津巴布韦大学健康科学学院 (UZ-CHS) 出生队列研究 (UZ-CHS-BC)

在撒哈拉以南非洲，每年有超过 100 万名婴儿由感染 HIV-1 的妇女生下。 在津巴布韦，每年有 379,000 人出生，其中每年约有 48,000 名婴儿出生于接受终生高效抗逆转录病毒疗法 (HAART) 的 HIV-1 感染妇女。 人们对感染 HIV-1 的妇女所生的 HIV-1 暴露但未感染 (HEU) 婴儿的一般健康和发育结果表示担忧。 尽管 HIV 呈阴性，但 HEU 儿童在出生后第一年和第二年的死亡率分别比 HIV 未暴露和未感染 (HUU) 婴儿高 3.9 倍和 2.0 倍。 与 HUU 儿童相比，HEU 儿童可能有不良出生结果、生长发育受损和其他健康缺陷。 这是一个重大的公共卫生问题，因为在成年后，出生时体重过轻 (LBW) 的婴儿更有可能死于非传染性疾病 (NCD)，例如高血压、中风和 2 型糖尿病。 在津巴布韦，HEU 婴儿在 HAART 之前的时代得到了很好的研究；然而，缺乏当代证据。 此外，以前的研究没有对怀孕妇女进行特征分析，并且没有针对其他常见的产前感染性病原体对结果进行控制，包括额外的风险因素，如早产、LBW、母乳喂养时间、贫困和产妇社会心理压力。 因此，需要对 HEU 婴儿进行深入和全面的表征，不仅可以避免 HIV 感染，还可以改善暴露者的短期和长期健康结果。

妊娠期间 HAART 的风险 在津巴布韦，目前针对 HIV 感染妇女预防 HIV 母婴传播 (MTCT) 的护理标准包括 Tenofovir、Lamivudine 和 Efavirenz (TENOLAM-E)。 然而，抗逆转录病毒药物会在羊水中积聚，从而在脆弱的胚胎和胎儿发育过程中构成风险。 HAART 的时机可能也很重要，因为南非的一项研究表明，与在受孕后开始 HAART 的母亲相比，在受孕前开始基于齐多夫定的 HAART 的母亲早产几率是其两倍。 抗 HIV 药物的毒性机制包括线粒体毒性和线粒体 DNA 突变在母亲身上，也可能在婴儿身上。 线粒体功能障碍反过来会增加活性氧的产生并激活 IL-1 的产生。 干扰脂质代谢是 HAART 毒性的另一种机制。 早期接触基于依法韦仑的 HAART 与神经发育和社会情感挑战相关，这可能导致行为缺陷。 此外，持续性感染、社会经济地位的不利影响以及二恶英或氯化杀虫剂等孕产妇饮食污染物也可能发挥作用。

观察到的 HEU 婴儿不良健康结果的原因可能与免疫系统状态改变有关。 然而，HEU 儿童超过一岁的免疫特征在很大程度上仍未得到探索。 在津巴布韦，通过扩大免疫计划 (EPI) 促进婴儿主动免疫的疫苗接种运动。 尽管某些 EPI 疫苗后的峰值抗体滴度在 HEU 婴儿中是正常的，但尚无关于这些免疫反应持续时间的研究。 在子宫内，HIV 暴露会增加胎盘细胞产生的促炎细胞因子水平。 合并感染似乎很重要，因为肯尼亚 HEU 新生儿（有大量母体合并感染）的炎症血浆标记物水平高于美国研究中的 HEU 对照。 此外，HEU 婴儿的 CMV 负荷较高，这可能部分由母体病毒血症驱动，并可能有助于免疫激活。 因此，HEU 婴儿继续有基线炎症，这可能与不良的短期和长期结果有关，抗炎干预可能会改善婴儿健康。 对孕妇进行 HAART 治疗的干预研究在伦理上具有挑战性；然而，HAART 对神经/免疫发育的影响可以在像 UZ-CHS 出生队列这样的研究中进行评估，在这些研究中，由于经济挑战，母亲在产前检查的时间较晚，而且有些人在妊娠晚期还未接受过 HAART。 关于 HEU 婴儿短期和长期结果的选项 B+ 时代 HAART 暴露风险的证据仍然有限。 然而，据我们所知，没有研究将母体羊水、尿液、血浆和纵向母乳中的 HAART 水平与不良妊娠结局、婴儿生长、新陈代谢和（免疫/神经）发育相关联。

