Fase II-studie van gemetastaseerd melanoom met lymfodepletieconditionering en infusie van anti-MART-1 F5 TCR-gen-engineered lymfocyten

Achtergrond:

• We hebben menselijke TIL (tumorinfiltrerende lymfocyten) en perifere bloedlymfocyten (PBL's) ontwikkeld om een ​​anti-MART-1 T-celreceptor tot expressie te brengen die een HLA-A*0201-beperkt epitoop herkent dat is afgeleid van de TIL-kloon DMF5.
• We hebben een enkele retrovirale vector geconstrueerd die zowel alfa- als bètaketens bevat en die de genetische overdracht van deze TCR met hoge efficiëntie kan mediëren zonder enige selectie uit te voeren.
• In co-kweken met HLA-A*0201-positief melanoom scheidden anti-MART-1 F5 TCR-getransduceerde T-cellen een significante hoeveelheid interferon (IFN)-gamma af (maar er werd geen significante secretie waargenomen in controle-co-kweken met cellijnen.
• De anti-MART-1 F5 TCR-getransduceerde T-cellen zouden HLA-A*0201-positieve tumoren efficiënt kunnen doden. Er was weinig of geen herkenning van normale fibroblastcellen.
• Deze TCR is meer dan 10 keer reactiever met melanoomcellen dan de MART-1 TCR die tumorregressie medieerde bij twee patiënten met gemetastaseerd melanoom.

Doelstellingen:

Primaire doelen:

-Bepalen of de toediening van anti-MART-1 F5 TCR-gemanipuleerde perifere bloedlymfocyten (PBL) of tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL) en aldesleukine aan patiënten die een niet-myeloablatief maar lymfoïde-depletiepreparatief regime volgen, zal resulteren in klinische tumorregressie bij patiënten met gemetastaseerde melanoma.

Secundaire doelstellingen:

• Bepaal de overleving in vivo van TCR-gen-gemanipuleerde cellen.
• Bepaal het toxiciteitsprofiel van dit behandelingsregime.

Geschiktheid:

Patiënten die HLA-A 0201-positief zijn en 18 jaar of ouder zijn, moeten:

• gemetastaseerd melanoom;
• die eerder zijn ontvangen en niet hebben gereageerd op of zijn teruggekomen na aldesleukin;
• normale waarden voor fundamentele laboratoriumwaarden.

Patiënten hebben mogelijk niet:

• gelijktijdige ernstige medische ziekten;
• elke vorm van primaire of secundaire immunodeficiëntie;
• ernstige overgevoeligheid voor een van de middelen die in dit onderzoek zijn gebruikt;
• contra-indicaties voor toediening van hoge doses aldesleukin.

Ontwerp:

• Als TIL kan worden verkregen en gekweekt, maar niet-reactief is, zullen patiënten worden toegewezen aan TIL getransduceerd met de anti-MART-1 F5 TCR retrovirale vector. Als TIL niet kan worden verkregen, wordt PBMC verkregen door leukaferese (ongeveer 5 x 10(9) cellen) en gekweekt in aanwezigheid van anti-CD3 (OKT3) en aldesleukine en getransduceerd met de anti-MART-1 F5 TCR retrovirale vector. Als TIL-cellen reageren op autologe tumor of major histocompatibility complex (MHC)-gematchte tumorcellen of PBL niet kunnen worden gekweekt, zullen patiënten niet volgens dit protocol worden behandeld.
• Transductie wordt geïnitieerd door blootstelling van ongeveer 10(8) tot 5 maal 10(8) cellen aan retrovirale vectorsupernatant die de anti-MART-1 F5 TCR-genen bevat. Deze getransduceerde cellen zullen worden geëxpandeerd en getest op hun antitumoractiviteit.
• Zodra is aangetoond dat gemanipuleerde lymfocyten biologisch actief zijn volgens de strikte criteria uiteengezet in het analysecertificaat, zullen patiënten een niet-myeloablatief maar lymfocyten-depletiepreparatief regime krijgen bestaande uit cyclofosfamide en fludarabine, gevolgd door intraveneuze infusie van ex vivo tumor-reactieve, TCR-gen-getransduceerde cellen plus IV aldesleukin (720.000 IE/kg q8h voor maximaal 15 doses).
• Patiënten zullen een volledige evaluatie van de tumor ondergaan met lichamelijk onderzoek, CT van de borstkas, buik en bekken en klinische laboratoriumevaluatie vier tot zes weken na de behandeling en vervolgens maandelijks gedurende ongeveer 3 tot 4 maanden of totdat aan de criteria buiten het onderzoek is voldaan.
• De studie zal worden uitgevoerd met behulp van een fase II optimaal ontwerp waarbij in eerste instantie 21 evalueerbare patiënten zullen worden opgenomen in elk van twee cohorten. Als 0 of 1 van de 21 patiënten per cohort een klinische respons ervaart, zullen geen verdere patiënten worden ingeschreven, maar als 2 of meer van de eerste 21 evalueerbare patiënten die in dat cohort zijn ingeschreven een klinische respons hebben, zal de opbouw naar dat cohort doorgaan totdat in dat cohort zijn in totaal 41 evalueerbare patiënten ingeschreven.
• Het doel zal zijn om in twee cohorten te bepalen of de combinatie van een hoge dosis aldesleukine, chemotherapie die de lymfocyten afbreekt, en anti-MART-1 F5 TCR-gemanipuleerde lymfocyten (TIL en PBL) kan worden geassocieerd met een klinisch responspercentage dat kan 5% (p0=0,05) uitsluiten ten gunste van een bescheiden percentage PR (gedeeltelijke respons) + CR (volledige respons) van 20% (p1=0,20).