HRME bij de screening van voorlopers van baarmoederhalskanker in Brazilië (UH3 - Brazilië) (UH3)

STUDIE ONTWERP:

Dit is een experimentele methodologische studie met een eenarmig, ongemaskeerd, unicentrisch, internationaal diagnostisch apparaat.

OVERZICHT:

1.780 vrouwen met abnormale Pap-uitstrijkjes (ASCUS+) of een positieve hoog-risico HPV-test in de cervix, uitgevoerd in het Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brazilië) screeningprogramma zullen worden aangeworven, hetzij op mobiele preventie-eenheden of vaste eenheden, die zijn verwezen voor diagnostisch onderzoek met colposcopie. Tijdens het colposcopieonderzoek wordt het HRME-apparaat gebruikt om de aanwezigheid van voorloperlaesies in de baarmoederhals te controleren.

VERIFICATIE VOOR HET TESTEN:

Aangezien dit onderzoek mogelijk cervicale biopsie bij vrouwen met vruchtbaarheid omvat, zal om veiligheidsredenen de mogelijkheid van zwangerschap bij deze groep vrouwen worden geverifieerd, aangezien biopsie uitgevoerd in de baarmoederhals van zwangere vrouwen het risico op abortus verhoogt. Deze verificatie zal gebeuren aan de hand van de klinische anamnese (menstruatievertraging, tekenen die wijzen op zwangerschap, anticonceptiemethoden, enz.) en ook aan de hand van kwalitatief onderzoek naar humaan choriongonadotrofine in de urine. Deze test staat ook bekend als "snelle zwangerschapstest" of "apotheektest", met een uitgebreide lijst van producten die in Brazilië worden verkocht en zijn goedgekeurd door "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, Braziliaans Agentschap voor Gezondheidstoezicht). Het principe van de test omvat een immunochromatografische methode in één stap om het hormoon te detecteren. De reactie vindt plaats op een reagensstrip, waar een kleine hoeveelheid urine wordt afgezet. Het testresultaat wordt binnen ongeveer 2 minuten geleverd. Vrouwen die zwanger zijn (of vermoeden dat ze zwanger zijn) zullen niet worden opgenomen in het onderzoek, maar zullen worden onderworpen aan diagnostisch onderzoek volgens het instellingsprotocol voor zwangere vrouwen met veranderingen in de baarmoederhals bij HCB. Deze vrouwen krijgen een medische oriëntatie en worden doorverwezen naar een gespecialiseerde verloskundige dienst.

COLLECTIE VAN CERVICALE CYTOLOGIE:

Voordat de diagnostische onderzoeken worden uitgevoerd, zal de arts een nieuwe cervicale cytologie (Papanicolaou) verzamelen, wat deel uitmaakt van de routine van de afdeling colposcopie voor elke vrouw met een gewijzigd uitstrijkje of een positieve HPV-test. Deze monsters worden bewaard in een op ethanol gebaseerd conserveringsmedium (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, VS) en worden naar de afdeling Pathologie van HCB gestuurd, waar ze een geautomatiseerde verwerking ondergaan voor de voorbereiding van cytologieglaasjes.

DIAGNOSTISCHE ONDERZOEKEN:

VIA wordt uitgevoerd met 3-5% azijnzuur, aangebracht op de baarmoederhals en op eventuele abnormale laesies. Vervolgens wordt een jodiumoplossing aangebracht en wordt de colposcopie uitgevoerd. Het is noodzakelijk om te verduidelijken dat de toepassing van azijnzuur en jodium routinematig wordt uitgevoerd tijdens een standaard colposcopieonderzoek.

Vervolgens wordt Proflavine (0,01%) aangebracht op het oppervlak van de baarmoederhals. HRME zal beelden vastleggen van alle gebieden die door VIA en/of colposcopie als abnormaal worden beschouwd. Bovendien zullen alle vier de kwadranten worden gesondeerd met HRME om ervoor te zorgen dat eventuele niet-acetowitte laesies ook worden waargenomen. De persoon die verantwoordelijk is voor de colposcopie zal nota nemen van uw mening over de laesie en het HRME-beeld in elk gebied (normaal, goedaardig, laaggradig precancereus, hooggradig precancereus of kanker). De volledige HRME-beeldvormingsprocedure voegt 5-10 minuten toe aan het standaard colposcopieonderzoek. Observaties met betrekking tot VIA, colposcopie en HRME worden per kwadrant geregistreerd. Alle abnormale gebieden die worden gedetecteerd door VIA en / of colposcopie zullen een biopsie ondergaan. Als er geen abnormaal gebied wordt waargenomen, maar de vrouw een gewijzigde cytologietest of een positieve HPV-test heeft, zal een cervicale microbiopsie worden verkregen uit een ogenschijnlijk normaal gebied dat is vastgelegd door HRME-beeldvorming van dat gebied. Voor alle cervicale biopsieën wordt een speciaal pincet gebruikt, waardoor minimaal weefseltrauma (microbiopsie) wordt veroorzaakt en het ongemak voor de deelnemer wordt verminderd. Deze pincetten verschillen van de pincetten die gewoonlijk worden gebruikt bij colposcopietests, die meestal biopsieën uitvoeren op grote gebieden en vrouwen meer ongemak bezorgen.

