HRME i screening af livmoderhalskræftprækursorlæsioner i Brasilien (UH3 - Brasilien) (UH3)

STUDERE DESIGN:

Dette er et eksperimentelt metodologisk studie med en enarmet, umaskeret, unicentrisk, international diagnostisk enhed.

SKITTER:

1.780 kvinder med unormale Pap Smears (ASCUS+) eller positiv højrisiko HPV-test i livmoderhalsen udført i Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brasilien) screeningprogram vil blive rekrutteret, enten ved Mobile Prevention Units eller Fixed Units, som har været henvist til diagnostisk udredning med kolposkopi. Under kolposkopi-undersøgelsen vil HRME-apparatet blive brugt til at kontrollere tilstedeværelsen af ​​prækursorlæsioner i livmoderhalsen.

VERIFIKATION FORTEST:

Da denne forskning kan omfatte livmoderhalsbiopsi hos kvinder med fertilitet, vil muligheden for graviditet af sikkerhedsmæssige årsager blive verificeret hos denne gruppe kvinder, da biopsi udført i livmoderhalsen hos gravide øger risikoen for abort. Denne verifikation vil blive udført ved hjælp af klinisk historie (menstruationsforsinkelse, tegn på graviditet, svangerskabsforebyggende metoder osv.) og også ved hjælp af kvalitativ forskning om humant choriongonadotropin i urin. Denne test er også kendt som "hurtig graviditetstest" eller "apotekstest", med en omfattende liste over produkter, der sælges i Brasilien og er godkendt af "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, det brasilianske sundhedsovervågningsagentur). Princippet for testen involverer en enkelttrins immunokromatografisk metode til at påvise hormonet. Reaktion sker på en reagensstrimmel, hvor en lille mængde urin aflejres. Testresultatet leveres på cirka 2 minutter. Kvinder, der er gravide (eller mistænkes for at være gravide), vil ikke indgå i undersøgelsen, men vil blive underkastet diagnostisk udredning i henhold til institutionsprotokol for gravide kvinder med forandringer i livmoderhalsen på HCB. Disse kvinder vil modtage medicinsk orientering og vil blive henvist til en specialiseret obstetrisk tjeneste.

INDSAMLING AF CERVIKAL CYTOLOGI:

Inden de diagnostiske undersøgelser udføres, vil lægen indsamle en ny cervikal cytologi (Papanicolaou), som er en del af rutinen på Kolposkopiafdelingen for hver kvinde, der har en ændret celleprøve eller positiv HPV-test. Disse prøver vil blive konserveret i et ethanol-baseret konserveringsmedium (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) og vil blive sendt til Department of Pathology of HCB, hvor de vil gennemgå en automatiseret behandling til klargøring af cytologiglas.

DIAGNOSTISKE UNDERSØGELSER:

VIA vil blive udført med 3-5 % eddikesyre, påført på livmoderhalsen og på eventuelle observerede unormale læsioner. Derefter påføres jodopløsning, og kolposkopien udføres. Det er nødvendigt at præcisere, at påføring af eddikesyre og jod rutinemæssigt udføres under en standard kolposkopiundersøgelse.

Derefter påføres Proflavine (0,01%) på overfladen af ​​livmoderhalsen. HRME vil optage billeder fra alle områder, der anses for unormale ved VIA og/eller kolposkopi. Derudover vil alle fire kvadranter blive sonderet med HRME for at sikre, at eventuelle ikke-acetowhite læsioner også observeres. Den person, der er ansvarlig for kolposkopien, vil notere dig din mening om læsionen og HRME-billedet i hvert område (normalt, godartet, lavgradigt præcancerøst, højgradigt præcancerøst eller cancer). Den komplette HRME billeddannelsesprocedure vil tilføje 5-10 minutter til standard kolposkopiundersøgelsen. Observationer relateret til VIA, kolposkopi og HRME vil blive registreret i kvadrant. Eventuelle unormale områder påvist ved VIA og/eller kolposkopi vil gennemgå en biopsi. Hvis der ikke observeres noget unormalt område, men kvinden har en ændret cytologitest eller en positiv HPV-test, vil der blive udtaget en cervikal mikrobiopsi fra et tilsyneladende normalt område opfanget af HRME-billeddannelse af dette område. Til alle livmoderhalsbiopsier vil der blive brugt en speciel pincet, der forårsager minimalt vævstraume (mikrobiopsi) og reducerer deltagernes ubehag. Disse pincet er forskellige fra dem, der almindeligvis bruges i kolposkopi-tests, som normalt udfører biopsier på store områder og giver kvinder mere ubehag.

