HRME dans le dépistage des lésions précurseurs du cancer du col de l'utérus au Brésil (UH3 - Brésil) (UH3)

ÉTUDIER LE DESIGN:

Il s'agit d'une étude méthodologique expérimentale avec un dispositif de diagnostic international à un seul bras, non masqué, unicentrique.

GRANDES LIGNES:

1 780 femmes avec des frottis Pap anormaux (ASCUS +) ou un test HPV à haut risque positif dans le col de l'utérus effectué dans le programme de dépistage du Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brésil) seront recrutées, soit dans des unités mobiles de prévention, soit dans des unités fixes, qui ont été référé pour un examen diagnostique avec colposcopie. Lors de l'examen colposcopie, le dispositif HRME sera utilisé pour vérifier la présence de lésions précurseurs dans le col de l'utérus.

VÉRIFICATION PRÉ-TEST :

Comme cette recherche peut inclure une biopsie cervicale chez les femmes fertiles, pour des raisons de sécurité, la possibilité d'une grossesse dans ce groupe de femmes sera vérifiée, car la biopsie réalisée dans le col de la femme enceinte augmente le risque d'avortement. Cette vérification sera effectuée au moyen d'antécédents cliniques (retard menstruel, signes suggérant une grossesse, méthodes contraceptives, etc.) et également au moyen d'une recherche qualitative sur la gonadotrophine chorionique humaine dans les urines. Ce test est également connu sous le nom de "test de grossesse rapide" ou "test de pharmacie", avec une longue liste de produits vendus au Brésil et autorisés par "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, Agence brésilienne de surveillance de la santé). Le principe du test implique une méthode immunochromatographique en une seule étape pour détecter l'hormone. La réaction se produit sur une bandelette réactive, où une petite quantité d'urine est déposée. Le résultat du test est fourni en 2 minutes environ. Les femmes enceintes (ou suspectées d'être enceintes) ne seront pas incluses dans l'étude, mais seront soumises à une enquête diagnostique selon le protocole institutionnel pour les femmes enceintes présentant des modifications du col de l'utérus à HCB. Ces femmes recevront une orientation médicale et seront dirigées vers un service d'obstétrique spécialisé.

COLLECTE DE CYTOLOGIE CERVICALE :

Avant que les examens diagnostiques ne soient effectués, le médecin prélèvera une nouvelle cytologie cervicale (Papanicolaou), qui fait partie de la routine du service de colposcopie pour chaque femme qui a un test Pap altéré ou un test HPV positif. Ces échantillons seront conservés dans un milieu conservateur à base d'éthanol (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) et seront envoyés au Département de Pathologie du HCB où ils subiront un traitement automatisé pour la préparation de lames de cytologie.

EXAMENS DIAGNOSTIQUE :

L'IVA sera réalisée à l'aide d'acide acétique à 3-5 %, appliqué sur le col de l'utérus et sur toute lésion anormale observée. Ensuite, une solution d'iode sera appliquée et la colposcopie sera effectuée. Il est nécessaire de préciser que l'application d'acide acétique et d'iode est effectuée systématiquement lors d'un examen colposcopie standard.

Ensuite, la Proflavine (0,01%) sera appliquée à la surface du col de l'utérus. HRME capturera des images de toutes les zones considérées comme anormales par VIA et/ou colposcopie. De plus, les quatre quadrants seront sondés avec HRME pour s'assurer que toutes les lésions non acétoblanches sont également observées. La personne responsable de la colposcopie prendra note de votre avis sur la lésion et l'image HRME à chaque zone (normale, bénigne, précancéreuse de bas grade, précancéreuse de haut grade ou cancéreuse). La procédure d'imagerie HRME complète ajoutera 5 à 10 minutes à l'examen colposcopie standard. Les observations liées à l'IVA, à la colposcopie et à l'EMRH seront enregistrées par quadrant. Toute zone anormale détectée par VIA et/ou colposcopie fera l'objet d'une biopsie. Si aucune zone anormale n'est observée, mais que la femme a un test cytologique altéré ou un test HPV positif, une microbiopsie cervicale sera obtenue à partir d'une zone apparemment normale capturée par l'imagerie HRME de cette zone. Pour toutes les biopsies cervicales, des pincettes spéciales seront utilisées, causant un traumatisme tissulaire minimal (microbiopsie) et réduisant l'inconfort des participants. Ces pincettes sont différentes de celles couramment utilisées dans les tests de colposcopie, qui effectuent généralement des biopsies sur de grandes surfaces et apportent plus d'inconfort aux femmes.