方法 津巴布韦大学健康科学学院 (UZ-CHS) 出生队列研究是一项前瞻性观察队列研究，比较哈拉雷西郊高密度初级卫生综合诊所资源匮乏环境中感染 HIV 和未感染 HIV 的妇女所生婴儿. 2016 年 1 月至 2019 年 6 月，1,200 名处于妊娠晚期的孕妇（600 名感染 HIV 的母亲和 600 名未感染 HIV 的对照）入组。 参与者在出生后 10 天内、出生后 6、10、14、24、48、72 和 96 周龄时作为母婴对被跟踪。 每次访问都使用临床检查来评估健康和环境因素的影响。 此外，还会进行问卷调查和生物样本进行实验室测试。 该研究的设计是非干预队列，但向参与者提供有关健康和卫生的建议。

研究目的 本研究旨在研究母亲 HIV 状况、子宫内和整个母乳喂养期间累积的 HAART 暴露、免疫抑制和免疫激活以及环境变量对资源匮乏环境中婴儿的短期和长期结果的影响。 我们的研究重点关注 HEU 婴儿的死亡率和发病率，测试先前队列中已确定的风险因素。 正在从怀孕到 2 岁的母亲和婴儿中前瞻性地收集数据和生物材料，并将来自同一社区的 HEU 与 HUU 婴儿进行比较。 为了进行综合评估，母亲的社会经济地位、家庭因素、共病包括与巨细胞病毒 (CMV)、乙型/丙型肝炎 (HBV)/(HCV) 等持久性病毒的合并感染、梅毒和肺结核等细菌性疾病的作用(TB)、肠道蠕虫、新出现的非传染性疾病，如妊娠期糖尿病 (GDM) 和高血压疾病，以及孕产妇营养状况对妊娠结局、婴儿死亡率和发育、免疫力和健康的影响。 UZ-CHS 提供了一个机会来建立目前不可用的参考范围，适用于具有良好妊娠结局的各种孕妇亚组，供未来患者临床使用。

研究地点和地方市政参与 哈拉雷市建立了 12 家综合诊所，每家诊所都包括初级保健、产科、产后保健和家庭保健服务。 医疗服务包括 HIV 咨询和快速检测以及 HAART 的启动和管理。 还提供其他慢性疾病的监测和随访，包括 GDM 和动脉高血压。 每个站点每周都会有一名医生来处理复杂的病例。 产科服务包括产前护理、随访以及艾滋病毒和梅毒筛查和治疗。 母亲在分娩后 10 天内获得产前服务的费用为 25 美元，而婴儿 5 岁之前的健康服务免费。 鼓励母亲在怀孕早期（第 4-12 周）预约，并与配偶一起检测 HIV。 目前，由于社会经济挑战，大多数孕妇在怀孕后期到综合诊所进行产前登记，这种情况使未出生的婴儿面临感染艾滋病毒的风险，使贫困和艾滋病毒感染的恶性循环长期存在。 在进行研究前的地点可行性评估后，在 12 家综合诊所中，Kuwadzana、Dzivaresekwa (Rujeko)、Glenview 和 Budiriro 被选中，原因是孕产妇和儿童保健服务的数量较多、艾滋病病毒呈阳性的频率以及没有针对该领域的竞争性研究人口相同。 选定的四家综合诊所所在的服务区，社区相对稳定，不经常更换租住的住所。 这些机构的市政护士和助产士协助研究程序，例如深夜分娩期间的数据收集。 所有参与者都居住在哈拉雷西南部的高密度地区。 该社区居民社会经济地位相对较差，失业率较高。 大多数人通常负担不起每天 3 顿适当的膳食。 大多数家庭 (72%) 每天的生活费不足 1 美元，他们通过在房屋周围进行小规模园艺来补充饮食。 家庭住在结构和面积相似（200 平方米）的房屋中。 平均有 2-6 个家庭住在这些相对较小的房子里，在某些极端情况下，多达 5 个家庭成员共用一个房间。 供水不稳定，需要在 200-1,500 米的距离使用公共钻孔。 这种人工取水用于饮用、做饭、洗澡和冲厕所。 污水爆裂很常见，可能发生在钻孔附近。 我们四个研究地点中的两个（布迪里罗和格伦维尤）受污染的钻孔是最近 2018 年霍乱流行的中心。 与生活在同一城市低密度地区的居民相比，这些高密度地区的居民承担着不成比例的传染病和非传染性疾病负担。

