Polimorfismos de nucleotídeo único de DNA como preditores de toxicidade

A maioria das pacientes com câncer de ovário é tratada com uma combinação de quimioterapia à base de platina e taxano. Embora as taxas de resposta inicial sejam altas (>90%), alguns pacientes apresentam EAs graves que podem levar à descontinuação da terapia. No entanto, tanto o GOG quanto a bula do paclitaxel incluem diretrizes de tratamento que envolvem um regime de dose reduzido se forem encontrados EAs [1, 2]. A validação clínica das diferenças genéticas nesses genes como biomarcadores para EAs graves permitiria ao médico assistente alterar a dosagem, aumentando assim o tempo que um paciente poderia permanecer com o medicamento, diminuindo os efeitos colaterais e a morbidade desnecessária.

Outra utilidade clínica dessas diferenças genéticas no tratamento de pacientes com câncer de ovário é a identificação de quais pacientes podem não se beneficiar da quimioterapia intraperitoneal (IP) ou quimioterapia de dose densa. Embora a quimioterapia IP tenha demonstrado melhorar o resultado do paciente, os efeitos colaterais são muito mais frequentes e graves devido à alta dose [3]. Testar os pacientes antes do tratamento para genótipos preditivos pode influenciar a decisão do médico de renunciar à quimioterapia IP em favor da administração intravenosa padrão. A quimioterapia de dose densa demonstrou melhorias no resultado, mas também alguns aumentos nos efeitos colaterais [4, 5]. Em ambos os regimes de terapia, a capacidade de estratificar os pacientes com base nos riscos de toxicidade associados ao tratamento pode levar a um maior benefício do IP ou da terapia de dose densa, minimizando os efeitos colaterais e os custos associados aos cuidados de saúde.

Estudos anteriores em câncer de ovário demonstraram que a expressão das proteínas ERCC1, GST e p53 pode afetar a resposta a terapias baseadas em platina em pacientes com câncer de ovário [6-13]. Quando os SNPs nos genes que codificam essas proteínas foram avaliados, foi feita uma correlação com EAs em resposta a terapias à base de platina [14, 15]. As mutações que afetaram a atividade do ERCC1 foram associadas à nefrotoxicidade. Mutações em membros da família GST foram associadas com neutropenia (GSTA1), neuropatia (GSTM3 e GSTP1) ou anemia e trombocitopenia (GSTM3). Mutações no p53 foram associadas à neutropenia. Nesses estudos, as mutações em XPD e XRCC1 também foram consideradas preditivas de neutropenia (tanto XPD quanto XRCC1) e anemia (somente XPD). Mais recentemente, um estudo feito pelo Scottish Gynecological Clinical Trials Group identificou SNPs em BCL2, Data da versão atual: 04/01/15 Data da versão anterior: N/A, Versão inicial Página 6 de 23 OPRM1 SOX10 e TRPV1 que foram associados à neurotoxicidade [16]. O valor individual e combinado desses biomarcadores precisa ser avaliado.

A revisão de estudos feitos em outros tipos de tumor identificou SNPs associados a toxicidades que também podem ser aplicáveis ​​ao câncer de ovário. No câncer de mama, os SNPs nos genes CYP2C8, CYP17A1 e ABCG1 foram associados a um risco aumentado de neuropatia periférica de grau 2+ em pacientes tratados com terapias à base de taxanos. [17, 18]. Um SNP diferente no CYP17A1 (rs619824) também foi previamente relatado como associado à neuropatia induzida por bortezomibe em pacientes com mieloma múltiplo, potencialmente apoiando o papel dessa proteína no início da neuropatia [19]. Como esses SNPs são diferenças na linhagem germinativa, há motivos para acreditar que também podem ser biomarcadores valiosos no câncer de ovário. No mieloma múltiplo, foi sugerido que a identificação e o monitoramento mais próximo de pacientes com risco de neuropatia podem ser benéficos [20]. Uma estratégia semelhante poderia ser usada com pacientes com câncer de ovário para reduzir toxicidades graves que resultam na descontinuação de um medicamento eficaz.

A detecção desses polimorfismos por QPCR foi confirmada por sequenciamento direto de linhas celulares e tecido tumoral. O protocolo foi testado em nosso laboratório de pesquisa e foi validado em nosso laboratório regulado pela CLIA para amostras de sangue e amostras fixadas em parafina fixadas em formol. Em resumo, o DNA é purificado em uma coluna giratória, quantificado e misturado com um ensaio SNP específico e Master Mix (Life Technologies). Os resultados foram analisados ​​no software Life Technologies TaqMan Genotyper versão 1.3 para determinar o genótipo. Os SNPs foram detectados em amostras de sangue coletadas de pacientes com câncer de ovário e espécimes de câncer de ovário FFPE com frequências semelhantes às relatadas nos artigos mencionados acima. SNPs de outros tipos de tumor foram detectados nas mesmas amostras de sangue de pacientes com câncer de ovário ou amostras de câncer de ovário FFPE, bem como em amostras de sangue e FFPE de pacientes com câncer de endométrio.