直肠乙状结肠炎患者治疗前后的共聚焦激光内镜检查结果

直肠乙状结肠炎患者治疗前后的共聚焦激光内镜检查结果

背景 炎症性肠病 (IBD) 包括克罗恩病和溃疡性结肠炎。 克罗恩病常侵袭末端回肠，但也可能从口腔到肛门发生。 它的特点是节段性扩散伴有透壁炎症，组织样本中偶尔会出现肉芽肿。 溃疡性结肠炎仅见于结肠，实际上总是累及直肠。 炎症局限于粘膜和粘膜下层，呈持续性扩散。

内窥镜检查的发展使这些程序成为胃肠道疾病（包括 IBD）患者诊断和治疗管理的核心部分。 整个胃肠道现在可用于检查和治疗。 这些研究的局限性在于，通常对患者的诊断和治疗至关重要的组织学不能始终通过常规检查进行精确评估。 检测到的病变的正确处理除了内窥镜评估外，还需要对所涉及的组织进行组织学评估，使组织样本成为获得明确诊断和最佳处理所必需的。 因此，在内窥镜检查过程中，必须从肠粘膜采集组织样本，这很少会给患者带来更大的风险，但会导致延迟，因为组织学分析的准备时间，在某些情况下甚至会因为重新检查而延迟组织病理学阴性。 在 IBD 的治疗中，严重程度和范围的内窥镜评估对于治疗的选择是绝对必要的。 最佳治疗的“金标准”称为“深度”缓解，定义为通过常规内窥镜检查评估的临床和内窥镜缓解。

近年来引入了一种新方法，其中在内窥镜手术期间可以在体内连续评估肠粘液的微观结构。 该技术称为共焦激光显微内窥镜检查 (CLE)。 CLE 通过插入或内置在内窥镜中的激光装置发挥作用，并用作小面积和精确深度衬里的照明器。 首先通过静脉内给组织添加荧光。 粘膜的反射在聚焦区域被捕获并放大，从而形成粘膜微观结构的二维图像。 这为我们提供了一种“光学活检”，可以将其与类似的显微图像进行比较。

这为我们提供了在同一过程中立即诊断和靶向治疗的潜在机会。 光学活检以数字方式存储，因此也可以在手术后进行评估。 在 CLE 期间，每秒生成多个帧，这些帧被连续存储，从而形成电影序列，从而使组织的微观评估变得动态，即可以观察到小血管中的流动。

目前关于 IBD 发病机制的假设是屏障功能缺陷可能是一个关键因素。 肠屏障由上皮细胞组成，它们通过所谓的“紧密连接”结合在一起。 实验研究表明，IBD 患者的肠道通透性增加，通透性程度是克罗恩病复发的预后指标。 在 CLE 研究中，体内屏障功能缺陷已被确定为荧光素通过肠壁流出，并证明与健康对照组相比，IBD 患者的屏障功能明显更大。 上皮细胞之间的间距也增加了。 在处于缓解期的患者中，屏障功能缺陷会导致疾病复发。 然而，不可能通过传统的组织学检查以及需要动态显微镜评估的其他参数来实现这种功能障碍。 通过实施 CLE，内窥镜评估的敏感性可能会增加，这不仅会改变“深度”缓解的特征，还会改变疾病活动性的评估。

CLE 目前是一个快速发展的领域，主要用于消化道内窥镜检查，但也用于泌尿道和呼吸道内窥镜检查。 CLE 已被证明可以在不影响诊断的情况下显着减少组织样本的数量。 此外，一些研究表明 CLE 有助于更准确的诊断，初步研究表明，与传统内窥镜检查相比，可以更好地估计疾病的程度。 然而，没有数据评估该方法在监测治疗反应和作为真正的预后工具方面的适用性。 CLE是一种新的方法，因此在该技术最终能够在日常实践中实施之前，还存在许多未解决的问题和需要澄清的地方。

有在内窥镜教授 Peter Vilmann 领导的研究小组中培养了几年在引入新方法方面的丰富经验。 这包括在国际层面开展相关研究以及收集和发布科学数据，以便该模式能够为患者的诊断和治疗找到合适的位置。

