Транспорт лактата эритроцитами во время тренировки (проект TELE) (TELE)

Введение

Лактат является конечным продуктом гликолиза и способен транспортироваться из одной клетки в другую, выполняя многочисленные функции. Этот транспорт осуществляется в основном через несколько переносчиков монокарбоксилатов (MCT). Наиболее преобладающим является MCT1, который переносит лактат в двух направлениях в зависимости от концентрации лактата и pH на каждой стороне мембраны. MCT1 широко распространен и присутствует в большинстве тканей человека, таких как мембрана эритроцитов, что указывает на то, что эти клетки способны переносить лактат по кровотоку. В некоторых исследованиях описана кинетика лактата между различными отделами крови (эритроцитами и плазмой) во время поэтапных и стационарных упражнений, но не во время прерывистых упражнений и/или восстановления после тренировки. Более того, в нескольких исследованиях было обнаружено, что функция MCT1 обусловлена ​​наличием генетического варианта: полиморфизма T1470A (rs1049434), который включает замену аспарагиновой кислоты на глутаминовую кислоту в положении 490 белка. Данные свидетельствуют о том, что генотип AA (Glu/Glu) для этого однонуклеотидного полиморфизма (или SNP) приводит к более высокой способности транспорта лактата, чем профиль TT (Arg/Arg). Однако ни в одном исследовании не анализировалось, влияет ли этот SNP непосредственно на функцию или содержание MCT1 эритроцитов. Таким образом, двумя основными целями этого клинического исследования являются:

1. изучить кинетику лактата между плазмой и эритроцитами при интервальной нагрузке и последующем ее восстановлении с учетом pH крови, генотипа полиморфизма T1470A гена SLC16A1 (rs1049434) и количества MCT1 в мембране эритроцитов;
2. проанализировать уровни MCT1 в мембране эритроцитов в зависимости от статуса обучения и генотипа полиморфизма T1470A SLC16A1 (rs1049434).

Процедуры

Исследование будет разделено на два этапа, каждый из которых будет в первую очередь ориентирован на достижение одной из двух общих целей:

• Фаза I: сосредоточена в первую очередь на изучении кинетики лактата между компартментами крови во время тренировки.
• Фаза II: сосредоточена в первую очередь на анализе количества MCT1 в мембране эритроцитов.

На обоих этапах добровольцы будут проинформированы и подпишут форму информированного согласия перед тем, как будет взят образец крови для генотипирования. Как только генотип станет известен, будут выбраны только участники с генотипом АА или ТТ.

Тесты, которые будут проводиться на этапе I, будут следующими:

• После того, как участники с генотипами АА и ТТ будут выбраны, они проведут поэтапный инкрементальный тест до изнеможения, чтобы определить первый и второй порог лактата. Эти пороговые значения будут определяться путем измерения концентрации лактата в образцах капиллярной крови из мочки уха.
• Наконец, будет выполняться протокол интервальных упражнений, начиная с 1-минутного отдыха, за которым следует 5-минутная разминка с интенсивностью, равной 80% от первого лактатного порога. Затем следуют 4 подхода по 1 минуте 30 секунд с интенсивностью на 20% выше второго лактатного порога с интервалами восстановления 5 минут при 80% первого лактатного порога. После 4 подходов будет выполнено окончательное 20-минутное восстановление при 80% первого порога лактата. Во время этого теста образцы капиллярной крови из мочки уха и образцы венозной крови из предплечья будут проанализированы на концентрацию лактата.

Процедура Этапа II будет следующей:

• После того, как участники с генотипом АА и ТТ будут выбраны, из их предплечья в состоянии покоя будет взята венозная кровь.
• Уровни физической активности всех участников будут количественно оценены с использованием Международного опросника по физической активности (IPAQ).
• Анализ содержания белка MCT1 в эритроцитах методом проточной цитометрии будет проводиться из образцов венозной крови.