Effetto della farmacogenetica sul livello plasmatico di imatinib e sulla risposta

Introduzione:

La leucemia mieloide cronica (LMC) è una malattia mieloproliferativa con un'incidenza di uno o due casi ogni 100.000 adulti. Rappresenta circa il 15% dei casi di leucemia di nuova diagnosi negli adulti.

L'introduzione di imatinib, l'inibitore della tirosina chinasi (TKI), all'inizio del 21° secolo è considerata una svolta nel trattamento della LMC. Nella stragrande maggioranza dei pazienti, il trattamento con imatinib induce risposte citogenetiche e persino molecolari con livelli di trascritto BCR-ABL1 molto bassi o non rilevabili. Questi pazienti rimangono liberi dalla progressione verso la crisi blastica. Tuttavia, imatinib non cura la malattia perché non è in grado di eradicare le cellule staminali leucemiche, che quindi forniscono un potenziale serbatoio per la ricaduta.

Nonostante la sua efficacia e il profilo farmacocinetico favorevole, esiste un'ampia variabilità interindividuale nelle concentrazioni plasmatiche di imatinib, che può portare al fallimento del trattamento e alla progressione della malattia.

I polimorfismi nei geni correlati all'assorbimento, alla distribuzione, al metabolismo e all'escrezione di imatinib possono influenzare la biodisponibilità e di conseguenza la risposta al farmaco.

Scopo dello studio:

Lo studio mira a indagare il possibile effetto dei polimorfismi genetici in alcuni enzimi metabolizzanti [CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 e rs 10509681)] e trasportatori di membrana [ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) e SLC22A1 1222 A > G (rs 628031)] sul livello plasmatico e sulla risposta molecolare (MMR) di imatinib in pazienti con LMC.

Questi polimorfismi sono stati selezionati in base alla loro rilevanza per la farmacocinetica di imatinib e alla loro frequenza nei caucasici.

Lo studio mira anche a fornire ai pazienti con LMC un'opzione di trattamento personalizzata, probabilmente migliorando così la risposta e riducendo gli effetti collaterali.

Pazienti e metodi:

Pazienti:

Lo studio includerà pazienti con diagnosi ematologica, citogenetica e molecolare documentata di LMC in fase cronica, che sono in trattamento continuo con una dose orale di 400 mg di imatinib al giorno per almeno 12 mesi presso il Dipartimento di Oncologia Medica, South Egypt Cancer Institute (SECI), Assut. Egitto.

I criteri di esclusione sono: durata della terapia con imatinib inferiore a 12 mesi, scarsa compliance al trattamento e identificazione di mutazioni geniche nel dominio della chinasi di BCR-ABL1.

I pazienti saranno divisi in 2 gruppi in base alla loro risposta molecolare a imatinib come segue:

Gruppo I: pazienti con LMC con MMR Gruppo II: pazienti con LMC senza MMR I pazienti di entrambi i gruppi saranno confrontati per quanto riguarda il livello plasmatico di imatinib ei polimorfismi genetici selezionati.

Metodi:

Prelievo di sangue:

Tre campioni di sangue (3 ml per ciascuno) saranno raccolti in provette contenenti EDTA mediante prelievo venoso per la misurazione del livello plasmatico di imatinib, la misurazione del livello di trascrizione BCR-ABL1 e per la genotipizzazione.

Misurazione del livello minimo di Imatinib:

I campioni di sangue verranno raccolti dopo 24 ore dalla dose precedente (trough) e dopo almeno 5 giorni di uso regolare del farmaco per garantire il raggiungimento dello stato stazionario. Entro 1 ora dal prelievo, i campioni di sangue saranno centrifugati a 3000 rpm per 10 minuti a temperatura ambiente e conservati a -20°C fino al momento dell'analisi.

Il livello plasmatico di imatinib sarà misurato mediante cromatografia liquida ad alta prestazione con rivelazione ultravioletta (HPLC-UV) secondo il metodo descritto da Barratt et al.

Misurazione del livello di trascrizione BCR-ABL1:

L'RNA totale sarà estratto dai leucociti del sangue periferico mediante i kit di estrazione dell'RNA disponibili. Il livello di trascrizione BCR-ABL1 sarà quantificato utilizzando l'analisi della reazione a catena della polimerasi (PCR) in tempo reale per valutare la risposta molecolare a imatinib dopo 12 mesi di trattamento con imatinib.

Genotipizzazione:

Il DNA sarà estratto dai leucociti mediante i kit di estrazione del DNA disponibili e sarà conservato a -80°C fino alla genotipizzazione.

La genotipizzazione sarà eseguita per CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 e rs 10509681), ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) e SLC22A1 1222 A > G (rs 628031) mediante PCR