O efeito do Covid-19 no microbioma do leite materno e seus componentes bioativos

A doença de coronavírus (Covid-19) é uma nova crise de saúde pública que ameaça a humanidade causada pelo SARS-CoV-2. Embora tenha se originado na província chinesa de Hubei no final de 2019, se espalhou para muitos países ao redor do mundo (Wang et al., 2020). Nos doentes com Covid-19 observam-se casos graves de complicações respiratórias, hepáticas, gastrointestinais e neurológicas e um quadro clínico complexo que acaba por evoluir para a morte (Guo et al., 2020; Li et al., 2020). Os mecanismos fisiopatológicos subjacentes são complexos e multifatoriais e foram resumidos como uma hiper-resposta do sistema imunológico que causa uma tempestade inflamatória / de citocinas (Li et al., 2020).

Embora o Covid-19 tenha causado infecção afetando primeiro o pulmão, os dados atuais mostraram que o sistema gastrointestinal também foi afetado pela detecção de RNA viral em células epiteliais intestinais humanas e fezes infectadas com Covid-19 (Cheng et al., 2002; Wu et al. , 2020). Acredita-se que isso seja causado pela relação entre a microbiota intestinal e o eixo pulmonar. Estudos demonstraram que as bactérias Bacteroidetes e Firmicutes, que são dominantes na colonização intestinal, também são dominantes no pulmão (Bacteroidetes, Firmicutes e Proteobacteria) (Zhang et al., 2020). Em suma, enquanto a microbiota intestinal causa doenças pulmonares, as infecções por vírus do trato respiratório também causam confusão na microbiota intestinal. De fato, muitos estudos mostraram que as infecções respiratórias estão associadas a uma alteração na composição da microbiota intestinal (Groves et al., 2020). A sequência de amplicon 16S rRNA de alto rendimento e as análises de sequência metagenômica shotgun demonstraram que pacientes hospitalizados com COVID-19 apresentaram alterações significativas no bacterioma intestinal, e a relação foi confirmada. Essas mudanças foram caracterizadas por uma redução significativa na diversidade do microbioma intestinal (BM) associada a queixas gastrointestinais da fase aguda da infecção (por exemplo, dor abdominal, náusea, vômito, diarréia), depleção de simbiontes bacterianos benéficos e enriquecimento de patógenos oportunistas (por exemplo, Streptococcus, Rothia, Actinomyces) (Gu et al., 2020; Zuo et al., 2020). Em particular, estudos recentes têm evidências de que pacientes com Covid-19 são mais propensos ao perfil de disbiose da microbiota intestinal, indivíduos infectados apresentam microbiota intestinal irregular e até disbiose (ruptura do equilíbrio da microbiota) na microbiota intestinal (Gu et al., 2020 ; Zuo et al., 2020 ).

A flora intestinal desempenha um papel protetor em muitas funções metabólicas e imunológicas do hospedeiro, ou seja, contra a colonização patogênica do vírus, incluindo treinamento e fortalecimento do sistema imunológico para combater infecções (Fernandes et al., 2019). Observando a composição da flora intestinal, ela é altamente dinâmica desde o nascimento e é moldada por diferentes fatores ambientais (p. dieta, leite materno pré / probióticos, drogas) resultando em várias funções microbianas do hospedeiro (Koppel, Maini Rekdal, Balskus, 2017; Weiss, Hennet, 2017). Trato gastrointestinal humano (GIS), 2000 'classificado em 12 filos diferentes, sendo os mais comuns (> 90%) Proteobacteria (Gram-negativo), Firmicutes (Gram-positivo), Actinobacteria (Gram-positivo) e Bacteroidetes (Gram-negativo) phyla. Acredita-se que o viroma intestinal humano, que consiste em vírus procarióticos e eucarióticos, compartilha informações importantes com todos os componentes microbianos e pode afetar a saúde humana em geral, moldando a estrutura e a função da comunidade intestinal (Cani, 2018; Garmaeva et al., 2019). ).