Twee ervaren HCB-pathologen, die alle onderzoeksresultaten negeren, zullen histologie beoordelen en gebieden classificeren als normaal, cervicale intra-epitheliale neoplasie graad 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenocarcinoom in situ (AIS) of kanker volgens gestandaardiseerde criteria. Tegenstrijdige resultaten zullen worden opgelost door middel van consensusonderzoek onder pathologen.

HOOG-RISICO HPV-SCREENING EN GENOTYPING:

Hoog-risico HPV-screening zal worden uitgevoerd op aliquots van cervicale cytologiemonsters (SurePath™) die vlak voor de colposcopie zijn verzameld bij vrouwen die nog niet aan deze test zijn onderworpen. HPV-test zal worden uitgevoerd op een Cobas X480 ™ -apparaat (Roche Molecular Systems, VS), dat beschikbaar is in het technologiepark van het Molecular Oncology Research Center van Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution. Het testprotocol wordt uitgevoerd zoals beschreven door de fabrikant.

Het COBAS-systeem is een geautomatiseerd amplificatieapparaat (door middel van real-time polymerasekettingreactie (PCR)) voor de detectie van 14 hoog-risico HPV-types (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 en 68), en kan tot 94 gelijktijdige monsters verwerken. Tests die niet-16 en niet-18 HPV met hoog risico detecteren, zullen worden onderworpen aan aanvullende analyse om genotype(s) te identificeren met behulp van de lineaire array-techniek, aangezien het COBAS-systeem geen genotypering van deze HPV's met hoog risico biedt. Hiervoor zal een lineaire array HPV genotypering (CE-IVD) test voor HPV Genotypering kit (Roche Molecular Systems, VS) worden gebruikt.

GEGEVENSANALYSE:

Het primaire eindpunt is het aantal diagnoses van CIN2+ en CIN3+. Gevoeligheid en diagnostische specificiteit van VIA, colposcopie en HRME op basis van elke laesie en elke patiënt die histologische diagnose als gouden standaard gebruikt, wordt berekend ervan uitgaande dat laesies die zijn gediagnosticeerd als CIN2+ of CIN3+ positief zijn. Gevoeligheid en specificiteit van VIA en colposcopie zullen ook worden berekend als vergelijkingsmethode.

Aan de hand van beschrijvende statistiek zal een case-by-case beschrijving worden gemaakt. Categorische variabelen zullen worden vergeleken door middel van de chi-kwadraattoets of Fisher's exact toets, afhankelijk van de verwachte waarden in de contingentietabellen. Om numerieke variabelen te vergelijken, zullen de t-tests of de Mann-Whitney-test worden gebruikt, afhankelijk van de naleving van normaliteit (te verifiëren door de Kolmogorov-Smirnov-test).

STEEKPROEFGROOTTE BEREKENING:

De steekproefberekening was gebaseerd op informatie uit andere onderzoeken van dezelfde groep (inclusief gegevens die nog niet zijn gepubliceerd). De volgende uitgangspunten werden genomen: HRME-sensitiviteit en specificiteit voor CIN2+-diagnose (respectievelijk 93% en 48% per biopsiegebied) en prevalentie van CIN2+ in de colposcopiekliniek van HCB (variërend van 20 tot 30%). Uitgaande van een ziekteprevalentie van 25%, wordt geschat dat het nodig zal zijn om 1.424 vrouwen op te nemen (625 gevallen voor sensitiviteitsberekening en 799 gevallen voor specificiteitsberekening) om de verwachte sensitiviteits- en specificiteitspercentages te bereiken met een maximale foutmarge van 4 % voor een betrouwbaarheidsinterval van 95%. Rekening houdend met een geschat verlies van 10-15% (afwezigheid voor colposcopieonderzoek en HRME), zal de gecorrigeerde steekproefschatting variëren van 1.566 tot 1.637 vrouwen. Daarom is het de bedoeling dat de studie 1.600 vrouwen met abnormale cervicale cytologie of een positieve HPV-test omvat. Bovendien zal een groep vrouwen zonder verandering in cervicale cytologie en HPV-test worden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek om verificatiebias te controleren. Deze vertekening treedt op wanneer alleen de positieve gevallen in de screening worden geselecteerd om aanvullend diagnostisch onderzoek uit te voeren, waarbij de sensitiviteit wordt overschat en de specificiteit wordt onderschat. Het wordt aanbevolen om een ​​percentage van de negatieve gevallen te verifiëren volgens het standaard goudonderzoek. Daarom zal 10% van de onderzoekspopulatie bestaan ​​uit negatieve gevallen in zowel cervicale cytologie als de HPV-test, wat overeenkomt met bijna 180 gevallen. De uiteindelijke steekproefschatting zal dus 1.780 vrouwen zijn, van wie bij 1.600 vrouwen de screeningresultaten (veranderde cytologie of positieve HPV-test) als positief worden gerapporteerd en bij 180 vrouwen de screeningresultaten als negatief worden gerapporteerd (negatieve cytologie en HPV-test).

STUDIESCHEMA:

De studie zal 3 jaar duren.