Poziomy parametrów związanych z mannozą w osoczu w niecukrzycowej chorobie wieńcowej

Choroba niedokrwienna serca (CAD), znana również jako choroba niedokrwienna serca (CHD) lub choroba niedokrwienna serca (ChNS), pociąga za sobą zmniejszenie przepływu krwi do mięśnia sercowego w wyniku gromadzenia się płytek miażdżycowych w tętnicach serca. Choroby układu krążenia są jedną z głównych przyczyn śmiertelności i chorobowości na świecie, w następstwie szybkich zmian i postępu w diagnostyce i metodach leczenia chorób sercowo-naczyniowych.

Szeroka gama cząsteczek lipidów w ludzkim osoczu i ich możliwa rola w zdrowiu i chorobie człowieka to tematy o dużym zainteresowaniu. Lipidom osocza jest obecnie stopniowo uznawany za potencjalnie ważny marker chorób przewlekłych, ale dokładny stopień jego udziału w międzyosobniczej zmienności fenotypowej w badaniach rodzinnych jest niepewny.

Dowody asocjacyjne zebrane z badań lipidomicznych osocza obiecują istotny wkład w badania biomarkerów - ważny kamień węgielny ciągłych wysiłków na rzecz zapobiegania chorobom przewlekłym. Profil lipidomiczny osocza człowieka jest związany z różnymi stanami, w tym otyłością i zaburzeniami metabolizmu glukozy, nadciśnieniem tętniczym, chorobami układu krążenia.

Lipidy osocza są solubilizowane i rozprowadzane poprzez łączenie ich z różnymi grupami białek. Większość wolnych kwasów tłuszczowych i powiązanych struktur z karboksylowymi grupami funkcyjnymi oddziałuje z albuminą, podczas gdy bardziej złożone lipidy są transportowane i rozprowadzane za pomocą lipoprotein osocza.

Glicerolipidy stanowią wysoki odsetek wszystkich lipidów w osoczu i obejmują triacyloglicerole (TAG), diacyloglicerole (DAG) i glicerolipidy połączone eterem. Całkowite stężenie TAG w osoczu, podzielone między chylomikrony i lipoproteiny o bardzo małej gęstości (VLDL), zależy od spożycia pokarmu. Powszechnie wiadomo, że różne nabyte lub wtórne czynniki ryzyka (w tym uwarunkowania genetyczne, niekontrolowana cukrzyca, otyłość i siedzący tryb życia) mogą powodować hipertriglicerydemię, dominujący typ dyslipidemii, który często wiąże się z przedwczesną chorobą wieńcową.

D-mannoza, jedna z form stereoizomerów, jest strukturalnym izomerem D-glukozy i powszechnie występuje w układach biologicznych, ale L-mannoza na ogół nie występuje w układach biologicznych. Mannoza jest transportowana do komórek ssaków przez transportery heksozy, głównie przez transportery glukozy (GLUT) obecne w błonie komórkowej. Badania wykazały, że poziomy mannozy w osoczu u ludzi są związane z cukrzycą typu 2 i chorobami sercowo-naczyniowymi. Z drugiej strony mechanizm molekularny indukowania szlaku jest nadal niejasny. Niedawne badanie wykazało, że lipidom ludzkiego osocza jest plejotropowo powiązany z czynnikami ryzyka sercowo-naczyniowego i zgonem.

W komórkach ssaków mannoza uczestniczy w szlakach glikolizy i glukoneogenezy katalizowanych przez izomerazę fosforanu mannozy. Mannoza jest składnikiem normalnego osocza krwi, a jej stężenie jest na ogół podwyższone w cukrzycy i przewlekłym kłębuszkowym zapaleniu nerek. Jednak badania wykazały, że poziomy fruktozy i mannozy są znacznie obniżone u osób otyłych. Obecnie donieśliśmy, że podwyższona początkowa mannoza w osoczu wyzwalana przez GLUT4 i heksokinazę-1 (HK1) wiązała się z postępującym ryzykiem CAD w czasie.