样本量和统计功效 我们研究的主要终点是比较 HEU 与 HUU 婴儿两岁前的婴儿死亡率。 在津巴布韦，预计第一年有 50 名婴儿死亡，第二年有 5 名婴儿死亡。 在前 HAART 时代，是 3.2-3.9 倍 预计出生后第一年的死亡率会更高，第二年的死亡率会增加两倍。 在 HAART 时代，使用更有效的 HIV 治疗，HEU 的死亡率现在可能会得到改善，并且在保守估计中，我们假设 HEU 婴儿的死亡率在生命的头两年内增加了 2 倍。 因此，我们预计 HUU 婴儿的死亡率为 5.5%，HEU 婴儿的死亡率为 11%。 根据我们使用 G*Power3 进行的功效分析，需要 1,198 名女性的样本量才能在双侧分析中以 90% 的功效和 0.05 的显着性水平检测到这种差异。 因此，我们选择了 1,200 名母亲的样本量，其中 600 名感染了 HIV，600 名未感染 HIV。 潜在参与者是在哈拉雷市四家综合医院的任何一家的常规产前护理 (ANC) 就诊期间确定的。 向潜在参与者简要介绍了该研究，并向口头同意参与的参与者提供了用英语或翻译成当地绍纳语的参与者信息表，以确保使用参与者最了解的语言充分理解研究目标和活动。 参与是自愿的，女性有机会在研究过程中随时退出。 识字在津巴布韦几乎是普遍的，所有潜在参与者都应该能够阅读和理解知情同意书。

母亲问卷调查程序和测量 在登记时，所有母亲都回答了一份结构化问卷调查，旨在全面了解临床、行为和环境特征。 具体问题将涉及性行为和生殖健康问题，包括性传播疾病和避孕措施的使用。 将评估一般健康状况、寻求健康的行为、产妇压力和药物/草药的使用。 在 HIV 阳性母亲中，将记录 HAART 的使用和持续时间、合并症以及与 HIV 状态披露和耻辱相关的问题。

解决个人卫生、环境卫生的具体问题（厕所的类型和数量、污水处理系统）、饮用水、使用的能源类型（室内污染）、房屋类型、家庭睡觉的房间数量以及合住的人数一个单间将被要求。 将评估经济信息，包括就业情况、家庭月收入、食品安全、饮食、为食品、医疗保健、烹饪燃料和储蓄预留的钱。 农业用地或家庭资产（包括收音机、电视机、移动/固定电话、冰箱、自行车、摩托车/小型摩托车和汽车）的所有权将提供有关社会经济状况的额外信息。 进一步的问题将涉及母亲的生活方式，例如饮酒、吸烟、睡眠习惯、身体活动、家庭暴力和伴侣的支持，包括知识、信仰和做法。

身体检查和护理点测试 在登记时，研究助产士进行了全面的身体检查、血压检查、水肿评估和人体测量学。 将对所有 HIV 阳性妇女进行 WHO 临床分期。 将使用包括体重指数 (BMI) 在内的标准人体测量指标来评估营养状况。 上臂中围 (MUAC) 将用作营养不良或肥胖的指标。 MUAC 将在（肩峰和鹰嘴）之间的中点距离处测量。 南非的一项研究表明，MUAC <23 cm 预示着孕前 BMI <18.5 kg/m2。 出于实际原因，≤25 cm 的母体 MUAC 截断值将用作营养不良的标志。

