Diabetes tipo 1, imunologia, genética e produção endógena de insulina (TIGI)

Antecedentes e Introdução:

O diabetes tipo 1 (T1D) é uma doença causada pela destruição autoimune das células beta pancreáticas. Geralmente se apresenta na infância com níveis elevados de açúcar no sangue e é necessário tratamento prolongado com insulina. As pessoas diagnosticadas com DM1 têm algumas células beta pancreáticas remanescentes no momento do diagnóstico e acredita-se que essas células produtoras de insulina remanescentes tenham sido perdidas nos primeiros meses ou anos após o diagnóstico. O mecanismo subjacente para a destruição de células beta é a autoimunidade dirigida por células T com associações genéticas, ambientais e imunológicas que apontam para o sistema imunológico como sendo a chave para a perda de células beta pancreáticas. Pesquisas extensas se concentraram na tentativa de prevenir, interromper ou reverter o ataque imunológico no DM1 usando imunossupressão ou imunomodulação com uma variedade de medicamentos e vacinas. Esses esforços foram amplamente infrutíferos e demonstram que, embora saibamos que a autoimunidade é crítica para o desenvolvimento do DM1, ainda não sabemos o suficiente sobre os mecanismos específicos para interromper esse processo com sucesso. Ao entender melhor o papel do sistema imunológico no DM1, isso pode levar a melhores tratamentos ou reversão do DM1.

Ao contrário do entendimento convencional, nem todas as pessoas com DM1 perdem a produção de insulina logo após o diagnóstico. Ensaios modernos que podem detectar baixos níveis de insulina endógena mostraram que muitas pessoas com DM1 produzem baixos níveis de insulina por muitos anos após o diagnóstico. Há também um grupo menor de pacientes que produzem quantidades significativas de insulina, apesar de terem DM1 por muitos anos. Por outro lado, existem alguns pacientes que parecem perder toda a insulina endógena muito rapidamente após o diagnóstico.

A proporção de creatinina de peptídeo C na urina é uma nova técnica que permite a avaliação da produção endógena de insulina em uma amostra de urina enviada de casa. Isso permitiu a avaliação da produção de insulina em mais de 1.000 pacientes com DM1 no sudoeste da Inglaterra, com a identificação de pacientes que ainda produzem quantidades significativas de insulina após anos de DM1 e outros pacientes que perderam a produção de insulina muito rapidamente.

A produção endógena de insulina retida pode representar um processo autoimune mais lento, com um amortecimento da resposta imune por regulação dentro do sistema autoimune (tolerância), ou uma "queima" do processo de autoimunidade, como pode acontecer em algumas outras doenças autoimunes. Da mesma forma, a perda muito rápida da produção de insulina pode representar o extremo oposto, mais agressivo do espectro.

Nosso objetivo é estudar isso comparando as características imunológicas de pacientes com DM1, com uma faixa de duração do diabetes, e ainda fazendo insulina significativa com grupos semelhantes que não estão fazendo nenhuma.

Hipóteses:

Pessoas com DM1 de longa duração e produção endógena de insulina mantida têm um equilíbrio alterado de células T destrutivas de ilhotas (células CD4 auxiliares auto reativas específicas de ilhotas e células T assassinas de CD8) e células T protetoras de ilhotas (células T reguladoras) e podem ter risco genético diferente fatores para doenças autoimunes.

Objetivo do estudo:

Para melhorar nossa compreensão da produção de insulina em indivíduos diagnosticados com diabetes tipo 1.

O TIGI é um estudo observacional de caso-controle. Todos os participantes em potencial serão identificados a partir de cuidados clínicos de rotina ou de coortes de pesquisa existentes gerenciadas pelo Peninsula Research Bank como parte do NIHR Exeter Clinical Research Facility (ECRF). Os participantes em potencial que parecem atender aos critérios de inscrição receberão informações por escrito sobre o projeto, seguidas da oportunidade de discutir o projeto mais detalhadamente com um membro da equipe de pesquisa. A equipe de pesquisa será responsável pelo processo de recrutamento.

Os participantes serão recrutados de acordo com a ética do Reino Unido.

Todos os participantes (ou seus responsáveis ​​legais) serão obrigados a fornecer consentimento informado por escrito e serão informados de seu direito de retirar-se do estudo a qualquer momento com prejuízo ou prejuízo para qualquer atendimento clínico futuro.

Os participantes serão convidados a comparecer ao NIHR Exeter Clinical Research Facility para uma única consulta, tendo jejuado durante a noite. Para reduzir a sobrecarga do paciente, será oferecida aos participantes que não puderem visitar o centro de pesquisa uma consulta local (por exemplo, cirurgia em casa ou GP). Eles serão solicitados a fornecer uma amostra de urina a ser coletada 2 horas após a refeição principal no dia anterior à visita do estudo (para análise de UCPCR).