Enzym cytoplazmatyczny dehydrogenazy mleczanowej (LDH) występujący we wszystkich komórkach organizmu, który przenosi wodorki z jednej cząsteczki do drugiej. LDH katalizuje odwracalną konwersję pirogronianu do mleczanu jako jednostki cyklu Cori. Sercowy marker LDH ulega znacznej ekspresji w komórkach ciała i jest markerem niewydolności serca.

Celem badania było ustalenie, czy niewielkie zwiększenie stężenia mannozy w osoczu i lipidów w surowicy [trójglicerydów, lipoprotein o małej gęstości (LDL), lipoprotein o dużej gęstości (HDL) i lipoprotein o bardzo małej gęstości (VLDL)] może być związane z większą częstość występowania CAD wśród pacjentów bez cukrzycy. Ponieważ hiperglikemia i/lub wodochłonność są związane z dodatkowymi czynnikami ryzyka CAD, takimi jak nadciśnienie, otyłość, starzenie się. Ponadto określenie parametrów molekularnych i biochemicznych w osoczu związanych z czynnikami ryzyka CAD może mieć strategiczne znaczenie w leczeniu tych chorób.

Pacjenci i grupa kontrolna zostaną wstępnie poinformowani o badaniu i uzyskają pisemną zgodę. Pacjenci, którzy byli poddani angiografii w Klinice Kardiologii i nowo zdiagnozowani jako choroba niedokrwienna serca i którzy nie byli leczeni statynami, zostaną włączeni do grupy pacjentów. Grupę kontrolną stanowić będą osoby zdrowe z prawidłowymi angiograficznie tętnicami wieńcowymi. Pacjenci z przewlekłą niewydolnością nerek, przewlekłą chorobą wątroby, chorobą zapalną, cukrzycą, insulinoopornością, poważnymi chorobami metabolicznymi lub endokrynologicznymi również zostaną wykluczeni. W tym celu do badań zostanie dobranych wiekowo i płciowo 120 pacjentów oraz 120 zdrowych ochotników.

Próbki krwi zostaną pobrane, jak opisano wcześniej, do pojemników z EDTA i cytrynianem. Całkowity cholesterol, lipoproteiny o dużej gęstości i triglicerydy będą mierzone za pomocą dostępnego w handlu enzymatycznego testu kolorymetrycznego (Roche, Bazylea, Szwajcaria). Poziom glukozy, kreatyniny i inne profile krwi będą oznaczane standardowymi metodami. Próbki będą wirowane przy 400xg przez 10 min w celu oddzielenia surowicy. Parametry biochemiczne będą mierzone przy użyciu automatycznego analizatora Abbott ARCHITECH c800 (Abbott Laboratories, USA) i zestawy handlowe. Stężenia mannozy w surowicy będą oznaczane metodami enzymatycznymi z wykorzystaniem testu ELISA.

Test Kołmogrowa-Smirnowa zostanie wykorzystany do określenia, czy grupa ma rozkład parametryczny. Zmienne kategoryczne podano w postaci liczbowej i procentowej. Jeśli parametry są rozłożone parametrycznie, zmienne ciągłe będą wyrażone jako średnia ± odchylenie standardowe; jeśli parametry mają rozkład nieparametryczny, zmienne ciągłe zostaną wyrażone jako mediana (IQR). Gdy podane zostaną założenia testów parametrycznych, do porównania różnic między grupami niezależnymi zostanie wykorzystany test istotności różnicy między dwoma średnimi oraz jednokierunkowa analiza wariancji. Gdy nie podano założeń testu parametrycznego, do porównania różnic między grupami niezależnymi zostanie wykorzystany test U Manna-Whitneya. Zależności między zmiennymi ciągłymi zostaną przeanalizowane za pomocą analizy korelacji Spearmana, do analizy zmiennych kategorycznych zastosowany zostanie test chi-kwadrat. Ponadto zastosowano analizę krzywej Charakterystyki Operacyjnej Odbiornika (ROC) w celu określenia poziomów mannozy w surowicy w ramach badania różnicowego. Ponadto relacje między zmiennymi ciągłymi zostaną zbadane za pomocą analizy korelacji Spearmana. P <0,05 zostanie uznane za statystycznie istotne we wszystkich badaniach.