Zimbabwen yliopiston terveystieteiden korkeakoulu (UZ-CHS) BIRTH COHORT -tutkimus (UZ-CHS-BC)

HIV-1-tartunnan saaneille naisille syntyy Saharan eteläpuolisessa Afrikassa vuosittain yli miljoona vauvaa. Zimbabwessa syntyy vuosittain 379 000 lasta, ja noin 48 000 vauvaa syntyy vuosittain HIV-1-tartunnan saaneille naisille, jotka saavat elinikäistä erittäin aktiivista antiretroviraalista hoitoa (HAART). On ilmaistu huolta HIV-1-tartunnan saaneille naisille syntyneiden HIV-1:lle altistuneiden mutta ei-tartunnan saaneiden (HEU) imeväisten yleisestä terveydestä ja kehityksestä. Huolimatta siitä, että he ovat HIV-negatiivisia, HEU-lasten kuolleisuus on 3,9-kertainen ja HIV-tartunnan saamattomien (HUU-vauvojen) kuolleisuus ensimmäisen ja toisen elinvuoden aikana 2,0-kertainen. HUU-kolvereihinsa verrattuna HEU-lapsilla voi olla haitallisia synnytystuloksia, heikentynyttä kasvua, kehitystä ja muita terveysongelmia. Tämä on merkittävä kansanterveysongelma, sillä aikuisiässä alhaisen syntymäpainon (LBW) syntyneet lapset kuolevat todennäköisemmin ei-tarttuviin sairauksiin, kuten verenpaineeseen, aivohalvaukseen ja tyypin 2 diabetekseen. Zimbabwessa HEU-vauvoja on tutkittu hyvin HAART-aikakaudella; nykyiset todisteet kuitenkin puuttuvat. Lisäksi aiemmat tutkimukset eivät ole luonnehtineet naisia ​​raskaana, eikä tuloksia ole kontrolloitu muiden yleisten synnytystä edeltävien tartuntatautien aiheuttajien osalta, mukaan lukien lisäriskitekijät, kuten ennenaikainen synnytys, LBW, imetyksen kesto, köyhyys ja äidin psykososiaaliset stressitekijät. Siksi syvällistä ja kattavaa HEU-vauvojen karakterisointia tarvitaan paitsi HIV-tartunnan välttämiseksi myös altistuneiden lyhyen ja pitkän aikavälin terveysvaikutusten parantamiseksi.

HAART-riskit raskauden aikana Zimbabwessa HIV-tartunnan saaneiden naisten nykyinen hoitostandardi HIV-tartunnan estämiseksi äidiltä lapselle (MTCT) koostuu tenofoviirista, lamivudiinista ja efavirentsistä (TENOLAM-E). Antiretroviraaliset lääkkeet voivat kuitenkin kertyä lapsiveteen, mikä aiheuttaa riskin herkän alkion ja sikiön kehityksen aikana. HAART-hoidon ajoitus saattaa myös olla tärkeä, koska Etelä-Afrikan tutkimus osoitti, että äideillä, jotka aloittivat tsidovudiinipohjaisen HAART-hoidon ennen hedelmöittymistä, oli kaksinkertainen ennenaikaisen synnytyksen todennäköisyys verrattuna äideillä, jotka aloittivat HAART-hoidon hedelmöittymisen jälkeen. HIV-lääkkeiden myrkyllisiä mekanismeja ovat mitokondriotoksisuus ja mitokondrioiden DNA-mutaatiot äideillä ja mahdollisesti myös vauvoilla. Mitokondrioiden toimintahäiriö puolestaan ​​lisää reaktiivisten happilajien tuotantoa ja IL-1:n tuotannon aktivoitumista. Lipidiaineenvaihdunnan häiriöt ovat toinen HAART-toksisuuden mekanismi. Varhainen altistuminen efavirentsipohjaiselle HAART:lle on yhdistetty hermoston kehitykseen ja sosioemotionaalisiin haasteisiin, jotka voivat johtaa käyttäytymishäiriöihin. Lisäksi jatkuvat infektiot, sosioekonomisen aseman haitalliset vaikutukset ja äidin ravinnon saasteet, kuten dioksiinit tai klooratut torjunta-aineet, voivat myös vaikuttaa asiaan.

