Microbiota intestinal e modulação do dano hepático na DHGNA

A doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) inclui a esteatose hepática simples (SS) benigna e a esteato-hepatite mais grave (NASH), que é caracterizada por inflamação e fibrose, podendo levar à cirrose e ao carcinoma hepatocelular. A pesquisa atual está focada em quais são os fatores de risco e determinantes da NASH. A DHGNA está associada à síndrome metabólica, e a prevalência descrita é de até 98% em obesos mórbidos submetidos à cirurgia bariátrica. A DHGNA em indivíduos não obesos apresenta perfil clínico diferente dos indivíduos obesos, estando associada à resistência à insulina (RI), distribuição diferencial do tecido adiposo visceral, aumento recente do peso corporal e/ou presença de sobrepeso, ingestão de dieta rica em colesterol e fundo genético.

A microbiota intestinal (GM) regula o metabolismo da gordura em camundongos. Em humanos, suas alterações têm sido associadas a diabetes, obesidade, RI, aterosclerose e inflamação, SS e DHGNA.

Vários dados experimentais sugerem que a endotoxina derivada do intestino e a composição GM podem atuar como um "segundo golpe" ou insulto para converter a SS hepática em NASH e causar inflamação hepática local e sistêmica. Com relação aos estudos em humanos, Muozaki et al. mostraram recentemente, usando uma abordagem do sistema TaqMan de reação em cadeia da polimerase (PCR), que pacientes obesos com NASH têm uma porcentagem menor de Bacteroidetes fecais (Bacteroidetes para contagens totais de bactérias) em comparação com SS e controles saudáveis ​​e uma porcentagem maior de C .coccoides em comparação com aqueles com SS. Além disso, Zhu et al. mostraram em indivíduos pediátricos, usando um método de detecção de RNA ribossômico 16S, um padrão único de enterótipos em pacientes com NASH, em indivíduos obesos sem sinais de dano hepático e em controles saudáveis ​​magros. Finalmente, Wai-Sun Wong et al. mostraram, também usando um método de detecção de RNA ribossômico 16S, que um pequeno grupo de pacientes chineses com NASH demonstrou disbiose fecal, mas sem alterações significativas na biodiversidade em comparação com indivíduos saudáveis. Finalmente, a inflamação em pacientes com aterosclerose sintomática demonstrou estar associada a níveis mais baixos de bactérias intestinais produtoras de butirato, como Roseburia.

Entre os possíveis fatores envolvidos na determinação da gravidade da DHGNA, a concentração sérica de ácidos biliares (AB) e suas variações pós-prandiais foram recentemente associadas à regulação do peso corporal, gordura e inflamação hepáticas e metabolismo da glicose e lipídeos. Essas funções reguladoras da BA são mediadas por sua interação com o receptor farnesóide X (FXR) e o receptor BA acoplado à proteína G 1 (GPBAR1 ou TGR5) nos níveis de tecido adiposo hepático e subcutâneo. Nenhum estudo humano foi direcionado para investigar os mecanismos pelos quais a composição GM influencia a inflamação e a fibrose em pacientes obesos e não obesos com DHGNA.

A biópsia hepática é clinicamente aconselhável durante a cirurgia bariátrica, devido à alta prevalência de NAFLD e NASH em pacientes com obesidade mórbida. Sugeriu-se anteriormente que a alta prevalência de NAFLD comprovada histologicamente em pacientes com cálculos biliares também pode justificar a biópsia hepática de rotina durante a colecistectomia, mesmo em indivíduos não obesos, para estabelecer o diagnóstico, o estágio e a possível terapia. Esta última sugestão foi reforçada muito recentemente pela evidência de que, em humanos, a colecistectomia pode representar um fator de risco independente para DHGNA detectada à ultrassonografia e pela demonstração experimental de que a colecistectomia aumenta o teor de triglicerídeos hepáticos.

No presente projeto de pesquisa estudaremos pacientes com SS comprovada histologicamente ou com NASH. A biópsia hepática será realizada durante a cirurgia bariátrica (gastrectomia vertical) ou colecistectomia em pacientes com evidência pré-operatória de DHGNA na ultrassonografia. Iremos comparar a composição de GM usando, pela primeira vez, o método mais preciso disponível, que é a espingarda metagenômica. Este método permite analisar a diversidade da microbiota, fornecendo informação tanto sobre a composição microbiana intestinal como sobre os processos metabólicos a ela ligados. Além disso, correlacionaremos, pela primeira vez, a composição de GM com padrões hepáticos e, apenas em pacientes obesos, também com padrões de expressão gênica do tecido adiposo branco de interesse e marcadores séricos e fecais possivelmente relacionados ao armazenamento deficiente de gordura e inflamação. Nosso objetivo é fornecer dados preliminares para projetar futuros estudos de intervenção com pré ou probióticos ou derivados de ácidos biliares para prevenir/tratar inflamação e fibrose em pacientes com DHGNA.