让母亲至少休息 5 分钟后，将测量血压 (BP)。 使用的 Tenso MED BP 机具有至少覆盖手臂长度一半的普通或大袖带。 妊娠期高血压的定义是在妊娠期间的任何时间间隔 4 小时至少进行 2 次独立测量，血压≥140/90 mmHg。 轻中度高血压，收缩压140-159mmHg或舒张压90-109mmHg，重度高血压是指收缩压至少160mmHg或舒张压至少110mmHg。 慢性高血压定义为妊娠 20 周前诊断或在怀孕期间首次诊断并持续超过产后 12 周的高血压。 所有根据尿液试纸检测为蛋白尿的母亲都被转诊至医院进行先兆子痫调查。 先兆子痫的诊断将遵循既定标准。

母婴复诊 通过电话或短信提醒母亲即将进行的复诊。 如果参与者在预定访问的 7 天窗口期内出现，则在错过访问的情况下仍然可以收集数据。 如果母亲没有出现在他们预定的后续预约中，研究护士将严格按照母亲在登记时记录的偏好，通过电话和/或家访与她或她的近亲联系。 研究儿科医生会看到生病的婴儿。 将收集有关分娩地点、日期和方式的信息、纵向婴儿喂养做法以及有关健康、发育和环境的综合信息。 将在第 6、12、18 和 24 个月时重新进行类似于入学的广泛问卷调查。 在第 6 周之前，将对母亲及其婴儿进行身体检查，并在每次就诊时对婴儿进行身体检查。 研究程序还包括对血液、母乳和粪便进行广泛的生物采样。 每次就诊时，我们都会提供就诊的交通报销以及一些茶点。 如果母亲在没有任何原因或沟通的情况下连续未能参加至少两次连续的预定研究访问，则可能会要求母亲停止。

婴儿死亡率 本研究的主要结果是复合终点“婴儿死亡”，定义为死产（出生时胎龄≥20 周）和出生后头两年内死亡的婴儿。 新生儿死亡（0-364 天）将进一步分为三个亚组：早期新生儿死亡（0-6 天）、晚期新生儿死亡（7-27 天）和新生儿后期死亡（28-364 天）。 晚期死亡（365-730 天）也将被记录。 将分别评估 HIV 暴露和感染 (HEI)、HEU 和 HUU 婴儿的死亡率。

分娩时的不良后果包括早产。 胎龄分为早期早产≤31周、晚期早产（32-36周）、足月（至少37周）和过产（>42孕周）。 不良分娩结局包括因出生窒息或呼吸窘迫综合征而需要在出生时进行复苏。 出生窒息被定义为在新生儿出生前、出生时或出生后不久因氧气供应减少或中断而导致的任何医学状况。 其他不利结果是 5 分钟评分低的 Apgar (<7)，小于胎龄儿，即体重/身长低于胎龄的第 10 个百分位数，LBW（<2,500g，在出生后的第一个小时内称重，LBW 非常大（<1,000 g)，巨大儿（出生体重 > 4,000 克，小头畸形 < 平均值的 2 个标准差，出生缺陷（畸形，多指）和多胞胎。

婴儿生长 生长将根据 WHO 定义以 Z 分数表示：年龄别体重 (WAZ)、年龄别身高 (HAZ)、身高别体重 (WHZ) 和年龄别头围 (HCAZ) ). 生长结果将被评估为连续变量（获得的 Z 分数和访问之间 Z 分数的变化）。 此外，分类结果；中度消瘦、发育迟缓、严重发育迟缓、体重不足和小头畸形将被评估为 HAZ <-2、HAZ <-3、WAZ <-2；和 HCAZ <-2，分别。 作为婴儿生长的生物标志物，血浆胰岛素样生长因子-1 的血清水平将在 6 周龄时使用明尼阿波利斯 R&D Systems 的 ELISA 测定。

从 6 周龄开始测量婴儿 MUAC，以及 MUAC 对 0-<6 个月的 HEI、HEU 和 HUU 婴儿发育迟缓、体重不足、消瘦、贫血和不良神经发育的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值, 6-<12 个月和 12-24 个月将被确定。 WHZ 将用作消瘦的金标准。

