Fase II-studie av metastatisk melanom med lymfodepletterende kondisjonering og infusjon av anti-MART-1 F5 TCR-gen-konstruerte lymfocytter

Bakgrunn:

• Vi har konstruert humane TIL (tumorinfiltrerende lymfocytter) og perifere blodlymfocytter (PBL) for å uttrykke en anti-MART-1 T-cellereseptor som gjenkjenner en HLA-A*0201-begrenset epitop avledet fra TIL-klonen DMF5.
• Vi konstruerte en enkelt retroviral vektor som inneholder både alfa- og beta-kjeder og kan formidle genetisk overføring av denne TCR med høy effektivitet uten behov for å utføre noen seleksjon.
• I ko-kulturer med HLA-A*0201 positivt melanom, utskilte anti-MART-1 F5 TCR-transduserte T-celler betydelig mengde interferon (IFN)-gamma (men ingen signifikant sekresjon ble observert i kontrollkokulturer med cellelinjer.
• De anti-MART-1 F5 TCR-transduserte T-cellene kunne effektivt drepe HLA-A*0201-positive svulster. Det var liten eller ingen gjenkjennelse av normale fibroblastceller.
• Denne TCR er over 10 ganger mer reaktiv med melanomceller enn MART-1 TCR som medierte tumorregresjon hos to pasienter med metastatisk melanom.

Mål:

Primære mål:

- Bestem om administrering av anti-MART-1 F5 TCR-konstruerte perifere blodlymfocytter (PBL) eller tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) og aldesleukin til pasienter etter et ikke-myeloablativt, men lymfoid-depleterende preparativt regime, vil resultere i klinisk tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.

Sekundære mål:

• Bestem in vivo-overlevelsen av TCR-genkonstruerte celler.
• Bestem toksisitetsprofilen til dette behandlingsregimet.

Kvalifisering:

Pasienter som er HLA-A 0201 positive og 18 år eller eldre må ha:

• metastatisk melanom;
• tidligere mottatt og har vært en ikke-responder på eller gjentatt etter aldesleukin;
• normale verdier for grunnleggende laboratorieverdier.

Pasienter har kanskje ikke:

• samtidige store medisinske sykdommer;
• enhver form for primær eller sekundær immunsvikt;
• alvorlig overfølsomhet overfor noen av midlene brukt i denne studien;
• kontraindikasjoner for høydose aldesleukinadministrasjon.

Design:

• Hvis TIL kan oppnås og dyrkes, men er ikke-reaktive, vil pasienter bli tildelt til å motta TIL transdusert med anti-MART-1 F5 TCR retroviral vektor. Hvis TIL ikke kan oppnås, vil PBMC bli oppnådd ved leukaferese (ca. 5 X 10(9) celler) og dyrket i nærvær av anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin og transdusert med anti-MART-1 F5 TCR retroviral vektor. Hvis TIL-celler er reaktive på autolog tumor eller major histocompatibility complex (MHC)-matchede tumorceller eller PBL ikke kan dyrkes, vil pasienter ikke bli behandlet med denne protokollen.
• Transduksjon initieres ved eksponering av omtrent 10(8) til 5 ganger 10(8) celler for retroviral vektorsupernatant som inneholder anti-MART-1 F5 TCR-genene. Disse transduserte cellene vil bli utvidet og testet for deres antitumoraktivitet.
• Når konstruerte lymfocytter er demonstrert å være biologisk aktive i henhold til de strenge kriteriene som er skissert i analysesertifikatet, vil pasienter motta et ikke-myeloablativt, men lymfocyttablende preparativt regime bestående av cyklofosfamid og fludarabin etterfulgt av intravenøs infusjon av ex vivo tumorreaktive, TCR-gentransduserte celler pluss IV aldesleukin (720 000 IE/kg q8h for maksimalt 15 doser).
• Pasienter vil gjennomgå fullstendig evaluering av svulsten med fysisk undersøkelse, CT av bryst, mage og bekken og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uker etter behandling og deretter månedlig i ca. 3 til 4 måneder eller inntil kriteriene utenfor studien er oppfylt.
• Studien vil bli utført ved å bruke et fase II optimalt design hvor i utgangspunktet 21 evaluerbare pasienter vil bli registrert i hver av to kohorter. Hvis 0 eller 1 av de 21 pasientene per kohort opplever en klinisk respons, vil ingen flere pasienter bli registrert, men hvis 2 eller flere av de første 21 evaluerbare pasientene som er registrert i den kohorten har en klinisk respons, vil opptjening av denne kohorten fortsette til totalt 41 evaluerbare pasienter har blitt registrert i denne kohorten.
• Målet vil være å bestemme i to kohorter om kombinasjonen av høydose aldesleukin, lymfocyttdepleterende kjemoterapi og anti-MART-1 F5 TCR-genkonstruerte lymfocytter (TIL og PBL) er i stand til å assosieres med en klinisk responsrate som kan utelukke 5 % (p0=0,05) til fordel for en beskjeden 20 % PR (delvis respons) + CR (fullstendig respons) rate (p1=0,20).