Transporte eritrocitário de lactato durante o exercício (Projeto TELE) (TELE)

Introdução

O lactato é o produto final da glicólise e tem capacidade de ser transportado de uma célula para outra, desempenhando inúmeras funções. Este transporte ocorre principalmente através de vários transportadores de monocarboxilato (MCT). O mais predominante é o MCT1, que transfere lactato bidirecionalmente dependendo da concentração de lactato e do pH em cada lado da membrana. O MCT1 é onipresente, estando presente na maioria dos tecidos humanos, como a membrana dos eritrócitos, indicando que essas células são capazes de transportar lactato por toda a corrente sanguínea. Alguns estudos descreveram a cinética do lactato entre os diferentes compartimentos sanguíneos (plasma eritrocitário) durante exercícios incrementais e de estado estacionário, mas não durante exercício intermitente e/ou recuperação após exercício. Além disso, vários estudos observaram que a função do MCT1 é condicionada pela presença de uma variante genética: o polimorfismo T1470A (rs1049434), que envolve uma substituição do ácido aspártico pelo ácido glutâmico na posição 490 da proteína. Os dados sugerem que um genótipo AA (Glu/Glu) para este polimorfismo de nucleotídeo único (ou SNP) leva a uma maior capacidade de transporte de lactato do que o perfil TT (Arg/Arg). No entanto, nenhum estudo analisou se este SNP afeta diretamente a função ou conteúdo do MCT1 eritrocitário. Portanto, os dois objetivos gerais deste ensaio clínico são:

1. estudar a cinética do lactato entre o plasma e os eritrócitos durante um exercício intervalado e sua posterior recuperação, considerando o pH sanguíneo, o genótipo para o polimorfismo T1470A do gene SLC16A1 (rs1049434) e a quantidade de MCT1 na membrana dos eritrócitos;
2. analisar os níveis de MCT1 na membrana eritrocitária de acordo com o status de treinamento e genótipo para o polimorfismo T1470A de SLC16A1 (rs1049434).

Procedimentos

O estudo será dividido em duas fases, cada uma das quais será orientada principalmente para alcançar um de dois objetivos gerais:

• Fase I: Focada principalmente no estudo da cinética do lactato entre os compartimentos sanguíneos durante o exercício.
• Fase II: Focada principalmente na análise da quantidade de MCT1 na membrana eritrocitária.

Para ambas as fases, os voluntários serão informados e assinarão um termo de consentimento livre e esclarecido antes da coleta de uma amostra de sangue para genotipagem. Uma vez conhecido o genótipo, apenas os participantes com genótipo AA ou TT serão selecionados.

Os testes que serão realizados ao longo da Fase I serão os seguintes:

• Uma vez selecionados os participantes com os genótipos AA e TT, eles realizarão um teste incremental escalonado até a exaustão para determinar o primeiro e o segundo limiar de lactato. Esses limites serão determinados medindo a concentração de lactato em amostras de sangue capilar do lóbulo da orelha.
• Por fim, será realizado um protocolo de exercícios intervalados iniciando com 1 min de descanso seguido de 5 min de aquecimento em intensidade igual a 80% do primeiro limiar de lactato. Seguem-se 4 séries de 1 minuto e 30 segundos a uma intensidade 20% acima do segundo limiar de lactato, com intervalos de recuperação de 5 minutos a 80% do primeiro limiar de lactato. Após as 4 séries, será realizada uma recuperação final de 20 min a 80% do primeiro limiar de lactato. Durante este teste, amostras de sangue capilar do lóbulo da orelha e amostras de sangue venoso do antebraço serão analisadas quanto à concentração de lactato.

O procedimento para a Fase II será o seguinte:

• Uma vez selecionados os participantes com genótipo AA e TT, o sangue venoso será extraído do antebraço em repouso.
• Os níveis de atividade física de todos os participantes serão quantificados por meio do Questionário Internacional de Atividade Física (IPAQ).
• A análise do conteúdo da proteína MCT1 eritrocitária por citometria de fluxo será realizada a partir das amostras de sangue venoso.