Введение аутологичных Т-клеток, генетически сконструированных для экспрессии рецепторов Т-клеток, реактивных против мутировавших или вирусных неоантигенов, у пациента с метастатическим раком плюс введение пембролизумаба

Фон:

• Введение аутологичных опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов (TIL) может способствовать полной и стойкой регрессии у 20-25% пациентов с метастатической меланомой. Недавние исследования показали, что эти TIL преимущественно распознают уникальные мутировавшие или вирусные неоантигены, экспрессируемые раком, не присущие другим меланомам.
• Введение нерасфасованной аутологичной TIL пациентам с рядом других солидных видов рака, включая рак желудочно-кишечного тракта и мочеполового тракта, практически не оказывает терапевтического воздействия.
• Недавние исследования в Хирургическом отделении Национального института рака (NCI-SB) показали, что TIL из немеланомных солидных раков также может содержать Т-клетки, реактивные против неразделенных уникальных мутировавших неоантигенов, экспрессируемых в раке. Частота этих Т-клеток очень низка (часто < 0,1%), поэтому трудно выделить и вырастить Т-клетки, реагирующие на мутации, до уровней, необходимых для эффективной терапии.
• У одного пациента с химиорезистентной метастатической холангиокарциномой мы смогли вырастить относительно чистую популяцию неоантиген-реактивных TIL, и введение этих клеток опосредовало почти полную регрессию всех метастатических заболеваний, которая в настоящее время длится 2,5 года.
• Мы разработали подходы для идентификации редких неоантиген-реактивных Т-клеток из распространенных немеланомных видов рака, выделения их Т-клеточных рецепторов (TCR) и генной инженерии аутологичных лимфоцитов периферической крови (PBL) для экспрессии этих TCR с высокой эффективностью. Клетки с модифицированным геном неоантигена TCR могут распознавать и уничтожать аутологичный рак in vitro.
• В дополнение к реактивности к неоантигенам, полученным в результате несинонимичных мутаций, Т-клетки могут распознавать эпитопы вируса папилломы человека (ВПЧ) у пациентов с раком, индуцированным ВПЧ. TCR из этих реактивных клеток можно выделить и с высокой эффективностью трансдуцировать ретровирусом в аутологичные PBL. Этот клинический протокол будет лечить одного пациента с рефрактерным раком анального канала с использованием адоптивного переноса аутологичных PBL, трансдуцированных генами, кодирующими TCR, которые распознают уникальные мутировавшие или вирусные неоантигены, экспрессируемые раком.

Цель:

- В рамках IND для одного пациента для лечения пациента с метастатическим HPV-16-положительным плоскоклеточным раком анального канала с помощью аутологичных лимфоцитов периферической крови (PBL), которые были трансдуцированы генами, кодирующими Т-клеточные рецепторы, которые распознают мутированные или вирусные неоантигены в аутологичных рак.

Право на участие:

• Должен иметь поддающееся измерению метастатическое заболевание согласно критериям RECIST v1.1.
• Необходимо подписать документ об информированном согласии.
• Готов подписать долгосрочную доверенность.
• До начала лечения необходимо получить все разрешения регулирующих органов.

Дизайн:

• Этот пациент уже подвергся резекции или биопсии, чтобы получить опухоль для создания аутологичных культур TIL. Это будет проводиться в соответствии с протоколом сбора клеток NCI-SB 03-C-0277 (Протоколы сбора клеток и подготовки к хирургическому отделению адаптивной клеточной терапии).
• Экзомное секвенирование и РНК-Seq будут выполняться для выявления мутаций, выраженных в раке пациента. Множественные аутологичные культуры TIL будут выращиваться и тестироваться на реактивность против мутаций из аутологичной опухоли с использованием разработанных нами анализов, которые включают воздействие на аутологичные антиген-презентирующие клетки длинных пептидов, содержащих мутацию, или тандемных мини-генов, кодирующих мутацию.
• Будут идентифицированы культуры Т-клеток с реактивностью против мутировавших и вирусных неоантигенов, а отдельные рецепторы Т-клеток, распознающие неоантигены, будут синтезированы и использованы для создания ретровирусных супернатантов для трансдукции TCR в аутологичные PBL пациента.
• Пациенту будет назначена немиелоаблативная, лимфоистощающая препаративная схема циклофосфамида и флударабина с последующей инфузией аутологичных трансдуцированных PBL, а затем высоких доз альдеслейкина. Пациент также будет получать пембролизумаб в день -2 перед введением клеток и три дополнительные дозы каждые три недели после инфузии клеток.
• Клинический и иммунологический ответ будет оцениваться примерно через 4-6 недель после инфузии клеток и впоследствии периодически.