Deux pathologistes HCB expérimentés, ignorant tous les résultats de l'étude, examineront l'histologie et classeront les zones comme normales, néoplasie cervicale intraépithéliale de grade 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adénocarcinome in situ (AIS) ou cancer selon des critères standardisés. Les résultats contradictoires seront résolus au moyen d'un examen consensuel entre les pathologistes.

DÉPISTAGE ET GÉNOTYPAGE HPV À HAUT RISQUE :

Le dépistage du VPH à haut risque sera effectué sur des aliquotes d'échantillons de cytologie cervicale (SurePath™) prélevés juste avant la colposcopie chez les femmes qui n'ont pas encore été soumises à ce test. Le test HPV sera effectué sur un appareil Cobas X480 ™ (Roche Molecular Systems, États-Unis), disponible dans le parc technologique du Centre de recherche en oncologie moléculaire du Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution. Le protocole de test sera effectué tel que décrit par le fabricant.

Le système COBAS est un dispositif d'amplification automatisé (au moyen d'une réaction en chaîne par polymérase en temps réel (PCR)) pour la détection de 14 types de VPH à haut risque (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 et 68), et peut traiter jusqu'à 94 échantillons simultanés. Les tests qui ont détecté des HPV non-16 et non-18 à haut risque seront soumis à une analyse complémentaire pour identifier le(s) génotype(s) à l'aide de la technique des réseaux linéaires, car le système COBAS ne fournit pas le génotypage de ces HPV à haut risque. À cette fin, le test de génotypage HPV à réseau linéaire (CE-IVD) pour le kit de génotypage HPV (Roche Molecular Systems, États-Unis) sera utilisé.

L'ANALYSE DES DONNÉES:

Le critère principal est le taux de diagnostic de CIN2+ et CIN3+. La sensibilité et la spécificité diagnostique de l'IVA, de la colposcopie et de l'EMRH en fonction de chaque lésion et de chaque patient utilisant le diagnostic histologique comme étalon-or seront calculées en supposant que les lésions diagnostiquées comme CIN2 + ou CIN3 + sont positives. La sensibilité et la spécificité de l'IVA et de la colposcopie seront également calculées comme méthode de comparaison.

Une description au cas par cas sera faite à l'aide de statistiques descriptives. Les variables catégorielles seront comparées au moyen du test du chi carré ou du test exact de Fisher, selon les valeurs attendues dans les tableaux de contingence. Pour comparer les variables numériques, les tests t ou le test de Mann-Whitney seront utilisés selon le respect de la normalité (à vérifier par le test de Kolmogorov-Smirnov).

CALCUL DE LA TAILLE DE L'ÉCHANTILLON :

Le calcul de l'échantillon était basé sur des informations provenant d'autres études du même groupe (y compris des données non encore publiées). Les prémisses suivantes ont été prises : sensibilité et spécificité de l'HRME pour le diagnostic de CIN2+ (93 % et 48 %, respectivement, par zone de biopsie) et prévalence de CIN2+ dans la clinique de colposcopie du HCB (allant de 20 à 30 %). Considérant une prévalence de la maladie de 25%, on estime qu'il faudra inclure 1 424 femmes (625 cas pour le calcul de sensibilité et 799 cas pour le calcul de spécificité) pour atteindre les taux de sensibilité et de spécificité attendus avec une marge d'erreur maximale de 4 % pour un intervalle de confiance à 95 %. Compte tenu d'une perte estimée de 10 à 15 % (absence de colposcopie et HRME), l'estimation corrigée de l'échantillon ira de 1 566 à 1 637 femmes. Par conséquent, l'étude vise à inclure 1 600 femmes présentant une cytologie cervicale anormale ou un test HPV positif. De plus, un groupe de femmes sans changement dans la cytologie cervicale et le test HPV sera invité à participer à la recherche afin de vérifier le biais de vérification. Ce biais se produit lorsque seuls les cas positifs au dépistage sont sélectionnés pour effectuer des examens diagnostiques complémentaires, surestimant la sensibilité et sous-estimant la spécificité. Il est recommandé qu'un pourcentage de cas négatifs soit vérifié selon l'examen d'or standard. Ainsi, 10% de la population étudiée sera constituée de cas négatifs à la fois à la cytologie cervicale et au test HPV, ce qui correspond à près de 180 cas. Ainsi, l'estimation finale de l'échantillon sera de 1 780 femmes, dont 1 600 femmes auront des résultats de dépistage (cytologie altérée ou test HPV positif) déclarés positifs et 180 auront des résultats de dépistage déclarés négatifs (cytologie et test HPV négatifs).

CALENDRIER DES ETUDES :

L'étude durera 3 ans.