HRME a méhnyakrák prekurzor elváltozásainak szűrésében Brazíliában (UH3 – Brazília) (UH3)

DIZÁJNT TANULNI:

Ez egy kísérleti módszertani vizsgálat egykarú, maszkolás nélküli, unicentrikus, nemzetközi diagnosztikai készülékkel.

VÁZLATOK:

A Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brazília) szűrőprogramjában 1780 kóros Pap-kenetet (ASCUS+) vagy pozitív, magas kockázatú HPV-teszttel rendelkező nőt vesznek fel a mobil prevenciós osztályokon vagy a fix osztályokon, akiket kolposzkópiás diagnosztikai vizsgálatra utalják. A kolposzkópiás vizsgálat során a HRME készülékkel ellenőrizzük a méhnyak prekurzor lézióinak jelenlétét.

VIZSGÁLAT ELŐTT ELLENŐRZÉS:

Mivel ez a kutatás magában foglalhatja a méhnyak biopsziáját fertilitásban szenvedő nőknél, biztonsági okokból igazolják a terhesség lehetőségét ebben a női csoportban, mivel a terhes nők méhnyakjában végzett biopszia növeli az abortusz kockázatát. Ezt az ellenőrzést a klinikai anamnézis (menstruációs késés, terhességre utaló jelek, fogamzásgátló módszerek stb.) és a vizeletben lévő humán koriongonadotropin kvalitatív kutatása alapján kell elvégezni. Ezt a tesztet "gyors terhességi tesztnek" vagy "gyógyszertári tesztnek" is nevezik, amely a Brazíliában értékesített és az "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, Brazil Egészségügyi Felügyeleti Ügynökség) által engedélyezett termékek széles listáját tartalmazza. A vizsgálat elve egylépéses immunkromatográfiás módszert tartalmaz a hormon kimutatására. A reakció egy reagenscsíkon történik, ahol kis mennyiségű vizelet rakódik le. A teszt eredménye körülbelül 2 percen belül jelenik meg. A terhes (vagy feltételezett terhes) nőket nem vonják be a vizsgálatba, hanem diagnosztikus vizsgálatnak vetik alá őket a HCB méhnyak-elváltozásokkal rendelkező terhes nőkre vonatkozó intézményi protokollja szerint. Ezek a nők orvosi eligazítást kapnak, és egy speciális szülészeti szolgálatra utalják őket.

NYAJNYAKCITOLÓGIA GYŰJTEMÉNY:

A diagnosztikai vizsgálatok elvégzése előtt az orvos új cervicalis citológiát (Papanicolaou) vesz, amely a Kolposzkópiai Osztály rutinjának része minden olyan nő számára, akinél megváltozott Pap-kenet vagy pozitív HPV-teszt. Ezeket a mintákat etanol alapú tartósító közegben (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) tárolják, és a HCB Patológiai Tanszékére küldik, ahol a citológiai tárgylemezek elkészítéséhez szükséges automatizált feldolgozáson mennek keresztül.

DIAGNOSZTIKAI VIZSGÁLATOK:

A VIA-t 3-5%-os ecetsavval hajtják végre, amelyet a méhnyakra és a megfigyelt kóros elváltozásokra alkalmaznak. Ezután jódos oldatot alkalmaznak, és elvégzik a kolposzkópiát. Tisztázni kell, hogy az ecetsav és a jód alkalmazását rutinszerűen a szokásos kolposzkópiás vizsgálat során végezzük.

Ezután Proflavint (0,01%) kell felvinni a méhnyak felületére. A HRME minden olyan területről rögzít képeket, amelyeket a VIA és/vagy a kolposzkópia abnormálisnak ítél. Ezenkívül mind a négy kvadránst HRME-vel szondázzuk meg annak biztosítására, hogy a nem acetofehér elváltozások is megfigyelhetők legyenek. A kolposzkópiáért felelős személy minden területen (normál, jóindulatú, alacsony fokú rákmegelőző, magas fokú rákmegelőző vagy rák) figyelembe veszi az Ön véleményét az elváltozásról és a HRME képről. A teljes HRME képalkotó eljárás 5-10 percet ad a standard kolposzkópiás vizsgálathoz. A VIA-val, kolposzkópiával és HRME-vel kapcsolatos megfigyeléseket kvadránsonként regisztrálják. A VIA és/vagy kolposzkópia által észlelt kóros területeken biopsziát kell végezni. Ha nem észlelnek kóros területet, de a nőnek megváltozott citológiai tesztje vagy pozitív HPV-tesztje van, méhnyak-mikrobiopsziát vesznek egy látszólag normális területről, amelyet az adott terület HRME képalkotása rögzített. Minden méhnyakbiopsziához speciális csipeszt használnak, ami minimális szöveti traumát (mikrobiopsziát) okoz, és csökkenti a résztvevők kényelmetlenségét. Ezek a csipeszek eltérnek a kolposzkópiás teszteknél általában használtaktól, amelyek általában nagy területeken végeznek biopsziát, és nagyobb kényelmetlenséget okoznak a nőknek.

