Profile cytokin i suPAR w zapaleniu kręgosłupa

Zapalenie krążków międzykręgowych jest pierwotnym zakażeniem krążków międzykręgowych z wtórnym zakażeniem sąsiednich płytek końcowych i trzonów kręgów. Występuje stosunkowo rzadko, z częstością 2,4:100 000 i trzykrotnie częściej wśród mężczyzn. Proces infekcji, który zwykle ma charakter pełzający, prowadzi do destrukcji trzonów kręgów i powstawania ropni, które mogą powodować deficyty neurologiczne.

Objawy kliniczne, zwłaszcza we wczesnych stadiach, są rzadkie. Pacjenci cierpią na niespecyficzne bóle pleców, a gorączka występuje tylko w 50% przypadków. Obecnie stosowane markery, takie jak liczba leukocytów, szybkość opadania krwinek czerwonych (OB) oraz białko C-reaktywne (CRP) są również niespecyficzne. Z tego powodu od pojawienia się pierwszych objawów do ostatecznego rozpoznania zapalenia krążka międzykręgowego może upłynąć kilka tygodni. Dlatego identyfikacja patogenu jest niezbędna do skutecznej antybiotykoterapii.

Infekcje kręgosłupa są na ogół monobakteryjne, często mają źródło krwiopochodne. Dlatego posiewy krwi mogą być wykorzystywane do identyfikacji patogenów. W przypadku ujemnych posiewów krwi patogeny można zidentyfikować metodami inwazyjnymi, takimi jak przezskórna biopsja punktowa lub aspiracja cienkoigłowa pod kontrolą tomografii komputerowej. Pomimo biopsji patogen można zidentyfikować tylko u dwóch na trzech pacjentów. Niepowodzenia w identyfikacji patogenu wynikają głównie z wcześniejszego ogólnoustrojowego leczenia antybiotykami. W konsekwencji diagnostyka często opiera się na medycznych metodach obrazowania (TK, MRT, PET, radiogram, scyntygrafia szkieletu). Wadą tych metod jest to, że zmiany strukturalne kręgosłupa muszą nastąpić, aby stały się widoczne.

Leczenie zaawansowanego zapalenia kręgosłupa i krążka międzykręgowego polega na usunięciu tkanki martwiczej, stabilizacji zajętych trzonów kręgów i jednoczesnej antybiotykoterapii. Jak dotąd nie opublikowano badań z randomizacją dotyczących czasu trwania antybiotykoterapii. Aktualne zalecenia to od 6 do 12 tygodni. Do oceny odpowiedzi na leczenie stosuje się jedynie poprawę kliniczną i wartość CRP. Średni czas pobytu w szpitalu wynosi około 49 dni.

Celem jest opracowanie nieinwazyjnej metody, która pozwoli na rozróżnienie chorób zakaźnych i niezakaźnych w celu poprawy diagnostyki zapalenia kręgosłupa. W tym celu zostaną pobrane próbki krwi i tkanek od pacjentów z zapaleniem kręgosłupa i osteochondrozą erozyjną, które zostaną poddane analizie pod kątem stężenia cytokin i suPAR. Osteochondroza erozyjna jest niezakaźną, zwyrodnieniową chorobą kręgosłupa wymagającą podobnego leczenia chirurgicznego. Jest to zatem optymalna grupa odniesienia. Niemniej jednak erozyjna osteochondroza obejmuje specjalne typy, zwane modicznym typem I-III. Ponieważ typ modalny I jest związany z odpowiedzią immunologiczną spowodowaną powtarzającymi się urazami kręgosłupa, ten typ modalny zostanie wykluczony z badania.

Cytokiny to przekaźniki obecne we krwi i we wszystkich tkankach, regulujące odpowiedź immunologiczną. W tym badaniu celem jest ocena, czy profile cytokin i suPAR przyczyniają się do rozróżnienia zakaźnego i niezakaźnego zapalenia kręgosłupa i krążka międzykręgowego oraz czy można to zweryfikować przez charakterystykę komórek wytwarzających cytokiny. Ponadto badacze chcą przeanalizować odpowiedź na terapię, mierząc profile cytokin i suPAR.

Rutynowe pobieranie krwi odbywać się będzie bezpośrednio przed operacją, a także w trakcie hospitalizacji stacjonarnej w 4. i 10. dobie. Dodatkowe pobranie krwi zostanie wykonane po 6 tygodniach i 3 miesiącach w okresie obserwacji. W każdym punkcie czasowym do badania zostaną użyte surowica i osocze w celu określenia stężenia i ekspresji cytokin i suPAR w komórkach wytwarzających cytokiny. Tkanka martwicza, która zostanie usunięta podczas zabiegu, zostanie poddana analizie mikrobiologicznej oraz patologicznej. Fragmenty tej tkanki zostaną również wykorzystane do oznaczania cytokin. Kolejne próbki krwi będą pobierane, gdy pacjent ponownie pojawi się w Klinice Chirurgii Ortopedycznej i Traumatologii w związku z leczeniem i terapią nawrotu zakażenia. Do tego badania zostanie włączonych co najmniej 15 pacjentów na grupę – grupę kontrolną (zerostowa osteochondroza typu II-III) i zapalenie kręgosłupa i krążka międzykręgowego. Obie grupy powinny być jednorodne pod względem płci i wieku.

Pacjenci biorący udział w tym badaniu nie będą odczuwać dodatkowego bólu ani powikłań. Wszystkie próbki będą pobierane przez okres około jednego roku i przechowywane w temperaturze -80°C. Następnie próbki krwi i tkanek zostaną przeanalizowane pod kątem potencjalnego markera suPAR za pomocą testu ELISA i cytokin za pomocą testu Multiplex. Ponadto wyniki zostaną połączone z wywiadem w celu wykrycia potencjalnych korelacji. Specyficzne korelacje mogą wskazywać na diagnostyczną i być może prognostyczną wartość mierzonych cytokin i suPAR.