HRME kohdunkaulan syövän esiastevaurioiden seulonnassa Brasiliassa (UH3 - Brasilia) (UH3)

SUUNNITTELU:

Tämä on kokeellinen metodologinen tutkimus yksihaaraisella, peittämättömällä, yksikeskisellä kansainvälisellä diagnostisella laitteella.

YHTEENVETO:

Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brasilia) seulontaohjelmassa rekrytoidaan joko liikkuviin ennaltaehkäisyyksiköihin tai kiinteisiin yksiköihin 1 780 naista, joilla on epänormaali papa-kokeilu (ASCUS+) tai positiivinen korkean riskin HPV-testi kohdunkaulassa. lähetetään diagnostiseen tutkimukseen kolposkopialla. Kolposkopiatutkimuksen aikana HRME-laitteella tarkistetaan, onko kohdunkaulassa esiintyy prekursorivaurioita.

ENNEN TESTAUSTARKASTUS:

Koska tämä tutkimus voi sisältää kohdunkaulan biopsiaa hedelmällisille naisille, niin turvallisuussyistä tämän naisryhmän raskauden mahdollisuus varmistetaan, koska raskaana olevan naisen kohdunkaulasta tehty biopsia lisää abortin riskiä. Tämä varmennus tehdään kliinisen historian perusteella (kuukautisten viivästyminen, raskauteen viittaavat merkit, ehkäisymenetelmät jne.) sekä laadullisen tutkimuksen avulla ihmisen koriongonadotropiinista virtsassa. Tämä testi tunnetaan myös nimellä "pika raskaustesti" tai "apteekkitesti", jossa on laaja luettelo Brasiliassa myydyistä ja "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitárian" (ANVISA, Brasilian terveysviraston virasto) hyväksymästä tuotteista. Testin periaatteena on yksivaiheinen immunokromatografinen menetelmä hormonin havaitsemiseksi. Reaktio tapahtuu reagenssiliuskalla, johon kerääntyy pieni määrä virtsaa. Testitulos saadaan noin 2 minuutissa. Raskaana olevia (tai raskaana oleviksi epäiltyjä) naisia ​​ei oteta mukaan tutkimukseen, vaan he joutuvat diagnostiseen tutkimukseen HCB:n kohdunkaulassa muutoksia aiheuttavien raskaana olevien naisten laitoskäytännön mukaisesti. Nämä naiset saavat lääketieteellisen opastuksen ja heidät lähetetään erikoistuneeseen synnytyspalveluun.

Kohdunkaulan sytologian kokoelma:

Ennen diagnostisten tutkimusten suorittamista lääkäri kerää uuden kohdunkaulan sytologian (Papanicolaou), joka on osa kolposkopian osaston rutiinia jokaiselle naiselle, jolla on muuttunut papa-kokeilu tai positiivinen HPV-testi. Nämä näytteet säilytetään etanolipohjaisessa säilöntäaineessa (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) ja lähetetään HCB:n patologian osastolle, jossa ne läpikäyvät automaattisen käsittelyn sytologisten objektilasien valmistamiseksi.

DIAGNOSTISET TUTKIMUKSET:

VIA suoritetaan käyttämällä 3–5-prosenttista etikkahappoa, joka levitetään kohdunkaulaan ja havaittuihin epänormaaleihin vaurioihin. Sitten laitetaan jodiliuosta ja suoritetaan kolposkopia. On tarpeen selventää, että etikkahapon ja jodin levitys suoritetaan rutiininomaisesti tavallisen kolposkopiatutkimuksen aikana.

Sitten kohdunkaulan pinnalle levitetään Proflaviinia (0,01 %). HRME ottaa kuvia kaikilta alueilta, joita VIA ja/tai kolposkopia ovat pitäneet epänormaaleina. Lisäksi kaikki neljä kvadranttia tutkitaan HRME:llä sen varmistamiseksi, että myös muut kuin asetovalkoiset leesiot havaitaan. Kolposkopiasta vastaava henkilö huomioi mielipiteesi vauriosta ja HRME-kuvasta kullakin alueella (normaali, hyvänlaatuinen, matala-asteinen esisyöpä, korkea-asteinen esisyöpä tai syöpä). Täydellinen HRME-kuvausmenettely lisää 5-10 minuuttia normaaliin kolposkopiatutkimukseen. VIA:han, kolposkopiaan ja HRME:hen liittyvät havainnot rekisteröidään kvadranteittain. Kaikille VIA:n ja/tai kolposkopian havaitsemille epänormaaleille alueille tehdään biopsia. Jos poikkeavaa aluetta ei havaita, mutta naisella on muuttunut sytologinen testi tai positiivinen HPV-testi, kohdunkaulan mikrobiopsia otetaan näennäisesti normaalilta alueelta, joka on otettu kyseisen alueen HRME-kuvauksella. Kaikissa kohdunkaulan biopsioissa käytetään erityisiä pinsettejä, jotka aiheuttavat mahdollisimman vähän kudosvaurioita (mikrobipsia) ja vähentävät osallistujien epämukavuutta. Nämä pinsetit poikkeavat tavallisesti käytetyistä kolposkopiatesteissä, jotka yleensä tekevät biopsiat suurilta alueilta ja tuovat enemmän epämukavuutta naisille.