To erfarne HCB-patologer, der ignorerer alle undersøgelsesresultater, vil gennemgå histologi og klassificere områder som normale, cervikal intraepitelial neoplasi grad 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenocarcinoma in situ (AIS) eller cancer i henhold til standardiserede kriterier. Modstridende resultater vil blive løst ved hjælp af konsensusgennemgang blandt patologer.

HØJ-RISIKO HPV-SCREENING OG GENOTYPING:

Højrisiko HPV-screening vil blive udført på aliquoter af cervikale cytologiprøver (SurePath™) indsamlet lige før kolposkopi hos kvinder, som endnu ikke er blevet underkastet denne test. HPV-test vil blive udført på en Cobas X480™-enhed (Roche Molecular Systems, USA), som er tilgængelig i teknologiparken ved Molecular Oncology Research Center of Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution. Testprotokollen udføres som beskrevet af producenten.

COBAS-systemet er en automatiseret amplifikationsenhed (ved hjælp af realtidspolymerasekædereaktion (PCR)) til påvisning af 14 højrisiko HPV-typer (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 og 68), og kan behandle op til 94 samtidige prøver. Tests, der påviste højrisiko non-16 og ikke-18 HPV, vil blive underkastet komplementær analyse for at identificere genotype(r) ved brug af linear array-teknikken, da COBAS-systemet ikke giver genotypebestemmelse af disse højrisiko HPV'er. Til dette formål vil linear array HPV genotyping (CE-IVD) Test for HPV Genotyping kit (Roche Molecular Systems, USA) blive brugt.

DATAANALYSE:

Det primære endepunkt er diagnosefrekvensen for CIN2+ og CIN3+. Sensitivitet og diagnostisk specificitet af VIA, kolposkopi og HRME baseret på hver læsion og hver patient, der bruger histologisk diagnose som guldstandard, vil blive beregnet under forudsætning af, at læsioner diagnosticeret som CIN2 + eller CIN3 + er positive. Sensitivitet og specificitet af VIA og kolposkopi vil også blive beregnet som en sammenligningsmetode.

En beskrivelse fra sag til sag vil blive lavet ved hjælp af beskrivende statistik. Kategoriske variable vil blive sammenlignet ved hjælp af chi-kvadrat-testen eller Fishers eksakte test, afhængig af de forventede værdier i kontingenstabellerne. For at sammenligne numeriske variabler vil t-testene eller Mann-Whitney-testen blive brugt afhængigt af overholdelse af normalitet (skal verificeres af Kolmogorov-Smirnov-testen).

BEREGNING AF PRØVESTØRRELSE:

Prøveberegning var baseret på oplysninger fra andre undersøgelser af samme gruppe (inklusive data, der endnu ikke er offentliggjort). Følgende præmisser blev taget: HRME-sensitivitet og specificitet for CIN2+-diagnose (henholdsvis 93 % og 48 % pr. biopsiområde) og prævalens af CIN2+ i kolposkopiklinikken hos HCB (fra 20 til 30 %). I betragtning af en sygdomsprævalens på 25 % estimeres det, at det vil være nødvendigt at inkludere 1.424 kvinder (625 tilfælde til sensitivitetsberegning og 799 tilfælde til specificitetsberegning) for at nå de forventede sensitivitets- og specificitetsrater med en maksimal fejlmargin på 4 % for et 95 % konfidensinterval. I betragtning af et estimeret tab på 10-15 % (udeblivelse til kolposkopiundersøgelse og HRME), vil det korrigerede prøveestimat variere fra 1.566 til 1.637 kvinder. Derfor har undersøgelsen til hensigt at omfatte 1.600 kvinder med abnorm cervikal cytologi eller positiv HPV-test. Derudover vil en gruppe kvinder uden ændring i cervikal cytologi og HPV-test blive inviteret til at deltage i forskningen for at kontrollere verifikationsbias. Denne bias opstår, når kun de positive tilfælde i screeningen udvælges til at udføre komplementære diagnostiske undersøgelser, hvorved sensitiviteten overvurderes og specificiteten undervurderes. Det anbefales, at en procentdel af negative tilfælde verificeres i henhold til standard guldundersøgelse. Derfor vil 10 % af undersøgelsespopulationen bestå af negative tilfælde i både cervikal cytologi og HPV-testen, hvilket svarer til knap 180 tilfælde. Det endelige stikprøveestimat vil således være på 1.780 kvinder, hvoraf 1.600 kvinder vil få screeningsresultater (ændret cytologi eller positiv HPV-test) rapporteret som positive, og 180 vil have screeningsresultater rapporteret som negative (negativ cytologi og HPV-test).

STUDIESKEMA:

Studiet vil vare 3 år.