HRME в скрининге предраковых поражений шейки матки в Бразилии (UH3 - Бразилия) (UH3)

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ:

Это экспериментально-методическое исследование с одноруким, немаскированным, уницентрическим, международным диагностическим прибором.

ОПИСАНИЕ:

1780 женщин с аномальными мазками Папаниколау (ASCUS+) или положительным тестом на ВПЧ высокого риска в шейке матки, прошедших программу скрининга в Онкологической больнице Барретос (HCB, Барретос, Бразилия), будут набраны либо в мобильных отделениях профилактики, либо в стационарных отделениях, которые были направлен на диагностику с кольпоскопией. Во время кольпоскопии устройство HRME будет использоваться для проверки наличия предраковых поражений шейки матки.

ПРЕДТЕСТРОВАЯ ПРОВЕРКА:

Так как это исследование может включать биопсию шейки матки у женщин с фертильностью, в целях безопасности будет проверена возможность наступления беременности у этой группы женщин, так как биопсия, выполненная в шейке матки беременной, увеличивает риск прерывания беременности. Эта проверка будет проводиться с помощью истории болезни (задержка менструального цикла, признаки, указывающие на беременность, методы контрацепции и т. д.), а также с помощью качественного исследования хорионического гонадотропина человека в моче. Этот тест также известен как «экспресс-тест на беременность» или «аптечный тест» с обширным списком продуктов, продаваемых в Бразилии и одобренных «Agencia Nacional de Vigilancia Sanitária» (ANVISA, Бразильское агентство по надзору за здоровьем). Принцип теста включает одноэтапный иммунохроматографический метод для обнаружения гормона. Реакция происходит на реагентной полоске, где осаждается небольшое количество мочи. Результат теста предоставляется примерно через 2 минуты. Беременные женщины (или с подозрением на беременность) не будут включены в исследование, но будут подвергнуты диагностическому обследованию в соответствии с институциональным протоколом для беременных с изменениями шейки матки при ГЦБ. Эти женщины получат медицинскую ориентацию и будут направлены в специализированную акушерскую службу.

СБОР ЦИТОЛОГИИ ШЕЙКИ МЕЙКИ:

Перед проведением диагностических обследований врач возьмет новую цитологию шейки матки (по Папаниколау), которая является частью рутинной работы отделения кольпоскопии для каждой женщины с измененным мазком Папаниколау или положительным тестом на ВПЧ. Эти образцы будут сохранены в консервирующей среде на основе этанола (SurePath™ Preservative Fluid, Becton & Dickinson, США) и отправлены в отделение патологии HCB, где они будут подвергнуты автоматизированной обработке для подготовки цитологических препаратов.

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ОБСЛЕДОВАНИЯ:

VIA будет выполняться с использованием 3-5% уксусной кислоты, наносимой на шейку матки и любые наблюдаемые аномальные поражения. Затем наносится раствор йода и проводится кольпоскопия. Необходимо уточнить, что аппликации уксусной кислоты и йода рутинно проводят при стандартном кольпоскопическом обследовании.

Затем на поверхность шейки матки наносится Профлавин (0,01%). HRME будет захватывать изображения всех областей, признанных аномальными с помощью VIA и/или кольпоскопии. Кроме того, все четыре квадранта будут исследованы с помощью HRME, чтобы убедиться, что также наблюдаются любые неацетобелые поражения. Лицо, ответственное за кольпоскопию, примет к сведению ваше мнение о поражении и изображении HRME в каждой области (нормальное, доброкачественное, предраковое состояние низкой степени, предраковое состояние высокой степени или рак). Полная процедура визуализации HRME добавит 5-10 минут к стандартной кольпоскопии. Наблюдения, связанные с VIA, кольпоскопией и HRME, будут регистрироваться по квадранту. Любые аномальные области, обнаруженные с помощью VIA и/или кольпоскопии, подлежат биопсии. Если не наблюдается никакой аномальной области, но у женщины есть измененный цитологический тест или положительный тест на ВПЧ, микробиопсия шейки матки будет получена из явно нормальной области, полученной с помощью визуализации этой области с помощью HRME. Для всех биопсий шейки матки будут использоваться специальные пинцеты, вызывающие минимальную травму тканей (микробиопсия) и уменьшающие дискомфорт участников. Эти пинцеты отличаются от тех, которые обычно используются при кольпоскопии, которая обычно выполняет биопсию на больших участках и доставляет больше дискомфорта женщинам.

