HRME i screening av livmorhalskreftforløperlesjoner i Brasil (UH3 - Brasil) (UH3)

STUDERE DESIGN:

Dette er en eksperimentell metodologisk studie med en enarms, demaskert, unsentrisk, internasjonal diagnostisk enhet.

OVERSIKT:

1780 kvinner med unormale celleprøver (ASCUS+) eller positiv høyrisiko HPV-test i livmorhalsen utført i screeningprogrammet for Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brasil) vil bli rekruttert, enten ved Mobile Prevention Units eller Fixed Units, som har vært henvist til diagnostisk utredning med kolposkopi. Under kolposkopiundersøkelsen vil HRME-apparatet bli brukt til å kontrollere tilstedeværelsen av prekursorlesjoner i livmorhalsen.

VERIFIKASJON FØR TEST:

Siden denne forskningen kan omfatte livmorhalsbiopsi hos kvinner med fertilitet, av sikkerhetsmessige årsaker, vil muligheten for graviditet hos denne gruppen kvinner verifiseres, siden biopsi utført i livmorhalsen til gravide øker risikoen for abort. Denne verifiseringen vil bli utført ved hjelp av klinisk historie (menstruasjonsforsinkelse, tegn som tyder på graviditet, prevensjonsmetoder, etc.) og også ved hjelp av kvalitativ forskning på humant koriongonadotropin i urin. Denne testen er også kjent som "rask graviditetstest" eller "apotektest", med en omfattende liste over produkter som selges i Brasil og autorisert av "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, Brazilian Agency of Health Surveillance). Prinsippet for testen innebærer en enkelttrinns immunokromatografisk metode for å oppdage hormonet. Reaksjonen skjer på en reagensstrimmel, hvor en liten mengde urin avsettes. Testresultatet leveres om ca. 2 minutter. Kvinner som er gravide (eller mistenkes å være gravide) vil ikke bli inkludert i studien, men vil bli underkastet diagnostisk utredning i henhold til institusjonsprotokollen for gravide med endringer i livmorhalsen ved HCB. Disse kvinnene vil få medisinsk orientering og vil bli henvist til en spesialisert fødselstjeneste.

SAMLING AV CERVIKAL CYTOLOGI:

Før de diagnostiske undersøkelsene utføres, vil legen samle inn en ny cervikal cytologi (Papanicolaou), som er en del av rutinen til Kolposkopiavdelingen for hver kvinne som har endret celleprøve eller positiv HPV-test. Disse prøvene vil bli konservert i et etanolbasert konserveringsmedium (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) og vil bli sendt til Department of Pathology of HCB hvor de vil gjennomgå en automatisert prosessering for klargjøring av cytologiglass.

DIAGNOSTISKE UNDERSØKELSER:

VIA vil bli utført med 3-5 % eddiksyre, påført på livmorhalsen og på eventuelle observerte unormale lesjoner. Deretter vil jodløsning påføres, og kolposkopi vil bli utført. Det er nødvendig å klargjøre at påføring av eddiksyre og jod rutinemessig utføres under en standard kolposkopiundersøkelse.

Deretter vil Proflavine (0,01%) påføres overflaten av livmorhalsen. HRME vil ta bilder fra alle områder som anses som unormale ved VIA og/eller kolposkopi. I tillegg vil alle fire kvadrantene bli undersøkt med HRME for å sikre at eventuelle ikke-acetowhite lesjoner også blir observert. Personen som er ansvarlig for kolposkopien vil legge merke til din mening om lesjonen og HRME-bildet i hvert område (normal, godartet, lavgradig precancerøs, høygradig precancerøs eller kreft). Den komplette HRME-bildeprosedyren vil legge til 5-10 minutter til standard kolposkopiundersøkelse. Observasjoner knyttet til VIA, kolposkopi og HRME vil bli registrert i kvadrant. Eventuelle unormale områder oppdaget ved VIA og/eller kolposkopi vil gjennomgå en biopsi. Hvis det ikke observeres noe unormalt område, men kvinnen har en endret cytologitest eller en positiv HPV-test, vil en cervikal mikrobiopsi bli tatt fra et tilsynelatende normalt område fanget ved HRME-avbildning av det området. For alle livmorhalsbiopsier vil en spesiell pinsett brukes, som forårsaker minimalt med vevstraumer (mikrobiopsi) og reduserer ubehag hos deltakerne. Disse pinsettene er forskjellige fra de som vanligvis brukes i kolposkopi-tester, som vanligvis utfører biopsier på store områder og gir mer ubehag for kvinner.