O leite materno é o componente bioativo que mais afeta a formação da colonização microbiana neonatal no período pós-natal e nos fornece informações sobre a saúde humana futura. O leite materno não é apenas a melhor fonte nutricional para bebês, mas também é conhecido por conter componentes imunológicos, como anticorpos secretores, células imunes, proteínas antimicrobianas (como lactoferrina e lisozima), citocinas e oligossacarídeos do leite humano. Antes dos anos 2000, o leite materno era considerado estéril e a presença de bactérias indicava contaminação ou infecção. No entanto, vários pesquisadores mostraram que o leite materno foi colonizado por bactérias desde a gravidez e contém bactérias comensais em particular. Em um estudo, descobriu-se que os filos Proteobacteria (Gram-negativos), Firmicutes (Gram-positivos), Actinobacteria (Gram-positivos) e Bacteroidetes (Gram-negativos), que são dominantes na colonização intestinal materna, estão entre os leites maternos micróbios Firmicutes, Proteobacteria Bacteroidetes e Actinobacteria. Ficou provado que o leite materno se origina do sistema gastrointestinal da mãe neste caso (Ojo et al., 2018). Além disso, o mesmo estudo mostrou que havia bactérias compartilhando as mesmas cepas no intestino da mãe, no intestino do bebê e no leite materno, e as bactérias comensais da mãe tinham transmissão vertical para o intestino do bebê através do leite materno.

Os coronavírus humanos foram definidos como vírus de RNA de fita simples, sensíveis a envelope, descritos pela primeira vez em 1965 (Tyrrell e Bynoe, 1965). Existem sete cepas identificadas conhecidas por infectar humanos. Quatro das cepas (alfacoronavírus 229E, NL63, OC43 e betacoronavírus HKU1) são onipresentes em humanos e causam o resfriado comum. Existem dúvidas sobre o efeito dos coronavírus humanos na saúde da gestante, da mãe e do bebê, e o status da transmissão não é claro. A gravidez altera o sistema imunológico da mulher e a torna mais suscetível a infecções. No entanto, atualmente não há evidências de que as mulheres grávidas tenham maior probabilidade de serem afetadas pelo COVID 19 ou por doenças graves, em comparação com a população em geral. Embora o mecanismo não seja claro, há evidências limitadas de que uma das quatro cepas (229E) mencionadas acima pode ser transmitida verticalmente de mães para bebês (Gagneur et al., 2008). A presença deste vírus (229E) em amostras gástricas neonatais sugere que um possível mecanismo de infecção é através do leite materno, mas este estudo não avaliou especificamente o leite materno (Gagneur et al., 2008).

Os primeiros relatos de casos relatados na China sugeriram que não havia vírus no líquido amniótico, sangue do cordão umbilical, esfregaços da garganta do recém-nascido, placenta, fluido vaginal e amostras de leite materno infectadas com Covid-19 (Johns et al, 2013). Os dados mais recentes indicam que não há transmissão vertical para o feto e, até agora, nenhum vírus foi encontrado no sangue do cordão umbilical de recém-nascidos de gestantes positivas para Covid-19, amostras nasais e líquido amniótico e placentas de gestantes. No entanto, o efeito da estrutura microbiana intestinal afetada pelo Covid-19 na microbiota do leite materno e o efeito de uma disbiose na saúde infantil ou o efeito das propriedades curativas do leite materno no Covid-19 ainda não são claramente conhecidos. As opiniões deste estudo são de que a colonização microbiana intestinal proveniente do sistema gastrointestinal afetado pelo Covid-19 afetará a colonização microbiana do leite materno. No entanto, não há nenhum estudo sobre este assunto.