婴儿发病率的评估 发病率日记会在分娩时发给母亲。 医疗专业人员在生病就诊或住院期间在发病日记中记录医疗报告。 这些将包括：新生儿低血糖、新生儿黄疸、婴儿贫血、皮疹、先天性感染、2 年内的垂直感染传播、任何住院治疗（频率和持续时间）、病假就诊（日期和持续时间）、有记录的当地住院治疗、发育迟缓，消瘦和异常的神经发育。 疾病发作后，跟进笔记将记录在日记中。 母亲们还将不断地主观评估婴儿的健康状况，并鼓励在日记中记录任何儿童疾病，以便进行全面记录。 日记将在 24 个月时提交给退出研究。

婴儿发育 神经发育结果将使用 Denver II 筛选工具从六周到两岁进行评估。 该工具评估粗大和精细运动能力、语言发展、社交技能、注意力持续时间、一般依从性和恐惧程度。 此外，婴儿发育里程碑（例如 出牙、第一次坐、走路或说话的时间）将被记录下来。

母体生物样本 生物样本包括全血、血浆和血清、尿液和母乳将在所有访问中收集；粪便、脐带血、羊水和胎盘是在分娩时收集的。 敏感样品（粪便、牛奶、尿液）在处理前将在 4°C 下放置不超过 4 小时。 所有样品将在采集后最多 6 小时内储存在 -80°C 的生物库中。

将使用直接湿式显微镜和甲醚浓缩技术筛选母体粪便样本中的肠道原生动物和蠕虫滋养体和虫卵。

母体全血计数的测定 为了评估全血计数 (FBC)，静脉血将通过真空采血管系统收集在 5ml 乙二胺四乙酸 (EDTA) 管中，并使用 Mindray© 血液学三部分差异分析，16 个参数 BC3600 分析仪，中国使用全血。 将使用 WHO 对妊娠期贫血诊断的定义（血红蛋白浓度 <11.0 g/dl。） 婴儿血液样本 将尽可能在 7-10 天时收集婴儿静脉血用于 FBC。 只要有可能，血浆样本就会被储存起来。 采集的血液量将在推荐量内，具体取决于婴儿的体重（即 在 24 小时内≤总血容量的 1-5%，在 8 周内≤10%）。 根据临床评估，重病婴儿和疑似严重贫血的婴儿将不会采血。 每次就诊时将使用全血样本或脚跟针刺穿刺来收集干血点。 将收集 3-5 滴血液并在 Whatman 滤纸上干燥并储存在 -80°C 下。

母体血糖水平 使用迈瑞 BS200 化学分析仪（中国迈瑞）对入组的一组女性进行血清非空腹随机血糖水平筛查妊娠糖尿病，包括糖化血红蛋白 (HbA1c) 水平。 根据 WHO 指南，HbA1c 的截止值为 6.5% 将确定未确诊的糖尿病，而 HbA1c ≥5.6% 将标志着未来患糖尿病的风险增加。

将使用德国贝克曼库尔特 AU680 化学分析仪对母亲的血清样本进行肌酐、尿素和电解质（钠、钾和氯化物）的母体肾脏和肝功能概况分析。 肌酐水平将用于估计母体肾小球滤过率，使用改良的肾脏疾病饮食方程。 将使用血清白蛋白、纤维蛋白原、胆红素、乳酸脱氢酶 (LDH)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、碱性磷酸酶 (ALP) 和γ谷氨酰转移酶 (GGT) 评估肝功能和胆汁淤积。

如果有足够的材料，将对所有 6 个月和 24 个月大的婴儿进行婴儿肝肾功能测试评估。

母体脂质和骨骼概况 高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)、总胆固醇 (TC) 和 TC/HDL-C 基线比率将在入组时和 24 个月时使用血清确定跟进。 当浓度低于 4.4 mmol/L 时，将使用 TC 计算 LDL-C。 对于母体骨骼概况，将对妊娠期和断奶时的血清离子钙、磷、白蛋白和 ALP 水平进行纵向测量。