Amostras de sangue serão coletadas na linha de base (jejum) e em 0, 30,60, 90 e 120 minutos após a refeição para participantes adultos que frequentam o centro de pesquisa. Para crianças menores de 16 anos e todos os participantes recrutados em casa, as amostras serão coletadas apenas 90 minutos após a refeição.

Os dados da linha de base incluirão: Altura (m), peso (kg), idade do diagnóstico, tratamento atual e anterior com insulina e histórico familiar de diabetes.

Amostras de sangue serão coletadas para peptídeo C sérico e outras bioquímicas de rotina, extração de DNA (para tipagem HLA e tipagem SNP de risco T1D), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) para análise de células T autorreativas e reguladoras, e plasma e soro amostras para armazenamento para análises futuras.

Todas as amostras serão devidamente rotuladas de acordo com a Lei de Proteção de Dados de 1998. As amostras biológicas coletadas dos participantes serão transportadas, armazenadas, acessadas e processadas de acordo com a legislação nacional relativa ao uso e armazenamento de tecido humano para fins de pesquisa. Os participantes terão a oportunidade de consentir em doar amostras no final do estudo para pesquisas futuras.

Segurança: As amostras de sangue serão coletadas por pessoal treinado em punção venosa. Qualquer desconforto potencial ou efeitos colaterais serão equivalentes aos experimentados nos cuidados clínicos de rotina. Risco de hiperglicemia (por fazer uma refeição sem a insulina habitual das refeições): Os participantes serão monitorados de perto durante e após a visita pela equipe de pesquisa especializada em diabetes. Aconselhamento/apoio apropriado será dado, se necessário.

Benefício potencial: A curto prazo, esperamos obter uma melhor compreensão das causas do DM1. A longo prazo, este trabalho pode levar a melhores tratamentos terapêuticos, vacinais e de transplante para DM1.

Efeitos adversos: Caso surjam eventos adversos imprevistos que possivelmente, provavelmente ou definitivamente estejam relacionados a um procedimento do estudo, eles serão relatados ao Patrocinador e ao CI dentro de 24 horas após a equipe de pesquisa tomar conhecimento do evento.

Confidencialidade: Todas as informações relacionadas aos participantes do estudo serão mantidas em sigilo e gerenciadas de acordo com a Lei de Proteção de Dados, NHS Caldicott Guardian, Estrutura de Governança de Pesquisa para Saúde e Assistência Social e Aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa.

A data do participante será mantida em formato anonimizado de link, com dados de identificação pessoal acessíveis apenas a funcionários com treinamento em proteção de dados que precisam dessas informações para desempenhar sua função de estudo.

Retenção e arquivamento de registros: Quando o estudo de pesquisa estiver concluído, é um requisito da Estrutura de Governança de Pesquisa e da Política de Confiança do Patrocinador que os registros sejam mantidos por mais 15 anos.

Estatísticas e tamanho da amostra:

A análise principal será avaliar se há uma diferença no fenótipo imunológico dos pacientes com mais (alto peptídeo C) e menos (baixo peptídeo C) insulina endógena persistente em relação à duração.

Recrutaremos pelo menos 110 pacientes em cada grupo de acordo com o recrutamento anterior em Exeter. Prevemos que um mínimo de 100 terá peptídeo C extremo confirmado em cada grupo. Isso dará 90% de poder de detecção em p1 SD na função supressora média de células T autorreativas e uma diferença na proporção de 39%.

O tamanho total da amostra para este projeto será de pelo menos 250, para atingir o número necessário de pacientes com peptídeo C extremo, conforme detalhado acima.

Ambos os grupos terão um intervalo de duração do diabetes.

O monitoramento deste estudo garantirá a conformidade com as Boas Práticas Clínicas. Os Investigadores permitirão monitoramento, auditorias, revisão do REC e inspeções regulatórias, fornecendo ao(s) Patrocinador(es), Reguladores e REC acesso direto aos dados de origem e outros documentos.

A indenização do NHS será aplicada aos participantes e o seguro de responsabilidade civil do Reino Unido é fornecido pela Universidade de Exeter.

Desenvolvimento do projeto e envolvimento do usuário:

A equipe do estudo terá acesso ao grupo representativo do usuário do NIHR Exeter Clinical Research Facility (ECRF). No seguimento da estratégia NHS Patient Carer and Public Involvement (PCPI), o ECRF convida representantes dos utentes a contribuírem para o desenvolvimento de vários projetos do seu portefólio. Esses indivíduos concordaram em manter contato e foram estabelecidas reuniões regulares nas quais os pesquisadores discutem o desenvolvimento dos projetos em andamento no ECRF.

Este trabalho é financiado por uma instituição de caridade voltada para o paciente com diabetes, a JDRF. Após a conclusão do estudo, os dados serão analisados ​​e um relatório final do estudo será preparado e enviado ao financiador, patrocinador e comitê de ética. Os resultados serão escritos e enviados para publicação em periódicos revisados ​​por pares. Os resumos serão submetidos a congressos nacionais e internacionais. Informações escritas na forma de uma carta/newsletter descrevendo as principais descobertas do estudo serão publicadas na página do estudo.