HRME vid screening av cervical cancerprekursorlesioner i Brasilien (UH3 - Brasilien) (UH3)

STUDERA DESIGN:

Detta är en experimentell metodologisk studie med en enarmad, omaskerad, unicentrisk, internationell diagnostisk anordning.

KONTAKTER:

1 780 kvinnor med onormala cellprov (ASCUS+) eller positivt högrisk-HPV-test i livmoderhalsen utfört i screeningprogrammet för Barretos Cancer Hospital (HCB, Barretos, Brasilien) kommer att rekryteras, antingen vid Mobile Prevention Units eller Fixed Units, som har varit remitteras för diagnostisk utredning med kolposkopi. Under kolposkopiundersökningen kommer HRME-apparaten att användas för att kontrollera förekomsten av prekursorlesioner i livmoderhalsen.

VERIFIERING FÖRE TEST:

Eftersom denna forskning kan omfatta livmoderhalsbiopsi hos kvinnor med fertilitet, kommer av säkerhetsskäl möjligheten till graviditet hos denna grupp kvinnor att verifieras, eftersom biopsi som utförs i livmoderhalsen hos gravida kvinnor ökar risken för abort. Denna verifiering kommer att utföras med hjälp av klinisk historia (menstruationsförsening, tecken som tyder på graviditet, preventivmedel etc.) och även genom kvalitativ forskning om humant koriongonadotropin i urin. Detta test är också känt som "snabbt graviditetstest" eller "apotekstest", med en omfattande lista över produkter som säljs i Brasilien och godkända av "Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária" (ANVISA, brasilianska hälsoövervakningsmyndigheten). Principen för testet innebär en enstegs immunokromatografisk metod för att detektera hormonet. Reaktion sker på en reagensremsa, där en liten mängd urin avsätts. Testresultatet ges inom cirka 2 minuter. Kvinnor som är gravida (eller misstänks vara gravida) kommer inte att ingå i studien utan ställas till diagnostisk utredning enligt institutionsprotokollet för gravida kvinnor med förändringar i livmoderhalsen på HCB. Dessa kvinnor kommer att få medicinsk orientering och remitteras till en specialiserad obstetrisk service.

INSAMLING AV CERVIKAL CYTOLOGI:

Innan de diagnostiska undersökningarna görs kommer läkaren att samla in en ny cervikal cytologi (Papanicolaou), som är en del av rutinen för Kolposkopiavdelningen för varje kvinna som har ett förändrat cellprov eller positivt HPV-test. Dessa prover kommer att bevaras i ett etanolbaserat konserveringsmedium (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, USA) och kommer att skickas till Department of Pathology of HCB där de kommer att genomgå en automatiserad bearbetning för beredning av cytologiglas.

DIAGNOSTISK UNDERSÖKNING:

VIA kommer att utföras med 3-5 % ättiksyra, applicerad på livmoderhalsen och på eventuella observerade onormala lesioner. Sedan kommer jodlösning att appliceras och kolposkopin kommer att utföras. Det är nödvändigt att klargöra att appliceringen av ättiksyra och jod rutinmässigt utförs under en standard kolposkopiundersökning.

Sedan kommer Proflavine (0,01%) att appliceras på ytan av livmoderhalsen. HRME kommer att ta bilder från alla områden som anses onormala av VIA och/eller kolposkopi. Dessutom kommer alla fyra kvadranter att sonderas med HRME för att säkerställa att eventuella icke-acetovita lesioner också observeras. Den person som ansvarar för kolposkopin kommer att notera din åsikt om lesionen och HRME-bilden vid varje område (normal, godartad, låggradig precancerös, höggradig precancerös eller cancer). Den fullständiga HRME-avbildningsproceduren kommer att lägga till 5-10 minuter till standardkolposkopiundersökningen. Observationer relaterade till VIA, kolposkopi och HRME kommer att registreras per kvadrant. Alla onormala områden som upptäcks med VIA och/eller kolposkopi kommer att genomgå en biopsi. Om inget onormalt område observeras, men kvinnan har ett förändrat cytologitest eller ett positivt HPV-test, kommer en cervikal mikrobiopsi att erhållas från ett till synes normalt område som fångats av HRME-avbildning av det området. För alla livmoderhalsbiopsier kommer en speciell pincett att användas, vilket orsakar minimalt vävnadstrauma (mikrobiopsi) och minskar deltagarnas obehag. Dessa pincett skiljer sig från de som vanligtvis används i kolposkopi-tester, som vanligtvis utför biopsier på stora ytor och ger mer obehag för kvinnor.