HIV 的孕产妇诊断 将根据津巴布韦国家 HIV 检测和咨询指南，使用系列检测算法进行 HIV 感染的孕产妇筛查。 定性快速免疫层析分析、Standard Diagnostics (SD) Bioline HIV-1/2 3.0（SD Inc., Kyonggi-Do, South Korea）正用于初步筛查。 使用 Alere DetermineTM HIV-1/2 试剂盒（Abbott Diagnostics，美国）确认阳性测试。 Western blotting 被用于不确定的测试结果。 将每隔 6 个月重复对未感染 HIV 的母亲进行 HIV 检测，以确定血清转化者。

婴儿 HIV 的诊断 在所有暴露于 HIV 的婴儿中，根据制造商的说明使用 COBAS1 AmpliPrep/COBAS1 TaqMan1 HIV-1 定性测试（罗氏分子系统）进行 HIV 的早期检测。 从分娩到断奶或诊断出 HIV 感染，每次访问都要进行测试。

HIV-1 RNA 载量量化根据制造商的说明，将分别使用自动 TaqMan Cobas AmpliPrep Roche Diagnostics, Branchburg NJ) 对母体和婴儿血浆样品在入组时和 24 个月时的 HIV-1 RNA 载量进行量化。 该测定的检测下限为 20 拷贝/mL。

母婴免疫状态的评估 在登记时和每隔 12 个月使用德国 Partec Cyflow 计数器对所有 HIV 阳性的 EDTA 血液样本中的母亲绝对 CD4+ T 淋巴细胞计数进行计数。 分析将在采血后 6 小时内进行。

HAART 水平 不同母体隔室（包括血浆、母乳、尿液和羊水）中依法韦仑、拉米夫定和替诺福韦的水平将使用高效液相色谱法进行测量。

母体合并感染的评估 所有母亲和所有暴露婴儿的 HBV 筛查将通过测量 HBV 表面抗原 (HBsAg) 进行，抗 HBsAg 和抗核心抗体将根据制造商的说明使用美国 Pointecare Diagnostics 免疫层析试剂盒进行检测. 在使用 QIAamp MinElute Virus Spin Kit Germany 分离病毒 DNA 后，将使用 RealStar CMV PCR 试剂盒 v1.0 Germany 测量母体血清 CMV DNA 载量和先天性 CMV。

将评估所有暴露婴儿的婴儿干血斑的感染标志物、CMV、HBV、HCV 和 HIV。 抗梅毒螺旋体抗体同种型将用于使用 SD Bioline 3.0 定性免疫层析试剂盒进行母体梅毒分析。 快速血浆反应素 (RPR) 测试将用于检测含有微粒碳的性病研究实验室 (VDRL) 抗原。 将使用 SD Bioline 3.0 定性免疫层析试剂盒对 24 个月大的暴露婴儿的婴儿血浆进行梅毒血清学检测。

HIV 易感性和合并感染的免疫遗传学 人类白细胞抗原 (HLA) 和杀伤细胞免疫球蛋白样受体 (KIR) 分型将使用 DNA 测序和序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR) 对母婴 DNA 样本进行分型之前描述过。 HLA 和 KIR 变体将与母体病毒学状态、免疫状态和临床结果相关联。

婴儿对 EPI 疫苗的体液免疫反应 HEU 婴儿对传染病免疫力的相关性仍然知之甚少。 麻疹、风疹、轮状病毒、脊髓灰质炎病毒、乙型肝炎病毒 (HBV)、白喉、破伤风类毒素、百日咳、肺炎球菌和 b 型流感嗜血杆菌 (Hib) 的抗体滴度将使用基于 ELISA 的商业方法进行测量。 将在 12、18 和/或 24 个月接种疫苗后进行测量。 与保护相关的血清滴度（例如 将在 HUU、HEI 和 HEU 婴儿中评估抗轮状病毒免疫球蛋白 A ≥20 U/mL。

