향은 일반적으로 지연되고(보통 약 3-12개월) 주로 ARTI 치료의 보조제보다는 예방을 위해 사용됩니다. 따라서 ARTI 치료에서 프로바이오틱스의 대체 전달 경로가 필요합니다. 최근 연구에서 비강 분무형 바실러스 포자 액상 프로바이오틱스(50억개 이상의 B. subtilis ANA4 및 B. clausii ANA39/5mL 앰플 함유 LiveSpo Navax)가 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 감염을 억제하는 동시에 바이러스 부하와 염증을 줄이는 데 강력한 영향을 미칩니다. 이 발견은 프로바이오틱스를 코에 직접 분사하는 것이 ARTI에 대한 빠르고 효과적인 증상 치료가 될 수 있다는 첫 번째 시연입니다.

다음 연구에서 우리는 RSV 및 세균 동시 감염으로 인해 산소 요법이 필요한 중증 폐렴 어린이의 치료를 지원하는 LiveSpo Navax의 효능을 추가로 조사하기 위해 이중 맹검, 무작위 및 대조 임상 시험을 수행했습니다.

방법: 무작위, 맹검 및 대조 임상 시험을 실시합니다. 환자의 부모는 자녀의 성명, 성별, 나이, 산과력, 예방접종력, 항생제 사용력 등 자녀에 대한 다양한 정보를 제공해야 한다. 정보에 입각한 동의를 얻은 후, RSV 및 세균 동시 감염으로 인한 중증 폐렴 환자 100명을 무작위로 두 그룹(n = 50/그룹)으로 배정합니다. 대조군("대조군"이라고 함)은 0.9% NaCl 생리 식염수 및 실험 그룹("Navax" 그룹이라고 함)은 프로바이오틱스 LiveSpo Navax를 받게 됩니다. 환자에게는 연구의 객관성을 보장하기 위해 블라인드 샘플 형태의 코딩된 스프레이가 제공됩니다. 7일 이상 동안 임상적 추적 관찰을 실시하고 비인두 샘플을 0일과 3일에 수집하여 바이러스 부하, 공동 감염 박테리아, 과반응 사이토카인 방출 조절 및 프로바이오틱스 포자의 존재 감소 가능성을 평가합니다. 환자의 코 점막에서.

실시간 PCR은 비인두 샘플에서 미생물을 검출하는 데 사용됩니다. ISO 15189:2012 기준에 따라 표준화되고 베트남 국립 어린이 병원에서 일상적으로 사용되는 실시간 PCR 루틴 프로토콜을 사용하여 RSV 로드 및 공동 감염 박테리아 농도의 변화를 측정하기 위해 반정량 분석을 수행할 것입니다. B. subtilis 및 B. clausii에 속하는 Bacillus 균주의 검출은 베트남 하노이의 Spobiotic 연구 센터에서 일상적으로 수행되는 실시간 PCR SYBR Green 분석을 사용하여 수행됩니다.

ELISA 분석은 전염증성 사이토카인 수준(예: IL-6, IL-8, TNF-알파...) 및 면역글로불린 A(IgA) 수준을 정량화하는 데 사용됩니다. 분석은 제조업체의 지침에 따라 ELISA 키트를 사용하여 수행됩니다.

비강 마이크로바이옴 분석은 한국 서울의 Macrogen에서 2 x 250 bp 실행 구성의 Illumina MiSeq 플랫폼에서 16S rRNA 유전자의 차세대 시퀀싱(NGS)을 사용하여 수행됩니다.

치료하는 동안 환자는 콧물, 흉부 함몰, 건조 구진, 축축한 구진, 산소 측정(SpO2)(%), 맥박(박동/ 분), 호흡(박자/분), 산소 요법이 필요한 일수... 퇴원까지. 환자의 건강 상태는 의사와 간호사가 관찰하고 정보는 의료 기록에 기록됩니다. 연구 기간 동안 부모는 비강 스프레이 또는 경구 투여를 통해 다른 프로바이오틱스를 투여하지 말고 비강 세척을 위해 다른 0.9% NaCl 생리식염수 스프레이를 사용하지 않도록 요청받을 것입니다.

데이터 수집 및 통계 분석에는 개별 의료 기록을 수집하고 환자의 정보를 데이터 세트로 체계적으로 구성하는 작업이 포함됩니다. LiveSpo Navax의 효능은 Navax 및 대조군에서 얻은 다양한 임상 및 준임상 기준에 따라 평가되고 0.9% NaCl 생리식염수와 비교됩니다. 이러한 기준에는 증상이 완화될 때까지의 일수, RSV 로드의 감소 수준(2^△Ct) 및 동시 감염 세균 농도가 포함됩니다. 표적 유전자에 대한 △Ct는 3일째의 Ct(역치 주기) - 0일째의 Ct로 계산되는 반면, 내부 대조군의 Ct는 모든 샘플에서 동일하도록 조정됩니다. 또한, 감소된 수준의 사이토카인(예: IL-6, IL-8, TNF-알파...) 및 IgA가 평가됩니다. 표 분석은 χ2 테스트 또는 예상 셀 값이 5 미만인 이분형 변수에 대한 Fisher의 정확 테스트를 사용하여 수행됩니다. 데이터가 정상적으로 분포되지 않은 경우 Wilcoxon 테스트, t-테스트 또는 Mann-Whitney 테스트를 사용하여 연속 변수를 비교합니다. Spearman의 상관 분석을 사용하여 변수 간의 상관 관계를 평가합니다. 통계 및 그래픽 분석은 GraphPad Prism v8.4.3 소프트웨어(GraphPad Software, CA, USA)를 사용하여 수행됩니다. 모든 분석의 유의 수준은 p < 0.05로 설정됩니다.

예상 결과: (i) LiveSpo Navax는 RSV 감염 증상을 약 25% 더 효과적으로 완화할 것으로 예상되며, Navax 그룹 환자의 90%가 개입 3-7일(증상에 따라 다름)에 증상이 없는 반면 65%는 대조군의 환자 %; (ii) Navax 그룹의 환자는 개입 3일째에 대조군의 환자에 비해 RSV 부하가 더 크게 감소(>10배)될 것으로 예상됩니다.