Två erfarna HCB-patologer, som ignorerar alla studieresultat, kommer att granska histologi och klassificera områden som normala, cervikal intraepitelial neoplasi grad 1 (CIN 1), CIN 2, CIN 3, adenokarcinom in situ (AIS) eller cancer enligt standardiserade kriterier. Motstridiga resultat kommer att lösas genom konsensusgranskning bland patologer.

HÖRISK HPV-SCREENING OCH GENOTYPNING:

Högrisk HPV-screening kommer att utföras på alikvoter av cervikala cytologiprover (SurePath™) insamlade strax före kolposkopi hos kvinnor som inte har underkastats detta test ännu. HPV-test kommer att utföras på en Cobas X480™-enhet (Roche Molecular Systems, USA), som är tillgänglig på teknologiparken vid Molecular Oncology Research Center vid Barretos Cancer Hospital - Pio XII Institution. Testprotokollet kommer att utföras enligt beskrivningen av tillverkaren.

COBAS-systemet är en automatiserad amplifieringsanordning (med hjälp av realtidspolymeraskedjereaktion (PCR)) för detektering av 14 högrisk-HPV-typer (16, 18 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 och 68), och kan behandla upp till 94 samtidiga prover. Tester som upptäckte högrisk non-16 och icke-18 HPV kommer att underkastas kompletterande analys för att identifiera genotyp(er) med linear array-tekniken, eftersom COBAS-systemet inte tillhandahåller genotypning av dessa högrisk HPV. För detta ändamål kommer linear array HPV genotyping (CE-IVD) Test for HPV genotyping kit (Roche Molecular Systems, USA) att användas.

DATAANALYS:

Det primära effektmåttet är diagnosfrekvensen CIN2+ och CIN3+. Sensitivitet och diagnostisk specificitet för VIA, kolposkopi och HRME baserat på varje lesion och varje patient som använder histologisk diagnos som guldstandard kommer att beräknas förutsatt att lesioner diagnostiserade som CIN2 + eller CIN3 + är positiva. Sensitivitet och specificitet för VIA och kolposkopi kommer också att beräknas som en jämförelsemetod.

En beskrivning från fall till fall kommer att göras med hjälp av beskrivande statistik. Kategoriska variabler kommer att jämföras med hjälp av chi-kvadrattestet eller Fishers exakta test, beroende på förväntade värden i beredskapstabellerna. För att jämföra numeriska variabler kommer t-testen eller Mann-Whitney-testet att användas beroende på efterlevnaden av normalitet (som ska verifieras av Kolmogorov-Smirnov-testet).

BERÄKNING AV PROVSTORLEK:

Provberäkningen baserades på information från andra studier av samma grupp (inklusive data som ännu inte publicerats). Följande premisser togs: HRME-känslighet och specificitet för CIN2+-diagnos (93 % respektive 48 % per biopsiområde) och prevalens av CIN2+ i kolposkopikliniken för HCB (från 20 till 30 %). Med tanke på en sjukdomsprevalens på 25 % beräknas det vara nödvändigt att inkludera 1 424 kvinnor (625 fall för sensitivitetsberäkning och 799 fall för specificitetsberäkning) för att nå den förväntade sensitivitets- och specificitetsgraden med en maximal felmarginal på 4 % för ett 95 % konfidensintervall. Med tanke på en uppskattad förlust på 10-15 % (utebliven närvaro för kolposkopiundersökning och HRME), kommer den korrigerade provuppskattningen att variera från 1 566 till 1 637 kvinnor. Därför avser studien att inkludera 1 600 kvinnor med onormal cervikal cytologi eller positivt HPV-test. Dessutom kommer en grupp kvinnor utan förändring i cervikal cytologi och HPV-test att bjudas in att delta i forskningen för att kontrollera verifieringsbias. Denna bias uppstår när endast de positiva fallen i screeningen väljs ut för att utföra kompletterande diagnostiska undersökningar, överskattar känsligheten och underskattar specificiteten. Det rekommenderas att en procentandel av negativa fall verifieras enligt standard guldundersökning. Därför kommer 10 % av studiepopulationen att bestå av negativa fall i både cervikal cytologi och HPV-testet, vilket motsvarar nästan 180 fall. Således kommer den slutliga provuppskattningen att vara på 1 780 kvinnor, av vilka 1 600 kvinnor kommer att få screeningresultat (förändrad cytologi eller positivt HPV-test) rapporterade som positiva och 180 kommer att få screeningresultat rapporterade som negativa (negativa cytologi- och HPV-test).

STUDIESCHEMA:

Studien kommer att pågå i 3 år.