婴儿特应性表现和致敏的评估 SSA 中对特应性皮炎的原因和发生时间的描述仍然很少。 妊娠晚期的母亲过敏状况将通过一份关于母亲饮食的详细问卷进行评估，包括食物渴望、母亲药物使用以及过敏和肠道症状。 从分娩开始，研究助产士或研究护士将对所有婴儿进行身体检查，看是否存在特应性皮炎，其定义为存在发痒的皮疹和/或可见的弯曲性皮炎。 尿布疹、眼睛周围的皮疹和/或头皮脱屑将不被视为湿疹的诊断。 将在免疫分析仪（Thermofisher，弗莱堡，德国）上测量选定婴儿血液样本中的总血清免疫球蛋白 E (IgE) 和特异性血清免疫球蛋白 E (IgE)，以支持如前所述的特应性疾病的临床诊断。 具体而言，将评估针对鸡蛋、牛奶、花生、空气过敏原、草花粉、猫、狗皮屑和屋尘螨的 IgE 抗体。 针对一种或多种测试食物或吸入性过敏原的特定血清 IgE 水平 >0.3 IU/ml 的婴儿将被视为致敏。 食物过敏将与婴儿发病率、产前药物使用和营养相关，包括母亲在怀孕期间渴望的食物。

子研究总结

1. 肠道微生物群子研究该子研究旨在评估 HIV 感染和 HAART 的使用如何影响肠道微生物群的成熟，以了解环境肠道功能障碍 (EED. 从怀孕到 24 个月的连续母婴粪便样本将用于执行 16 个小亚基 (S) 核糖体核糖核酸 (rRNA) 测序，以评估具有≥97% 序列同一性的门和操作分类单元组成，以及微生物多样性。 在选定的样本中，将进行细菌全基因组宏基因组鸟枪法测序，以确定微生物群的代谢潜力。 此外，将对代谢组进行质谱分析，包括评估微生物易位穿过受损肠壁的标记物，例如脂多糖 (LPS) 和内毒素核心抗体 (EndoCAb) 以及作为肠细胞标记物的肠脂肪酸结合蛋白 (I-FABP)损害。 微生物群和代谢物标记物将与婴儿的生长、发育和对传染病的易感性相关。
2. 免疫代谢组学子研究 该子研究旨在通过 Luminex 技术使用基于 ELISA 的多重检测来研究至少 24 种血浆炎症免疫激活标记物，作为 HIV 感染妇女不良妊娠结局和随后婴儿生长发育受损的风险因素。 对于这项研究，我们将选择≥50 名长期（>7 个月）、中期（1-7 个月）和无/短期（无或<1 个月）HAART 暴露且未感染的 HIV 感染女性女性作为对照。 为了评估代谢组和线粒体功能障碍，质谱技术将用于测量各种代谢物，包括氨基酸、活性氧、甘油三酯、甘油二酯、胆固醇、磷脂、脂肪酸、过氧化脂质和氧脂。
3. 细胞介导的免疫子研究 我们假设 NK 细胞数量和功能的改变可能发生在 HEU 婴儿身上，并使他们易患与持久性病毒相关的严重感染和恶性肿瘤。 在血容量≥2 mL 的婴儿中，我们将从 HUU 和 HEU 婴儿的外周血中分离单核细胞，并在 24 个月时进行短期、中期和长期母体 HAART 暴露，以确定 T 细胞和 NK 的数量和功能如前所述的细胞。
4. 潜伏性结核合并感染子研究 我们假设未确诊的潜伏性结核可以部分解释资源匮乏地区婴儿死亡率增加的原因。 TST 已用于筛查潜伏性结核病；然而，由于与津巴布韦常规接种的 BCG 疫苗相互作用，我们研究人群中的 TST 特异性可能会大大降低。 TB, IGRAs) 将用于测试怀孕和分娩后 6 周的亚组妇女的潜伏性结核病，并根据 TST 进行评估。 此外，将检测胎盘样本是否存在提示结核炎症的组织学损伤。 IGRAs 测量值和 TST 病变的大小与母婴不良结局相关。
5. 产妇压力子研究 这将使用入学时和分娩后 6 周的感知压力问卷评估产妇压力的普遍性、风险因素和应对机制。
6. HIV/HAART 暴露和神经发育结果 该子研究正在使用 Mullen 工具在 12 个月和 24 个月评估与 HIV 感染和延长 HAART 暴露相关的潜在长期神经发育后遗症。

未来的研究可能会跟踪婴儿进入青春期。 需要一个平行的农村观察队列来控制与当前基于城市的研究相关的家庭和环境混杂因素。