To erfarne HCB-patologer, som ignorerer alle studieresultater, vil gjennomgå histologi og klassifisere områder som normale, cervikal intraepitelial neoplasi grad 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenokarsinom in situ (AIS) eller kreft i henhold til standardiserte kriterier. Motstridende resultater vil bli løst ved hjelp av konsensusgjennomgang blant patologer.

HØYRISIKO HPV-SCREENING OG GENOTYPING:

Høyrisiko HPV-screening vil bli utført på alikvoter av livmorhalscytologiprøver (SurePath™) tatt rett før kolposkopi hos kvinner som ikke har blitt underkastet denne testen ennå. HPV-test vil bli utført på en Cobas X480™-enhet (Roche Molecular Systems, USA), som er tilgjengelig i teknologiparken til Molecular Oncology Research Center ved Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution. Testprotokollen vil bli utført som beskrevet av produsenten.

COBAS-systemet er en automatisert amplifikasjonsenhet (ved hjelp av sanntids polymerasekjedereaksjon (PCR)) for påvisning av 14 høyrisiko HPV-typer (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 og 68), og kan behandle opptil 94 samtidige prøver. Tester som oppdaget høyrisiko ikke-16 og ikke-18 HPV vil bli underkastet komplementær analyse for å identifisere genotype(r) ved bruk av linear array-teknikken, siden COBAS-systemet ikke gir genotyping av disse høyrisiko HPVene. For dette formålet vil lineær array HPV genotyping (CE-IVD) Test for HPV genotyping kit (Roche Molecular Systems, USA) bli brukt.

DATAANALYSE:

Det primære endepunktet er diagnosefrekvensen CIN2+ og CIN3+. Sensitivitet og diagnostisk spesifisitet av VIA, kolposkopi og HRME basert på hver lesjon og hver pasient som bruker histologisk diagnose som gullstandard vil bli beregnet forutsatt at lesjoner diagnostisert som CIN2 + eller CIN3 + er positive. Sensitivitet og spesifisitet av VIA og kolposkopi vil også bli beregnet som sammenligningsmetode.

En beskrivelse fra sak til sak vil bli laget ved hjelp av beskrivende statistikk. Kategoriske variabler vil sammenlignes ved hjelp av kjikvadrattesten eller Fishers eksakte test, avhengig av forventede verdier i beredskapstabellene. For å sammenligne numeriske variabler vil t-testene eller Mann-Whitney-testen bli brukt avhengig av overholdelse av normalitet (skal verifiseres av Kolmogorov-Smirnov-testen).

BEREGNING AV PRØVESTØRRELSE:

Prøveberegningen var basert på informasjon fra andre studier av samme gruppe (inkludert data som ennå ikke er publisert). Følgende premisser ble lagt til grunn: HRME-sensitivitet og spesifisitet for CIN2+-diagnose (henholdsvis 93 % og 48 % per biopsiområde) og prevalens av CIN2+ i kolposkopiklinikken til HCB (fra 20 til 30 %). Tatt i betraktning en prevalens av sykdom på 25 %, er det anslått at det vil være nødvendig å inkludere 1 424 kvinner (625 tilfeller for sensitivitetsberegning og 799 tilfeller for spesifisitetsberegning) for å nå de forventede sensitivitets- og spesifisitetsratene med en maksimal feilmargin på 4 % for et 95 % konfidensintervall. Tatt i betraktning et estimert tap på 10-15 % (ikke oppmøte for kolposkopiundersøkelse og HRME), vil det korrigerte prøveestimatet variere fra 1 566 til 1 637 kvinner. Derfor har studien til hensikt å inkludere 1600 kvinner med unormal cervikal cytologi eller positiv HPV-test. I tillegg vil en gruppe kvinner uten endring i cervikal cytologi og HPV-test bli invitert til å delta i forskningen for å sjekke verifikasjonsskjevhet. Denne skjevheten oppstår når kun de positive tilfellene i screeningen velges for å utføre komplementære diagnostiske undersøkelser, overvurderer sensitiviteten og undervurderer spesifisiteten. Det anbefales at en prosentandel av negative tilfeller verifiseres i henhold til standard gullundersøkelse. Derfor vil 10 % av studiepopulasjonen bestå av negative tilfeller i både cervikal cytologi og HPV-testen, noe som tilsvarer nærmere 180 tilfeller. Dermed vil det endelige prøveestimatet være på 1 780 kvinner, hvorav 1 600 kvinner vil få screeningsresultater (endret cytologi eller positiv HPV-test) rapportert som positive og 180 vil få screeningsresultater rapportert som negative (negativ cytologi og HPV-test).

STUDIEPLAN:

Studiet vil vare i 3 år.