리슈마니아 항원 신속 진단 테스트 개념 증명 및 검증 연구

내장 레슈마니아증(VL) 또는 칼라 아자르(kala azar)는 레슈마니아 도노바니 복합체의 원생동물 기생충에 의해 발생하며 프레보토민 모래파리에 의해 전염되는 방치된 열대 질병(NTD)입니다. 매년 전 세계적으로 약 50,000~90,000건의 새로운 사례가 발생합니다. 발열, 체중 감소, 비장과 간 비대, 빈혈 등이 특징으로, 치료하지 않으면 95% 이상 사망할 수 있다. 아프리카의 뿔(Horn of Africa)은 전 세계적으로 가장 많은 수의 VL 사례를 차지하고 있으며, 자원이 제한된 원격 환경에 거주하는 지역사회는 감염 위험이 가장 높습니다. 따라서 의료 시설에서는 VL의 조기 및 정확한 진단이 필수적입니다. VL은 적절하게 치료되지 않으면 치명적입니다. 현재 VL 치료에 사용되는 약물은 심각한 부작용을 가질 수 있으며 VL의 임상적 발현은 치료를 안내하기에 충분히 특이적이지 않습니다. 따라서 매우 정확하고(민감하고 구체적인) 저렴하고 간단한 신속 진단 테스트(RDT)는 VL 사례 관리에 매우 중요합니다. 조기에 사례를 발견한 후 적절한 치료를 받는 것도 VL 통제의 핵심입니다.

케냐에서 내장 레슈마니아증은 임상적으로 의심되는 사례에서 39개 아미노산 반복 재조합 레슈마니아 항원에 대한 숙주 항체 검출을 기반으로 rK39 RDT로 진단됩니다. 이 테스트는 약 85%의 최적이 아닌 민감도를 갖기 때문에 다른 추가 진단 테스트가 필요한 경우가 많습니다. 여기에는 기생충 특이적 숙주 항체에 의한 전체 기생충 항원의 응집을 기반으로 한 직접 응집 테스트(DAT)와 림프절 천자, 골수 또는 비장 흡인액에서 염색된 도말에서 아마스티고트의 현미경 검출이 현재 확증 진단을 위한 최적의 표준으로 사용됩니다.

rK39 RDT 및 DAT의 사용이 증가하고 있지만, 이 검사는 활동성 감염과 과거 감염 모두에 존재하는 항슈마니아 항체 검출을 기반으로 하기 때문에 활동성 감염과 과거 감염을 구별할 수 없습니다. 또한 DAT는 결과를 얻기 전에 일부 실험실 기술과 밤새 배양이 필요하며 rK39는 동부 아프리카에서 사용할 때 감도가 낮습니다. 따라서 혈액이나 소변과 같은 최소 침습 검체 수집을 기반으로 하는 항원 검출 기반 테스트를 개발하려는 노력이 있어 왔습니다.

이를 위해 동부 아프리카 내장 레슈마니아증에 대한 차세대 진단 및 경구 치료: 혁신을 통해 환자 치료 전환(VL-INNO) EDCTP 프로젝트에 따라 KEMRI, DNDi, FIND 및 요크 대학 간의 협력을 통해 항원 개발을 목표로 합니다. VL 환자의 소변과 혈액 내 기생충 바이오마커를 기반으로 한 진단 테스트입니다. 이 프로젝트에서는 단백질체학 접근법을 사용하여 확인된 내장 레슈마니아증의 혈액과 소변에서 발견되는 후보 레슈마니아 항원을 식별할 것입니다. 요크 대학교는 고감도 액체 크로마토그래프 삼중 사중극자 질량 분석기(LCMS/MS)를 사용하여 표본에 대한 단백질체학 분석을 수행하여 치료 전후 VL 환자의 정의된 보관된 임상 샘플(혈액, 소변)에서 항원 다양성을 탐색할 예정입니다. 항원의 수율, 안정성 및 면역원성을 기반으로 단일클론 항체(mAb)는 VL 환자의 혈액 및/또는 소변에서 레슈마니아 항원을 검출할 수 있는 측면 흐름 신속 진단 테스트(RDT) 프로토타입의 후속 개발을 위해 생산될 것입니다.

케냐의 VL 환자로부터 이전에 수집된 샘플을 사용하여 시작된 이러한 활동을 통해, 이 현재 프로토콜은 두 개의 VL 치료 센터, 즉 Baringo 카운티의 Chemolingot Sub-county 병원과 West Pokot의 Kacheliba Sub-county에서 샘플(혈액 및 소변)을 수집하려고 합니다. RDT 프로토타입 평가에 사용됩니다. 우리는 치료 전과 치료 종료 시 수집된 VL 환자의 샘플을 분석하여 검사의 민감도를 결정하고 임상 치료의 결과로 소변과 혈액 내 기생충 항원 존재량이 어떻게 변하는지를 결정할 것입니다. 건강한 풍토병 통제 샘플을 사용하여 테스트의 특이성을 결정합니다.