Két tapasztalt HCB patológus, figyelmen kívül hagyva az összes vizsgálati eredményt, felülvizsgálja a szövettant, és szabványos kritériumok szerint osztályozza a területeket normál, cervicalis intraepiteliális neoplázia 1. fokozatú (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenocarcinoma in situ (AIS) vagy rák kategóriába. Az egymásnak ellentmondó eredményeket a patológusok közötti konszenzusos áttekintéssel oldják meg.

MAGAS KOCKÁZATÚ HPV SZŰRÉS ÉS GENOTÍPOZÁS:

A magas kockázatú HPV-szűrést közvetlenül a kolposzkópia előtt gyűjtött cervicalis citológiai minták (SurePath™) aliquot részein végzik el olyan nőknél, akiknél még nem végezték el ezt a tesztet. A HPV-tesztet Cobas X480™ készüléken (Roche Molecular Systems, USA) végzik el, amely a Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution Molekuláris Onkológiai Kutatóközpont technológiai parkjában érhető el. A vizsgálati protokollt a gyártó által leírtak szerint hajtják végre.

A COBAS rendszer egy automatizált amplifikációs eszköz (valós idejű polimeráz láncreakcióval (PCR)) 14 magas kockázatú HPV típus kimutatására (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 és 68), és akár 94 egyidejű mintát is képes feldolgozni. A magas kockázatú, nem 16-os és nem 18-as HPV-t kimutató teszteket kiegészítő elemzésnek vetik alá a genotípus(ok) lineáris tömb technikával történő azonosítása érdekében, mivel a COBAS rendszer nem biztosítja ezeknek a magas kockázatú HPV-knek a genotipizálását. Ebből a célból lineáris tömb HPV genotipizálási (CE-IVD) tesztet használnak a HPV genotipizáláshoz (Roche Molecular Systems, USA).

ADATELEMZÉS:

Az elsődleges végpont a CIN2+ és CIN3+ diagnosztizálási aránya. A VIA, a kolposzkópia és a HRME szenzitivitását és diagnosztikai specificitását az egyes elváltozások és a szövettani diagnózist aranystandardként használó betegek alapján számítjuk ki, feltételezve, hogy a CIN2+ vagy CIN3+-ként diagnosztizált elváltozások pozitívak. Összehasonlítási módszerként a VIA és a kolposzkópia érzékenységét és specificitását is kiszámítjuk.

Leíró statisztikák felhasználásával eseti leírás készül. A kategorikus változókat a khi-négyzet teszt vagy Fisher-féle egzakt teszt segítségével hasonlítjuk össze, a kontingenciatáblázatokban szereplő várható értékektől függően. A numerikus változók összehasonlításához a t-próbát vagy a Mann-Whitney-próbát alkalmazzuk a normalitás betartásától függően (a Kolmogorov-Smirnov teszttel ellenőrizendő).

A MINTA MÉRETE SZÁMÍTÁSA:

A mintaszámítás ugyanazon csoport más tanulmányaiból származó információkon alapult (beleértve a még nem publikált adatokat is). A következő feltevéseket vettük: HRME szenzitivitása és specificitása a CIN2+ diagnózisra (93%, illetve 48%, biopsziás területenként) és a CIN2+ prevalenciája a HCB kolposzkópiás klinikáján (20-30%). Figyelembe véve a betegség 25%-os prevalenciáját, a becslések szerint 1424 nő bevonására lesz szükség (625 eset az érzékenységszámításhoz és 799 eset a specificitás kiszámításához), hogy elérjük a várt érzékenységi és specificitási arányt 4-es maximális hibahatár mellett. % 95%-os konfidencia intervallumhoz. Figyelembe véve a becsült 10-15%-os veszteséget (kolposzkópiás vizsgálaton és HRME-n való részvétel hiánya), a korrigált mintabecslés 1566 és 1637 nő között mozog. Ezért a tanulmányba 1600 olyan nőt kívánnak bevonni, akiknek kóros cervicalis citológiája vagy pozitív HPV-tesztje van. Ezenkívül a cervicalis citológiában és a HPV-tesztben nem változott nők egy csoportja is meghívást kap a kutatásban való részvételre, az igazolási torzítás ellenőrzése érdekében. Ez a torzítás akkor fordul elő, ha a szűrésben csak a pozitív eseteket választják ki kiegészítő diagnosztikai vizsgálatok elvégzésére, túlbecsülve az érzékenységet és alábecsülve a specificitást. Javasoljuk, hogy a negatív esetek százalékát a standard aranyvizsgálat szerint igazolják. Ezért a vizsgált populáció 10%-a negatív esetekből áll mind a cervicalis citológiában, mind a HPV-tesztben, ami közel 180 esetnek felel meg. Így a végső minta becslése 1780 nő lesz, akik közül 1600 nő szűrési (módosult citológiai vagy pozitív HPV-teszt) eredménye pozitív, 180 nő esetében pedig negatívnak (negatív citológiai és HPV-teszt).

TANULÁSI TERV:

A tanulmány 3 évig fog tartani.