O leite materno é um nutriente de ouro que fornece nutrientes essenciais e compostos bioativos que suportam o crescimento e o desenvolvimento imunológico durante a infância. A variação nos componentes do leite e compostos bioativos como resultado de fatores demográficos e genéticos, estilo de vida e exposição da mãe tem efeitos positivos e negativos na saúde infantil (Abrahamsson et al., 2009; de Andres et al., 2018; Johns et al. , 2013). Foi relatado que bebês amamentados têm um microbioma intestinal dinâmico e a incidência de algumas doenças diminuiu (Abrahamsson et al., 2009; de Andres et al., 2018). Além de macro e micronutrientes e compostos bioativos, o leite materno contém muitos tipos de bactérias. A lactoferrina é um dos componentes bioativos importantes do leite materno. A lactoferrina no leite materno pode apoiar um ambiente intestinal local, como a microbiota que fortalece as defesas inatas dos recém-nascidos. A lactoferrina promove o crescimento da microbiota intestinal favorável e a proliferação de enterócitos por meio de efeitos anti-inflamatórios e imunomoduladores diretos.

A ação da lactoferrina nos receptores celulares evita danos virais, acúmulo de superfície e entrada nas células. Desta forma, protege e fortalece a imunidade da mucosa e a barreira epitelial intestinal. Acredita-se que o leite materno, particularmente a lactoferrina, exiba potenciais efeitos antivirais. O desafio é a eficácia deles na prevenção de infecções virais, como os coronavírus (de Andres et al., 2018).

Acreditamos que a amamentação precoce fornece prevenção vital durante surtos virais devido ao alto valor do colostro e do leite materno e ao papel específico da lactoferrina, mas são necessárias mais evidências clínicas. Esses efeitos e mecanismos não foram testados no Covid-19, mas podemos considerar essa abordagem, pois afetam outros coronavírus.

Além disso, sabe-se que os componentes do leite materno contendo aproximadamente 109 bactérias afetam o próprio microbioma e o sistema imunológico do bebê (Ruiz et al., 2019). No entanto, ao contrário do que se sabe, a microbiota do leite materno e seus fatores de influência estão sendo descobertos e compreendidos apenas recentemente (McGuire & McGuire, 2017; Moossavi et al., 2019; Williams et al., 2017). Além disso, ao explorar os efeitos de certos componentes do leite materno no bebê, tendemos a ignorar o estado dinâmico e o efeito de outros componentes que podem afetar muito os resultados. Embora se soubesse que o microbioma, que não podemos ver a olho nu, poderia afetar os indivíduos, não se pensava que nosso mundo mudaria tanto com um único vírus, o Covid-19. Embora o microbioma que frequentemente ignoramos porque é invisível para nós nos lembre de um mundo que tem efeitos profundos em nossa saúde e bem-estar, como o Covid-19 afeta esse mundo e o leite materno? Para tanto, o objetivo deste estudo foi determinar o microbioma do leite materno e os níveis de proteínas biologicamente ativas (imunoglobulina A secretora (sIgA), lisozima, lactoferrina, osteoprotegerina (OPG), leptina, adiponectina e β-endorfina (b-) de mães que tiveram Covid-19 com mães saudáveis. será comparado.

Serão incluídas no estudo 20 mães (10 mães) e saudáveis ​​(10 mães) que tiveram Covid-19 no último mês de gravidez entre abril de 2021 e junho de 2021 e as mães terão uma consulta no 15º dia e começará com a coleta de amostras de leite materno e microbiota 16sRNA. Analisando o conteúdo da microbiota do leite materno e os níveis de proteínas biologicamente ativas (imunoglobulina secretora A (sIgA), lisozima, lactoferrina, osteoprotegerina (OPG), leptina, adiponectina e β-endorfina (b)) no conteúdo do leite materno serão avaliados.

A hipótese deste estudo é que a microbiota do leite materno diferirá em variedade e composição em mães que tiveram Covid-19. Nessa direção, como resultado da pesquisa; Realização de análises microbianas para avaliar o conteúdo da microbiota e componentes bioativos por meio do leite de mães que tiveram Covid-19 durante a gravidez,

- De acordo com os resultados obtidos, planeja-se dar conselhos e orientações corretas de acordo com um problema urgente.