Verabreichung autologer T-Zellen, die genetisch verändert wurden, um T-Zell-Rezeptoren zu exprimieren, die gegen mutierte oder virale Neoantigene bei einem Patienten mit metastasierendem Krebs reagieren, plus die Verabreichung von Pembrolizumab

Hintergrund:

• Die Gabe autologer tumorinfiltrierender Lymphozyten (TIL) kann bei 20–25 % der Patienten mit metastasiertem Melanom eine vollständige, dauerhafte Rückbildung vermitteln. Jüngste Studien haben gezeigt, dass diese TIL überwiegend einzigartige mutierte oder virale Neoantigene erkennen, die von dem Krebs exprimiert werden, der nicht von anderen Melanomen geteilt wird.
• Die Verabreichung von autologem TIL in großen Mengen an Patienten mit einer Vielzahl anderer solider Krebsarten, einschließlich Krebserkrankungen des Gastrointestinaltrakts und des Urogenitaltrakts, hat wenig oder gar keine therapeutische Wirkung.
• Jüngste Studien im National Cancer Institute Surgery Branch (NCI-SB) haben gezeigt, dass TIL von soliden Nicht-Melanom-Krebsarten auch T-Zellen enthalten kann, die gegen nicht geteilte, einzigartige mutierte Neoantigene, die im Krebs exprimiert werden, reaktiv sind. Die Häufigkeit dieser T-Zellen ist sehr gering (häufig < 0,1 %) und es ist daher schwierig, mutationsreaktive T-Zellen zu isolieren und auf die für eine wirksame Therapie erforderlichen Mengen zu züchten.
• Bei einem einzigen Patienten mit chemorefraktärem metastasiertem Cholangiokarzinom konnten wir eine relativ reine Population von Neoantigen-reaktiven TIL züchten, und die Verabreichung dieser Zellen vermittelte eine nahezu vollständige Regression aller metastasierten Erkrankungen, die jetzt 2,5 Jahre anhält.
• Wir haben Ansätze entwickelt, um seltene Neoantigen-reaktive T-Zellen aus häufigen Nicht-Melanom-Krebsarten zu identifizieren, ihre T-Zell-Rezeptoren (TCR) zu isolieren und autologe periphere Blutlymphozyten (PBL) gentechnisch zu manipulieren, um diese TCRs mit hoher Effizienz zu exprimieren. Die neoantigen TCR-genmodifizierten Zellen können den körpereigenen Krebs in vitro erkennen und zerstören.
• Zusätzlich zur Reaktivität auf Neoantigene, die von nicht-synonymen Mutationen stammen, können T-Zellen Epitope des humanen Papillomavirus (HPV) bei Patienten mit HPV-induziertem Krebs erkennen. Der TCR aus diesen reaktiven Zellen kann isoliert und mit hoher Effizienz retroviral in autologe PBL transduziert werden. Dieses klinische Protokoll behandelt einen einzelnen Patienten mit refraktärem Analkrebs durch adoptiven Transfer von autologen PBL, die mit Genen transduziert wurden, die TCRs codieren, die einzigartige mutierte oder virale Neoantigene erkennen, die vom Krebs exprimiert werden.

Zielsetzung:

-Im Rahmen einer Einzelpatienten-IND zur Behandlung eines Patienten mit metastasiertem HPV-16-positivem Plattenepithelkarzinom des Analkarzinoms mit autologen peripheren Blutlymphozyten (PBL), die mit Genen transduziert wurden, die T-Zell-Rezeptoren codieren, die mutierte oder virale Neoantigene im autologen erkennen Krebs.

Teilnahmeberechtigung:

• Muss eine messbare, metastatische Erkrankung haben, wie sie gemäß den RECIST v1.1-Kriterien bewertet wird.
• Muss das Einverständniserklärungsdokument unterschreiben.
• Bereit, eine dauerhafte Vollmacht zu unterzeichnen.
• Vor Beginn der Behandlung müssen alle behördlichen Genehmigungen vorliegen.

Design:

• Dieser Patient wurde bereits einer Resektion oder Biopsie unterzogen, um einen Tumor für die Generierung autologer TIL-Kulturen zu gewinnen. Dies wird unter dem NCI-SB-Zellernteprotokoll 03-C-0277 (Zellernte und Vorbereitung für adoptive Zelltherapieprotokolle für den chirurgischen Zweig) durchgeführt worden sein.
• Exomische Sequenzierung und RNA-Seq werden durchgeführt, um die im Krebs des Patienten exprimierten Mutationen zu identifizieren. Mehrere autologe TIL-Kulturen werden gezüchtet und auf Reaktivität gegen Mutationen aus dem autologen Tumor getestet, wobei von uns entwickelte Assays verwendet werden, bei denen autologe Antigen-präsentierende Zellen langen Peptiden ausgesetzt werden, die die Mutation oder Tandem-Minigene enthalten, die die Mutation codieren.
• T-Zellkulturen mit Reaktivität gegen mutierte und virale Neoantigene werden identifiziert und die individuellen T-Zellrezeptoren, die die Neoantigene erkennen, werden synthetisiert und verwendet, um retrovirale Überstände für die Transduktion des TCR in das autologe PBL des Patienten zu erzeugen.
• Der Patient wird mit einem nicht-myeloablativen, lymphodepletierenden präparativen Regime aus Cyclophosphamid und Fludarabin behandelt, gefolgt von der Infusion von autolog transduziertem PBL und dann hochdosiertem Aldesleukin. Der Patient erhält außerdem Pembrolizumab am Tag -2 vor der Zellverabreichung und drei zusätzliche Dosen alle drei Wochen nach der Zellinfusion.
• Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4–6 Wochen nach der Zellinfusion und danach regelmäßig bewertet.