Kaksi kokenutta HCB-patologia, jättäen huomiotta kaikki tutkimustulokset, tarkastelee histologiaa ja luokittelee alueet normaaleihin, kohdunkaulan intraepiteliaaliseen neoplasiaan aste 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenokarsinooma in situ (AIS) tai syöpä standardoitujen kriteerien mukaan. Ristiriitaiset tulokset ratkaistaan ​​patologien konsensusarvioinnin avulla.

KORKEAN RISKIN HPV-SEULONTA JA GENOTYPIOINTI:

Korkean riskin HPV-seulonta suoritetaan kohdunkaulan sytologisista näytteistä (SurePath™), jotka on kerätty juuri ennen kolposkopiaa naisilla, joille ei ole vielä tehty tätä testiä. HPV-testi suoritetaan Cobas X480™ -laitteella (Roche Molecular Systems, USA), joka on saatavilla Barretos Cancer Hospitalin Molecular Oncology Research Centerin teknologiapuistossa - Pio XII Institution. Testiprotokolla suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti.

COBAS-järjestelmä on automaattinen monistuslaite (reaaliaikaisella polymeraasiketjureaktiolla (PCR)) 14 korkean riskin HPV-tyypin (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 ja 68), ja ne voivat käsitellä jopa 94 ​​samanaikaista näytettä. Testeihin, joissa havaittiin korkean riskin ei-16- ja ei-18-HPV, suoritetaan täydentävä analyysi genotyyppi(e)n tunnistamiseksi lineaarista taulukkotekniikkaa käyttäen, koska COBAS-järjestelmä ei tarjoa näiden korkean riskin HPV:iden genotyyppiä. Tätä tarkoitusta varten käytetään lineaarista HPV-genotyypitystestiä (CE-IVD) HPV-genotyypityspakkausta varten (Roche Molecular Systems, USA).

TIETOJEN ANALYSOINTI:

Ensisijainen päätetapahtuma on CIN2+ ja CIN3+ diagnoositiheys. VIA:n, kolposkopian ja HRME:n herkkyys ja diagnostinen spesifisyys kunkin leesion ja jokaisen histologista diagnoosia kultastandardina käyttävän potilaan perusteella lasketaan olettaen, että CIN2+- tai CIN3+-leesiot ovat positiivisia. Vertailumenetelmänä lasketaan myös VIA:n ja kolposkopian herkkyys ja spesifisyys.

Tapauskohtainen kuvaus tehdään kuvaavien tilastojen avulla. Kategorisia muuttujia verrataan khin-neliötestillä tai Fisherin eksaktilla testillä riippuen ehdollisuustaulukoiden odotetuista arvoista. Numeeristen muuttujien vertailuun käytetään t-testiä tai Mann-Whitney-testiä riippuen normaalisuorituksen noudattamisesta (varmistetaan Kolmogorov-Smirnov-testillä).

NÄYTTEKOON LASKENTA:

Otoslaskenta perustui muiden saman ryhmän tutkimusten tietoihin (mukaan lukien tiedot, joita ei ole vielä julkaistu). Tehtiin seuraavat lähtökohdat: HRME-herkkyys ja -spesifisyys CIN2+-diagnoosille (93 % ja 48 %, vastaavasti biopsia-aluetta kohti) ja CIN2+:n esiintyvyys HCB:n kolposkopiaklinikalla (vaihteluväli 20-30 %). Ottaen huomioon sairauden esiintyvyyden 25 %, on arvioitu, että on tarpeen ottaa mukaan 1 424 naista (625 tapausta herkkyyslaskentaan ja 799 tapausta spesifisyyden laskemiseen), jotta saavutetaan odotetut herkkyys- ja spesifisyysasteet maksimivirhemarginaalilla 4 % 95 %:n luottamusvälille. Kun otetaan huomioon arvioitu 10-15 %:n menetys (kolposkopiatutkimukseen ja HRME-tutkimukseen osallistumatta jättäminen), korjattu otantaarvio on 1 566 - 1 637 naista. Siksi tutkimukseen on tarkoitus ottaa mukaan 1 600 naista, joilla on epänormaali kohdunkaulan sytologia tai positiivinen HPV-testi. Lisäksi tutkimukseen kutsutaan ryhmä naisia, joilla ei ole muutoksia kohdunkaulan sytologiassa ja HPV-testissä. Tämä harha ilmenee, kun vain positiiviset tapaukset seulonnassa valitaan suorittamaan täydentäviä diagnostisia tutkimuksia, yliarvioimalla herkkyyden ja aliarvioimalla spesifisyyttä. On suositeltavaa, että negatiivisten tapausten prosenttiosuus varmistetaan kultaisen standardin mukaan. Siksi 10 % tutkimuspopulaatiosta koostuu negatiivisista tapauksista sekä kohdunkaulan sytologiassa että HPV-testissä, mikä vastaa lähes 180 tapausta. Näin ollen lopullinen näytearvio on 1 780 naista, joista 1 600 naisella seulontatulokset (muuttunut sytologia tai positiivinen HPV-testi) ilmoitetaan positiivisiksi ja 180 naisen seulontatulokset ilmoitetaan negatiivisiksi (negatiivinen sytologia ja HPV-testi).

OPINTOJEN AIKATAULU:

Opiskelu kestää 3 vuotta.