Влияние фармакогенетики на уровень иматиниба в плазме и ответ

Введение:

Хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ) — миелопролиферативное заболевание с частотой 1–2 случая на 100 000 взрослых. На его долю приходится примерно 15% впервые диагностированных случаев лейкемии у взрослых.

Внедрение иматиниба, ингибитора тирозинкиназы (ИТК), в начале 21 века считается прорывом в лечении ХМЛ. У подавляющего большинства пациентов лечение иматинибом вызывает цитогенетические и даже молекулярные ответы с очень низкими или неопределяемыми уровнями транскриптов BCR-ABL1. Эти пациенты остаются свободными от прогрессирования бластного криза. Однако иматиниб не излечивает болезнь, потому что он не способен уничтожить лейкемические стволовые клетки, которые, таким образом, создают потенциальный резервуар для рецидива.

Несмотря на его эффективность и благоприятный фармакокинетический профиль, концентрация иматиниба в плазме крови у разных людей сильно различается, что может привести к неэффективности лечения и прогрессированию заболевания.

Полиморфизмы генов, связанных с абсорбцией, распределением, метаболизмом и выведением иматиниба, могут влиять на биодоступность и, следовательно, реакцию на препарат.

Цель исследования:

Исследование направлено на изучение возможного влияния генетических полиморфизмов в некоторых метаболизирующих ферментах [CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 и rs 10509681)] и мембранных транспортерах [ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) и SLC22A1 1222 A > G (rs 628031)] на уровень плазмы и молекулярный ответ (MMR) иматиниба у пациентов с ХМЛ.

Эти полиморфизмы были выбраны на основании их значимости для фармакокинетики иматиниба и их частоты у представителей европеоидной расы.

Исследование также направлено на то, чтобы предоставить пациентам с ХМЛ индивидуальный вариант лечения, тем самым, вероятно, улучшая ответ и уменьшая побочные эффекты.

Пациенты и методы:

Пациенты:

В исследование будут включены пациенты с документально подтвержденным гематологическим, цитогенетическим и молекулярным диагнозом хронической фазы ХМЛ, которые находятся на непрерывном лечении иматинибом в дозе 400 мг перорально в день в течение не менее 12 месяцев в отделении медицинской онкологии Института рака Южного Египта (SECI), Асьют. Египет.

Критерии исключения: продолжительность терапии иматинибом менее 12 месяцев, плохая приверженность лечению и выявление генной мутации в киназном домене BCR-ABL1.

Пациенты будут разделены на 2 группы в соответствии с их молекулярным ответом на иматиниб следующим образом:

Группа I: пациенты с ХМЛ с MMR. Группа II: пациенты с CML без MMR. Пациентов обеих групп будут сравнивать в отношении уровня иматиниба в плазме и выбранных генетических полиморфизмов.

Методы:

Забор крови:

Три образца крови (по 3 мл на каждый) будут взяты в пробирки с ЭДТА путем венепункции для измерения уровня иматиниба в плазме, измерения уровня транскрипции BCR-ABL1 и для генотипирования.

Измерение минимального уровня иматиниба:

Образцы крови будут собираться через 24 часа после приема предыдущей дозы (корыта) и не менее чем через 5 дней регулярного приема препарата, чтобы убедиться в достижении равновесного состояния. В течение 1 часа после сбора образцы крови будут центрифугированы при 3000 об/мин в течение 10 минут при комнатной температуре и будут храниться при -20°C до проведения анализа.

Уровень иматиниба в плазме будет измеряться с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым обнаружением (ВЭЖХ-УФ) в соответствии с методом, описанным Barratt et al.

Измерение уровня транскрипции BCR-ABL1:

Суммарная РНК будет извлечена из лейкоцитов периферической крови с помощью доступных наборов для выделения РНК. Уровень транскрипции BCR-ABL1 будет количественно определен с использованием анализа полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени для оценки молекулярного ответа на иматиниб через 12 месяцев лечения иматинибом.

Генотипирование:

ДНК будет извлечена из лейкоцитов с помощью доступных наборов для выделения ДНК и будет храниться при температуре -80°C до генотипирования.

Генотипирование будет выполнено для CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 и rs 10509681), ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) и SLC22A1 1222 A > G (rs 628031) с помощью ПЦР.