Farmakogenetiikan vaikutus imatinibiplasman tasoon ja vasteeseen

Esittely:

Krooninen myelooinen leukemia (CML) on myeloproliferatiivinen sairaus, jonka ilmaantuvuus on 1-2 tapausta 100 000 aikuista kohden. Se muodostaa noin 15 % äskettäin diagnosoiduista aikuisten leukemiatapauksista.

Tyrosiinikinaasin estäjän (TKI) imatinibin käyttöönottoa 2000-luvun alussa pidetään läpimurrona KML:n hoidossa. Suurimmalla osalla potilaista imatinibihoito indusoi sytogeneettisiä ja jopa molekulaarisia vasteita erittäin alhaisilla tai havaitsemattomilla BCR-ABL1-transkriptitasoilla. Nämä potilaat pysyvät vapaita etenemisestä blastikriisiin. Imatinibi ei kuitenkaan paranna tautia, koska se ei pysty hävittämään leukeemisia kantasoluja, mikä on siten mahdollinen uusiutumisvarasto.

Huolimatta sen tehokkuudesta ja suotuisasta farmakokineettisestä profiilista, imatinibin plasmapitoisuuksissa on suuri yksilöiden välinen vaihtelu, mikä voi johtaa hoidon epäonnistumiseen ja taudin etenemiseen.

Geenien polymorfismit, jotka liittyvät imatinibin imeytymiseen, jakautumiseen, metaboliaan ja erittymiseen, voivat vaikuttaa biologiseen hyötyosuuteen ja siten vasteeseen lääkkeelle.

Tutkimuksen tavoite:

Tutkimuksen tavoitteena on selvittää geneettisten polymorfismien mahdollista vaikutusta tiettyihin metaboloiviin entsyymeihin [CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 ja rs 10509681)] ja kalvonkuljettajiin [ABCB1 2677 G>T/A (rs8) ja SLC22A1 1222 A > G (rs 628031)] imatinibin plasmatasosta ja molekyylivasteesta (MMR) KML-potilailla.

Nämä polymorfismit valittiin niiden merkityksen perusteella imatinibin farmakokinetiikkaan ja niiden esiintymistiheyteen valkoihoisilla.

Tutkimuksen tavoitteena on myös tarjota KML-potilaille yksilöllinen hoitovaihtoehto, mikä todennäköisesti parantaa vastetta ja vähentää sivuvaikutuksia.

Potilaat ja menetelmät:

Potilaat:

Tutkimukseen osallistuu potilaita, joilla on dokumentoitu hematologinen, sytogeneettinen ja molekyylidiagnoosi kroonisen vaiheen KML:stä ja jotka ovat jatkuvassa hoidossa 400 mg:n imatinibiannoksella päivässä vähintään 12 kuukauden ajan Medical Oncology Department, South Egypt Cancer Institute (SECI), Assiut. Egypti.

Poissulkemiskriteerit ovat: imatinibihoidon kesto alle 12 kuukautta, huono hoitomyöntyvyys ja geenimutaatio(i)n tunnistaminen BCR-ABL1:n kinaasidomeenissa.

Potilaat jaetaan kahteen ryhmään imatinibin molekyylivasteen mukaan seuraavasti:

Ryhmä I: KML-potilaat, joilla on MMR Ryhmä II: CML-potilaat, joilla ei ole MMR:tä Molemmissa ryhmissä olevia potilaita verrataan imatinibin plasmapitoisuuden ja valittujen geneettisten polymorfismien suhteen.

Menetelmät:

Verinäytteet:

Kolme verinäytettä (3 ml kutakin kohti) kerätään EDTA:ta sisältäviin putkiin laskimopunktiolla imatinibin plasmatason mittaamista, BCR-ABL1-transkriptiotason mittaamista ja genotyypitystä varten.

Imatinibin alimman tason mittaus:

Verinäytteet otetaan 24 tunnin kuluttua edellisestä annoksesta (alhaalta) ja vähintään 5 päivän säännöllisen lääkkeen käytön jälkeen vakaan tilan saavuttamisen varmistamiseksi. Yhden tunnin sisällä keräämisestä verinäytteet sentrifugoidaan nopeudella 3 000 rpm 10 minuuttia huoneenlämmössä ja niitä säilytetään -20 °C:ssa analyysiin asti.

Imatinibin taso plasmassa mitataan korkean erotuskyvyn nestekromatografialla ultraviolettidetektiolla (HPLC-UV) Barrattin et ai. kuvaaman menetelmän mukaisesti.

BCR-ABL1-transkriptiotason mittaus:

Kokonais-RNA uutetaan perifeerisen veren leukosyyteistä saatavilla olevilla RNA-uuttopakkauksilla. BCR-ABL1-transkriptiotaso kvantifioidaan käyttämällä reaaliaikaista polymeraasiketjureaktio (PCR) -analyysiä imatinibin molekyylivasteen arvioimiseksi 12 kuukauden imatinibihoidon jälkeen.

Genotyypitys:

DNA uutetaan leukosyyteistä saatavilla olevilla DNA-uuttopakkauksilla ja sitä säilytetään -80 °C:ssa genotyypitykseen asti.

Genotyypityksen suorittaa CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 ja rs 10509681), ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) ja SLC22A1 1222 A2 > G0CR1.