根据 CYP2C19 多态性，辅助西洛他唑与高维持剂量氯吡格雷治疗急性心肌梗死 (AMI) 患者 (ACCELAMI2C19)

学习时间表： 入学时间 - 6 个月（2009. 5.- 2009 年。 10.)（随访期 - 随机化后 1 个月）

• 支架置入术、辅助药物治疗和肌坏死标志物

  1) PCI

  (1) 所有干预措施均按照现行标准指南进行。 (2) 抽吸血栓切除术取决于操作者的判断。 (3) 如果患者有多个病灶，建议尽可能覆盖罪犯病灶。

  (4) PCI 允许任何类型的 DES。 如果需要裸金属支架，是允许的。

  (5) 直接支架术或预扩张术由操作者决定。

  2) 抗血栓药物

  1. 抗凝治疗在 PCI 前开始，并根据医生的判断使用低分子肝素（依诺肝素）或普通肝素。
  2. 如果需要糖蛋白 IIb/IIIa 抑制剂 (GPI)，则仅给予替罗非班。

  3) 肌坏死标志物

  (1) PCI前后对所有患者常规采集血样，评估8、24、48、72小时的CK-MB。

  (2) 如果值升高，则每 12 小时重复测量一次，直到达到峰值或值归一化。

  • 血小板功能测定 1)采血。

    1. 使用 21 号针头从肘前静脉抽取外周静脉血样。
    2. 使用双注射器技术收集血样，其中弃去前 2 至 4 毫升的血液以避免自发的血小板活化。

    2）透光率聚集法（LTA）

    1. 将血样吸入含有 0.5 mL 柠檬酸钠 3.2%（Becton-Dickinson，圣何塞，加利福尼亚州，美国）的真空采血管中，并在 60 分钟内处理。
    2. 将血液以 800 rpm 离心 10 分钟后，获得富血小板血浆 (PRP) 作为上清液。 将剩余的血液进一步以 2,500 rpm 离心 10 分钟以制备贫血小板血浆 (PPP)。 根据需要添加 PPP，将 PRP 调整为 250,000/μL 的血小板计数。
    3. 使用 PACKS-4 凝集仪（Helena Laboratories Corp.，Beaumont，Texas，USA）在 37℃ 评估血小板凝集。 使用 PRP 将透光率调整为 0%，每次测量调整为 100% PPP。
    4. 在添加浓度为 5 和 20 μM 的 ADP 后，系统地测量血小板聚集。 记录曲线 6 分钟。
    5. 聚集由对组分配不知情的实验室人员测量。

    6. 聚集值的绝对减少（ΔAggmax 或 Agglate）定义为术前和 30 天治疗之间聚集的变化：

       • Agg = 术前 Agg - 30 天治疗后 Agg

    7. 血小板聚集抑制 (IPA) 定义为术前和 30 天治疗之间聚集值（Aggmax 和 Agglate）的相对变化：

       IPA (%) = [（术前 Agg - 30 天治疗后 Agg）/术前 Agg] X 100

    3) 快速血小板功能测定（RPFA：VerifyNow P2Y12 测定）

    1. 床旁系统（VerifyNow；Accumetrics，San Diego，California）是一种基于活化血小板能力的自动化全血浊度测定，使用含有纤维蛋白原包被的珠子和血小板激动剂的药筒。
    2. 将血液吸入 Greiner Bio-One 3.2% 柠檬酸盐真空管中。
    3. 该通道包含纤维蛋白原涂层聚苯乙烯珠和 20 μM ADP 作为血小板激动剂。 该通道还包含 22 nmol/l PGE1 以抑制细胞内游离钙水平，从而减少 P2Y1 受体的非特异性贡献。
    4. 结果以 P2Y12 反应单位 (PRU) 报告。

    5. PRU 的绝对减少定义为 PRU 在术前和 30 天治疗之间的变化：

       ∆ PRU = 术前 PRU - 30 天治疗后的 PRU

    6. PRU 的抑制百分比 (PI) 定义为术前和 30 天治疗之间的相对变化：

       PI (%) = [（术前 PRU - 30 天治疗后的 PRU）/术前 PRU] X 100

       2-8. CYP2C19基因分型

    1. CYP2C19 基因型通过聚合酶链式反应 (PCR) 确定。 SNaPshot 方法，使用提取试剂盒（QIAampR DNA Blood Mini Kit，Qiagen，Hilden，Germany）从外周静脉血白细胞中分离的基因组 DNA。

    2. 使用 ABI SNaPshot 反应和 ABI 3100 研究了两种 CYP2C19 多态性，CYP2C19*2（rs4244285，c.681G>A，p.P227P）和 CYP2C19*3（rs4986893，c.636G>A，p.W212X）自动遗传分析仪（Applied Biosystems，Foster City，CA，USA）。

       ****统计和数据分析

    1. 样本量估计

       @基于我们之前的研究（ACCEL-AMI）

       30 天后辅助西洛他唑绝对减少 5 μM ADP 诱导的最大聚集：24.0%

       30 天后通过辅助高剂量维持氯吡格雷 150 毫克/天绝对减少 5 μM ADP 诱导的最大聚集：11.0%

       两种方案增强血小板抑制的相对差异：

       54.0% - 双侧α水平=0.05 - 功率= 95% - 三重组：高MD组= 1：1 - 标准偏差= 0.4

       每组至少需要 15 名患者。

       @基于之前的另一项研究（CYP2C19多态性研究）

       携带野生型CYP2C19的韩国患者与突变型的比例=4:6

       野生型组所需患者：15例突变型组所需患者：23例

       最终需要的病人（15+23）*2=76人

    2. 分析 连续变量以平均值±标准差表示，并使用未配对的学生 t 或 Mann-Whitney U 检验进行比较。 分类变量以数字或百分比表示，并使用卡方检验或 Fisher 精确检验（如果预期频率 < 5）进行比较。 通过 Friedman 的重复方差分析对 3 组的特征和血小板功能测量进行分析。 在通过 ANOVA 证明变量之间存在显着差异后，使用 Student-Newman-Keuls 程序对治疗对进行事后比较以进行多重比较。 p 值 < 0.05 被认为表明存在显着差异。 使用市售软件（SPSS 版本 13；SPSS Inc.，美国伊利诺伊州芝加哥市）进行统计分析。
    3. 数据调制 DSMB（数据安全监测委员会） CEC（临床事件委员会）