Endogenne białka szoku cieplnego wywołane terapią o częstotliwości radiowej z ablacją lub krioterapią o częstotliwości radiowej lub bez w leczeniu pacjentów z czerniakiem w stadium IV

CELE:

• Określenie bezpieczeństwa i wykonalności syntezy endogennego białka szoku cieplnego (hsp)70 w miejscu guza za pomocą terapii częstotliwościami radiowymi (RFT) u pacjentów z czerniakiem złośliwym w IV stadium zaawansowania.
• Określić bezpieczeństwo i wykonalność uwolnienia hsp70 do krążenia za pomocą samej RFT w porównaniu z RFT, po której następuje ablacja prądem o częstotliwości radiowej (RFA) lub krioterapia u tych pacjentów.
• Określenie wykonalności wywołania pierwotnej przeciwnowotworowej odpowiedzi immunologicznej za pomocą RFT z dodatkową terapią miejscową (tj. RFA lub krioterapią) lub bez niej u tych pacjentów.
• Uzyskaj wstępny wgląd w skuteczność przeciwnowotworową szczepionki in vivo do szoku cieplnego u tych pacjentów.

ZARYS: Pacjenci są losowo przydzielani do 1 z 3 ramion.

• Ramię I (rejestracja zamknięta od 12.07.06): Pacjenci przechodzą przezskórną biopsję docelowej zmiany i umieszczają znacznik lokalizacji. Następnie pacjenci przechodzą terapię częstotliwością radiową (RFT) do docelowej zmiany chorobowej w celu wywołania produkcji endogennych białek szoku cieplnego. Po zakończeniu zabiegu pacjenci poddawani są drugiej biopsji docelowej zmiany. Pacjenci otrzymują również donowotworowe wstrzyknięcie sargramostimu (GM-CSF) w celu promowania dalszej ablacji w miejscu guza.
• Ramię II: Pacjenci poddawani są biopsji przezskórnej i RFT jak w ramieniu I, a następnie ablacji docelowej zmiany przy użyciu częstotliwości radiowej. Pacjenci otrzymują również GM-CSF do guza, jak w ramieniu I.
• Ramię III: Pacjenci poddawani są biopsji przezskórnej i RFT jak w ramieniu I, a następnie krioablacji docelowej zmiany. Pacjenci otrzymują również GM-CSF do guza, jak w ramieniu I.

Próbki tkanki nowotworowej uzyskuje się za pomocą biopsji gruboigłowej bezpośrednio przed i bezpośrednio po RFT w celu analizy RNA i białek. Próbki tkanek ocenia się metodą immunohistochemiczną pod kątem fenotypu nowotworu (tj. MART-1, tyrozynazy lub gp100) oraz ilościowego oznaczenia naciekających limfocytów. Próbki krwi obwodowej pobiera się również przed i po leczeniu oraz okresowo w trakcie badań do analiz immunologicznych. Limfocyty pochodzące z krwi obwodowej są badane za pomocą panelu przeciwciał monoklonalnych w celu oszacowania odsetka cytotoksycznych limfocytów T (CTL), w tym limfocytów T CD4+ i CD8+, a także limfocytów B, monocytów i komórek dendrytycznych. Ponadto przeprowadza się testy w celu oszacowania odpowiedzi komórek T na bodziec poliklonalny (tj. PHA), antygeny przypominające (tj. anatoksynę tężcową) i alloantygeny HLA. Oszacowania CTL swoistych dla peptydów uzyskuje się również za pomocą enzymatycznych testów immunosorpcyjnych po stymulacji in vitro komórkami stymulatorowymi uczulonymi na peptydy. Ocenione zostaną również przeciwciała przeciwko ekstrahowalnym antygenom jądrowym (ENA) i przeciwciałom przeciwjądrowym (ANA). Poziomy GM-CSF i Hsp70 ocenia się w komórkach nowotworowych i krwi obwodowej za pomocą cytometrii przepływowej lub testów immunoenzymatycznych.

Po zakończeniu badanej terapii pacjenci są poddawani okresowej obserwacji przez okres do 3 lat.