Studie fáze II metastatického melanomu s kondicionováním lymfodeplecí a infuzí lymfocytů vytvořených genovým inženýrstvím Anti-MART-1 F5 TCR

Pozadí:

• Vytvořili jsme lidský TIL (tumor infiltrující lymfocyty) a lymfocyty periferní krve (PBL), aby exprimovaly anti-MART-1 T-buněčný receptor, který rozpoznává HLA-A*0201 omezený epitop odvozený z TIL klonu DMF5.
• Zkonstruovali jsme jeden retrovirový vektor, který obsahuje alfa i beta řetězce a dokáže zprostředkovat genetický přenos tohoto TCR s vysokou účinností bez nutnosti provádět jakoukoliv selekci.
• Ve společných kulturách s HLA-A*0201 pozitivním melanomem vylučovaly T buňky transdukované anti-MART-1 F5 TCR významné množství interferonu (IFN)-gama (ale žádná významná sekrece nebyla pozorována v kontrolních společných kulturách s buněčnými liniemi).
• Anti-MART-1 F5 TCR transdukované T-buňky by mohly účinně zabíjet HLA-A*0201 pozitivní nádory. Došlo k malému nebo žádnému rozpoznání normálních fibroblastových buněk.
• Tento TCR je více než 10krát reaktivnější s melanomovými buňkami než MART-1 TCR, který zprostředkoval regresi nádoru u dvou pacientů s metastatickým melanomem.

Cíle:

Primární cíle:

-Určit, zda podávání anti-MART-1 F5 TCR upravených lymfocytů periferní krve (PBL) nebo tumor infiltrujících lymfocytů (TIL) a aldesleukinu pacientům po nemyeloablativním, ale lymfoidní depleci preparativním režimu, povede ke klinické regresi tumoru u pacientů s metastázami melanom.

Sekundární cíle:

• Určete in vivo přežití buněk vytvořených genem TCR.
• Určete profil toxicity tohoto léčebného režimu.

Způsobilost:

Pacienti, kteří jsou pozitivní na HLA-A 0201 a jsou starší 18 let, musí mít:

• metastatický melanom;
• dříve dostávaly a nereagovaly na aldesleukin nebo se po něm opakovaly;
• normální hodnoty pro základní laboratorní hodnoty.

Pacienti nemusí mít:

• souběžná hlavní zdravotní onemocnění;
• jakákoli forma primární nebo sekundární imunodeficience;
• těžká přecitlivělost na kteroukoli z látek použitých v této studii;
• kontraindikace pro podávání vysokých dávek aldesleukinu.

Design:

• Pokud lze získat a pěstovat TIL, ale jsou nereaktivní, budou pacienti přiřazeni k podání TIL transdukovaného retrovirovým vektorem anti-MART-1 F5 TCR. Pokud nelze získat TIL, budou PBMC získány leukaferézou (přibližně 5 X 10(9) buněk) a kultivovány v přítomnosti anti-CD3 (OKT3) a aldesleukinu a transdukovány retrovirovým vektorem anti-MART-1 F5 TCR. Pokud buňky TIL reagují na autologní nádor nebo nádorové buňky odpovídající hlavnímu histokompatibilnímu komplexu (MHC) nebo PBL nelze pěstovat, pacienti nebudou podle tohoto protokolu léčeni.
• Transdukce je zahájena expozicí přibližně 10(8) až 5krát 10(8) buněk supernatantu retrovirového vektoru obsahujícímu geny anti-MART-1 F5 TCR. Tyto transdukované buňky budou expandovány a testovány na jejich protinádorovou aktivitu.
• Jakmile se prokáže, že uměle vytvořené lymfocyty jsou biologicky aktivní podle přísných kritérií nastíněných v Certifikátu analýzy, pacienti dostanou nemyeloablativní, ale lymfocyty depleční přípravný režim sestávající z cyklofosfamidu a fludarabinu s následnou intravenózní infuzí ex vivo buněk transdukovaných TCR genem reaktivních na nádor plus IV aldesleukin (720 000 IU/kg každých 8 hodin pro maximálně 15 dávek).
• Pacienti podstoupí kompletní hodnocení nádoru s fyzikálním vyšetřením, CT hrudníku, břicha a pánve a klinickým laboratorním hodnocením čtyři až šest týdnů po léčbě a poté měsíčně po dobu přibližně 3 až 4 měsíců nebo dokud nebudou splněna kritéria mimo studii.
• Studie bude provedena s použitím optimálního designu fáze II, kde bude zpočátku 21 hodnotitelných pacientů zařazeno do každé ze dvou kohort. Pokud 0 nebo 1 z 21 pacientů na kohortu zaznamená klinickou odpověď, pak nebudou zařazeni žádní další pacienti, ale pokud 2 nebo více z prvních 21 hodnotitelných pacientů zařazených do této kohorty bude mít klinickou odpověď, pak bude přírůstek do této kohorty pokračovat, dokud do této kohorty bylo zařazeno celkem 41 hodnotitelných pacientů.
• Cílem bude ve dvou kohortách určit, zda je kombinace vysoké dávky aldesleukinu, chemoterapie depleující lymfocyty a anti-MART-1 F5 TCR geneticky upravených lymfocytů (TIL a PBL) schopna být spojena s mírou klinické odpovědi, která může vyloučit 5 % (p0=0,05) ve prospěch mírné 20% míry PR (částečná odpověď) + CR (kompletní odpověď) (p1=0,20).