简介：常规结肠镜检查，由于敏感性不足，往往会低估或忽视急性炎症患者的炎症程度和扩散。 在溃疡性结肠炎中，疾病的进程，特别是治疗失败的风险与急性炎症的程度有关，除了临床和内窥镜观察外，还通过隐窝结构的变化和急性炎症细胞在椎板中的浸润来评估固有的。 疾病的传播对于治疗的选择也特别重要，根据炎症的近端边界，治疗从栓剂到灌肠剂再到全身性皮质类固醇依次变化。 采集组织样本可能会部分防止低估，但这是耗时、昂贵的，而且很少会导致治疗策略的根本改变，因为内窥镜检查是这种情况下的参考。 文献提出了两种基于 CLE 的炎症分类，我们部分地 - 首先，将用于估计治疗开始前后和对照组的疾病活动。 此外，个人观察将被记录和分析。 该评估随后将用于观察者内部和观察者之间的研究以及与急性炎症和组织样本程度相关的 CLE 观察结果的分层。

假设：CLE 可用于评估溃疡性结肠炎患者急性和慢性炎症的程度和范围以及治疗反应，是对常规诊断的敏感补充。

设计：在开始局部类固醇治疗前后对患者进行盲法前瞻性观察和方法研究，随后计算观察者内部和观察者之间的变异性。

方法：入组患者将在局部治疗开始前后分别接受常规结肠镜检查和 CLE 检查。 急性炎症的程度和分布将通过常规显微镜检查（Mayo 评分）、CLE（隐窝结构、微血管变化和固有层炎症细胞的存在以及屏障功能缺陷）和组织学活检进行评估。 预计将发现之前未描述的 CLE 发现，并且将如上所述记录和评估这些结果。

如上所述评估末端回肠和每个结肠段（盲肠、升结肠、横结肠、降结肠、乙状结肠和直肠）。 CLE 结果将根据以下等级进行分级分析：

隐窝结构：1：正常，2：形状、大小和分布改变，3：隐窝破坏和脓肿

微血管变化：1：正常，2：数量稍多，中度扩张，3：数量明显增加，大量扩张

炎性细胞浸润：1：无，2：存在 50% 的隐窝

屏障功能缺陷：1：正常，2：功能缺陷，3：结构缺陷

将计算组织学（“金标准”）、作为临床和内窥镜综合指标的梅奥评分与 CLE 之间的相关性。 这适用于作为对照组的两个 IBD 患者。 在初步研究之后计划进行观察者内部和观察者间的研究，其中 CLE 操作员彼此不知情。 病理学家对常规和 CLE 观察视而不见。 对 CLE 结果进行分层，以确定哪些记录的 CLE 参数与其他两种方法最相关，因此最适合以炎症为重点的进一步研究。 此外，还确定了 CLE 结果与个体患者治疗效果之间的关系。

统计方法：使用 Spearman 相关分析比较 CLE 结果与 Mayo 评分和组织学的关系。 为了评估治疗效果，使用 Wilcoxon 符号秩检验。 在观察者间和观察者内研究中，使用加权 kappa 统计。

患者：已对 3 名观察者对各个 CLE 参数的观察者间和观察者内研究进行了完整的样本量计算。 如果可能，要获得 0.9 的 kappa 值和 0.05 的置信区间，必须有 122 个观测值。 如果我们在两次内窥镜检查期间记录 Mayo 评分、CLE 参数并在所有上述肠段中采集组织样本进行病理学检查，则将记录每位患者的 14 个观察结果，随后将根据研究中使用的每个参数进行评估。 如果没有豁免，所有回结肠镜检查都已完成，所有 CLE 观察结果都可以分析，则只需要包括 9 名患者。 然而，假设如果仅获得预期观察结果的 25%，由于某些 CLE 观察结果将不令人满意，一些检查将被中断，并且一些患者将仅被评估一次。 因此，必须在研究中登记 36 名患者才能达到所需的强度，其中 10 名在对照组中。