巴西宫颈癌前体病变筛查中的 HRME（UH3 - 巴西） (UH3)

学习规划：

这是一项使用单臂、裸露、单中心、国际诊断设备进行的实验方法学研究。

大纲：

将在移动预防单位或固定单位招募 1,780 名在 Barretos 癌症医院（HCB，Barretos，巴西）筛查项目中进行子宫颈抹片检查 (ASCUS+) 或宫颈高危 HPV 检测呈阳性的女性转诊进行阴道镜检查诊断。 在阴道镜检查期间，HRME 设备将用于检查宫颈是否存在前驱病变。

预测试验证：

由于这项研究可能包括对有生育能力的妇女进行宫颈活检，出于安全原因，将验证这组妇女怀孕的可能性，因为在孕妇的宫颈进行活检会增加流产的风险。 这种验证将通过临床病史（月经延迟、怀孕迹象、避孕方法等）以及尿液中人绒毛膜促性腺激素的定性研究来进行。 该测试也被称为“快速妊娠测试”或“药房测试”，在巴西销售并获得“Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária”（ANVISA，巴西卫生监督局）授权的大量产品。 该测试的原理涉及单步免疫层析法来检测激素。 反应发生在试剂条上，其中沉积有少量尿液。 大约 2 分钟内提供测试结果。 怀孕（或疑似怀孕）的妇女将不包括在研究中，但将根据 HCB 宫颈变化孕妇的机构方案提交诊断调查。 这些妇女将接受医疗指导，并将被转介到专门的产科服务机构。

宫颈细胞学收集：

在进行诊断检查之前，医生将收集新的宫颈细胞学检查 (Papanicolaou)，这是阴道镜检查部门对每名子宫颈抹片检查改变或 HPV 检测呈阳性的女性进行的例行检查的一部分。 这些样本将保存在基于乙醇的防腐介质（SurePath™ 防腐液，Becton & Dickinson，美国）中，并将被送到 HCB 的病理学系，在那里它们将进行自动处理以制备细胞学载玻片。

诊断检查：

VIA 将使用 3-5% 的醋酸进行，应用于子宫颈和观察到的任何异常病变。 然后，将涂上碘溶液，并进行阴道镜检查。 需要说明的是，在标准阴道镜检查中常规使用醋酸和碘酒。

然后，将 Proflavine (0.01%) 涂抹在子宫颈表面。 HRME 将从 VIA 和/或阴道镜检查认为异常的所有区域捕获图像。 此外，将用 HRME 探测所有四个象限，以确保也观察到任何非醋酸白病变。 负责阴道镜检查的人员会记录您对每个区域（正常、良性、低度癌前病变、高度癌前病变或癌症）的病变和 HRME 图像的看法。 完整的 HRME 成像程序将使标准阴道镜检查增加 5-10 分钟。 与 VIA、阴道镜检查和 HRME 相关的观察结果将按象限记录。 通过 VIA 和/或阴道镜检查发现的任何异常区域都将进行活检。 如果未观察到异常区域，但该女性的细胞学检测结果发生改变或 HPV 检测呈阳性，则将从该区域的 HRME 成像捕获的表面正常区域进行宫颈微活检。 对于所有宫颈活检，将使用特殊的镊子，以尽量减少组织创伤（显微活检）并减少参与者的不适。 这些镊子不同于阴道镜检查中常用的镊子，后者通常进行大面积活检，给女性带来更多不适。

两位经验丰富的 HCB 病理学家将忽略所有研究结果，审查组织学并根据标准化标准将区域分类为正常、宫颈上皮内瘤变 1 级 (CIN 1)、CIN 2、CIN 3、原位腺癌 (AIS) 或癌症。 相互矛盾的结果将通过病理学家之间的共识审查来解决。

高危 HPV 筛查和基因分型：

高风险 HPV 筛查将对尚未提交此测试的女性在阴道镜检查前收集的宫颈细胞学样本 (SurePath™) 等分试样进行。 HPV检测将在Cobas X480™设备（美国Roche Molecular Systems）上进行，该设备可在Barretos癌症医院-Pio XII Institution的分子肿瘤学研究中心的技术园获得。 将按照制造商的描述执行测试协议。

COBAS 系统是一种自动扩增设备（通过实时聚合酶链反应 (PCR)），用于检测 14 种高危 HPV 类型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、 58、59、66 和 68)，最多可同时处理 94 个样品。 由于 COBAS 系统不提供这些高风险 HPV 的基因分型，因此检测到高风险非 16 和非 18 HPV 的测试将提交补充分析以使用线性阵列技术识别基因型。 为此，将使用用于 HPV 基因分型试剂盒（Roche Molecular Systems，美国）的线性阵列 HPV 基因分型 (CE-IVD) 测试。

数据分析：

主要终点是CIN2+和CIN3+的诊断率。 假定诊断为 CIN2 + 或 CIN3 + 的病变为阳性，将计算基于每个病变和每个使用组织学诊断作为金标准的患者的 VIA、阴道镜检查和 HRME 的敏感性和诊断特异性。 VIA 和阴道镜检查的敏感性和特异性也将作为比较方法进行计算。

将使用描述性统计进行个案描述。 分类变量将通过卡方检验或 Fisher 精确检验进行比较，具体取决于列联表中的预期值。 为了比较数值变量，将使用 t 检验或 Mann-Whitney 检验，具体取决于对正态性的遵守情况（由 Kolmogorov-Smirnov 检验验证）。

样本量计算：

样本计算基于同一组其他研究的信息（包括尚未发表的数据）。 采用以下前提：HRME 对 CIN2+ 诊断的敏感性和特异性（每个活检区域分别为 93% 和 48%）以及 HCB 阴道镜检查门诊中 CIN2+ 的患病率（范围从 20% 到 30%）。 考虑到 25% 的患病率，估计需要包括 1,424 名女性（敏感性计算 625 例，特异性计算 799 例）才能达到预期的敏感性和特异性率，最大误差为 4 % 为 95% 的置信区间。 考虑到估计有 10-15% 的损失（未参加阴道镜检查和 HRME），校正后的样本估计范围为 1,566 至 1,637 名女性。 因此，该研究拟纳入 1,600 名宫颈细胞学异常或 HPV 检测阳性的女性。 此外，将邀请一组宫颈细胞学和 HPV 检测无变化的女性参与研究，以检查验证偏差。 当仅选择筛选中的阳性病例进行辅助诊断检查时，会高估敏感性并低估特异性，从而出现这种偏差。 建议根据标准黄金检查验证一定比例的阴性病例。 因此，10% 的研究人群将由宫颈细胞学和 HPV 检测均为阴性的病例组成，相当于近 180 个病例。 因此，最终样本估计为 1,780 名女性，其中 1,600 名女性的筛查结果（细胞学改变或 HPV 检测阳性）报告为阳性，180 名女性的筛查结果报告为阴性（细胞学检测和 HPV 检测阴性）。

学习时间表：

该研究将持续3年。