Два опытных патологоанатома, игнорируя все результаты исследования, рассмотрят гистологию и классифицируют области как нормальные, цервикальную интраэпителиальную неоплазию 1 степени (CIN 1), CIN 2, CIN 3, аденокарциному in situ (AIS) или рак в соответствии со стандартными критериями. Противоречивые результаты будут разрешены путем консенсуса среди патологоанатомов.

СКРИНИНГ И ГЕНОТИПИРОВАНИЕ ВПЧ ВЫСОКОГО РИСКА:

Скрининг ВПЧ высокого риска будет проводиться на аликвотах цитологических образцов шейки матки (SurePath™), собранных непосредственно перед кольпоскопией у женщин, которые еще не подвергались этому тесту. Тест на ВПЧ будет проводиться на приборе Cobas X480™ (Roche Molecular Systems, США), который имеется в технологическом парке Исследовательского центра молекулярной онкологии онкологического госпиталя Барретос - Институт Pio XII. Протокол испытаний будет выполняться, как описано производителем.

Система COBAS представляет собой автоматизированное устройство для амплификации (с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени) для обнаружения 14 типов ВПЧ высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68) и может обрабатывать до 94 одновременных сэмплов. Тесты, выявившие ВПЧ высокого риска не-16 и не-18, будут подвергнуты дополнительному анализу для определения генотипа(ов) с использованием метода линейного массива, поскольку система COBAS не обеспечивает генотипирование этих ВПЧ высокого риска. Для этого будет использоваться линейный набор для генотипирования ВПЧ (CE-IVD) для набора для генотипирования ВПЧ (Roche Molecular Systems, США).

АНАЛИЗ ДАННЫХ:

Первичной конечной точкой является частота диагностики CIN2+ и CIN3+. Чувствительность и диагностическая специфичность VIA, кольпоскопии и HRME на основе каждого поражения и каждого пациента с использованием гистологического диагноза в качестве золотого стандарта будут рассчитываться при условии, что поражения, диагностированные как CIN2+ или CIN3+, являются положительными. Чувствительность и специфичность VIA и кольпоскопии также будут рассчитываться в качестве методов сравнения.

Индивидуальное описание будет сделано с использованием описательной статистики. Категориальные переменные будут сравниваться с помощью критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера, в зависимости от ожидаемых значений в таблицах непредвиденных обстоятельств. Для сравнения числовых переменных будут использоваться t-критерии или критерий Манна-Уитни в зависимости от соблюдения нормальности (проверяется критерием Колмогорова-Смирнова).

РАСЧЕТ ОБЪЕМА ВЫБОРКИ:

Расчет выборки основывался на информации из других исследований той же группы (включая еще не опубликованные данные). Были приняты следующие предпосылки: чувствительность и специфичность HRME для диагностики CIN2+ (93% и 48%, соответственно, на область биопсии) и распространенность CIN2+ в клинике кольпоскопии ГЦБ (в диапазоне от 20 до 30%). Учитывая распространенность заболевания в 25%, предполагается, что необходимо будет включить 1424 женщины (625 случаев для расчета чувствительности и 799 случаев для расчета специфичности), чтобы достичь ожидаемых уровней чувствительности и специфичности с максимальным пределом погрешности 4. % для 95% доверительного интервала. Учитывая расчетную потерю в 10-15% (неявка на кольпоскопию и HRME), скорректированная оценка выборки будет варьироваться от 1566 до 1637 женщин. Таким образом, в исследование планируется включить 1600 женщин с аномальной цитологией шейки матки или положительным тестом на ВПЧ. Кроме того, группа женщин без изменений в цитологии шейки матки и тесте на ВПЧ будет приглашена для участия в исследовании, чтобы проверить погрешность проверки. Эта систематическая ошибка возникает, когда для проведения дополнительных диагностических исследований отбираются только положительные случаи скрининга, что приводит к переоценке чувствительности и недооценке специфичности. Рекомендуется, чтобы процент отрицательных случаев был проверен в соответствии со стандартным исследованием золота. Таким образом, 10% изучаемой популяции будут состоять из отрицательных случаев как при цитологии шейки матки, так и при тесте на ВПЧ, что соответствует почти 180 случаям. Таким образом, окончательная оценка выборки будет состоять из 1780 женщин, из которых у 1600 женщин результаты скрининга (измененная цитология или положительный тест на ВПЧ) будут признаны положительными, а у 180 женщин результаты скрининга будут указаны как отрицательные (отрицательные цитология и тест на ВПЧ).

РАСПИСАНИЕ ОБУЧЕНИЯ:

Обучение продлится 3 года.