Syyt HEU-vauvojen havaittuihin haitallisiin terveysvaikutuksiin voivat liittyä muuttuneeseen immuunijärjestelmän tilaan. HEU-lasten yli vuoden immuuniprofiilit ovat kuitenkin suurelta osin tutkimatta. Zimbabwessa vauvojen aktiivisen immunisoinnin rokotuskampanjoita edistetään laajennetun immunisointiohjelman (EPI) kautta. Vaikka joidenkin EPI-rokotteiden jälkeiset vasta-ainehuiput ovat normaaleja HEU-vauvoilla, näiden immuunivasteiden kestävyydestä ei ole tehty tutkimuksia. In utero HIV-altistuminen lisää istukan solujen tuottamien tulehdusta edistävien sytokiinien tasoa. Rinnakkaisinfektiot näyttävät olevan tärkeitä, koska Kenian HEU-vastasyntyneillä (joilla on suuri määrä äidin rinnakkaisinfektioita) oli korkeammat plasman tulehdukselliset markkerit kuin Yhdysvalloissa tehdyissä tutkimuksissa saaduilla HEU-kontrolleilla. Lisäksi HEU-vauvoilla on korkeampi CMV-kuorma, joka voi johtua osittain äidin viremiasta ja voi edistää immuuniaktivaatiota. Siten HEU-vauvoilla on edelleen lähtötilanteessa tulehdus, joka voidaan yhdistää huonoihin lyhyen ja pitkän aikavälin tuloksiin ja anti-inflammatoriset interventiot voivat parantaa vauvan terveyttä. Interventiotutkimukset HAART-hoidolla raskaana olevilla naisilla ovat eettisesti haastavia; HAART:n vaikutusta neuro-/immuunikehitykseen voitiin kuitenkin arvioida tutkimuksissa, kuten UZ-CHS-syntymäkohortti, jossa useammin taloudellisten haasteiden vuoksi äidit kirjaavat myöhään synnytystä varten ja jotkut ovat naiiviita HAART-hoidossa kolmannella kolmanneksella. Näyttöä HAART-altistumisen riskistä vaihtoehdon B+ aikakaudella HEU-vauvojen lyhyen ja pitkän aikavälin tuloksista on edelleen rajallisesti. Tietojemme mukaan mikään tutkimus ei kuitenkaan ole korreloinut HAART-tasoja äidin lapsivedessä, virtsassa, plasmassa ja pitkittäisrintamaidossa ja liittynyt haitallisiin raskaustuloksiin, vauvan kasvuun, aineenvaihduntaan ja (immuuni/hermosto) kehitykseen.

Menetelmät Zimbabwen yliopiston terveystieteiden korkeakoulun (UZ-CHS) syntymäkohorttitutkimus on prospektiivinen havainnollinen kohorttitutkimus, jossa verrataan vauvoja, jotka ovat syntyneet HIV-tartunnan saaneille ja HIV-tartunnan saamattomille naisille Hararen perusterveydenhuollon poliklinikan läntisten esikaupunkien vähäresursseissa. . 1 200 raskaana olevaa naista (600 HIV-tartunnan saanutta äitiä ja 600 HIV-tartunnan saamatonta verrokkia) kolmannella kolmanneksella osallistui tammikuun 2016 ja kesäkuun 2019 välisenä aikana. Osallistujia seurataan äiti-vauva-pareina syntyessään 10 päivän sisällä 6, 10, 14, 24, 48, 72 ja 96 viikon iästä. Jokaisella käynnillä arvioidaan terveyttä ja ympäristötekijöiden vaikutuksia kliinisillä tutkimuksilla. Lisäksi suoritetaan kyselylomakkeita ja bionäytteitä laboratoriotutkimuksiin. Tutkimuksen suunnittelu on ei-interventiivinen kohortti, mutta osallistujille tarjotaan neuvoja terveyteen ja hygieniaan liittyen.

Tutkimuksen tarkoitus Tässä tutkimuksessa pyritään tutkimaan äidin HIV-statuksen, kumulatiivisen HAART-altistuksen vaikutusta kohdussa ja koko imetyksen ajan, immuunisuppression ja immuunijärjestelmän aktivoitumisen sekä ympäristömuuttujien vaikutusta imeväisten lyhyt- ja pitkän aikavälin tuloksiin niukassa ympäristössä. Tutkimuksemme keskittyy HEU-vauvojen kuolleisuuteen ja sairastumiseen testaamalla aiempien kohorttien todettuja riskitekijöitä. Dataa ja biomateriaaleja kerätään prospektiivisesti äideiltä ja vauvoista raskaudesta 2-vuotiaaksi ja verrataan HEU:ta saman yhteisön HUU-vauviin. Kattavassa arvioinnissa äidin sosioekonomisen aseman rooli, kotitalouden tekijät, liitännäissairaudet, mukaan lukien jatkuvat virukset, kuten sytomegalovirus (CMV), hepatiitti b/c (HBV)/(HCV), bakteeritaudit, kuten kuppa ja tuberkuloosi. (TB), suoliston helmintit, uudet sairaudet, kuten raskausdiabetes (GDM) ja verenpainetaudit sekä äidin ravitsemustila raskauden tuloksista, imeväiskuolleisuudesta ja kehityksestä, immuniteetista ja terveydestä, testataan. UZ-CHS tarjoaa mahdollisuuden luoda referenssialueita, joita tällä hetkellä ei ole saatavilla, erilaisille raskaana olevien naisten alaryhmille, joilla on myönteinen raskaustulos kliiniseen käyttöön tuleville potilaille.

Opiskelupaikat ja kuntien sitoutuminen Hararen kunta on perustanut 12 poliklinikkaa, joista kukin koostuu perusterveydenhuollon, äitiyshoidon, synnytyksen jälkeisen hoidon yksiköistä ja perheterveyspalveluista. Lääketieteellisiin palveluihin kuuluu HIV-neuvonta ja pikatestaus sekä HAART-hoidon aloittaminen ja antaminen. Myös muiden kroonisten sairauksien, kuten GDM:n ja valtimotaudin, seurantaa ja seurantaa tarjotaan. Lääkäri käy kahdesti viikossa per paikka hoitamassa vaikeita tapauksia. Äitiyspalvelut sisältävät synnytyshoidon, seurantakäynnit sekä HIV- ja kuppaseulonnan ja -hoidon. Äidille maksaa 25 US$ päästä synnytystä edeltäviin palveluihin 10 päivää synnytyksen jälkeen, kun taas terveyspalvelut ovat ilmaisia ​​lapselle 5 vuoden ikään asti. Äitejä kehotetaan varaamaan aikaisin raskauden aikana (viikolla 4-12) ja tekemään HIV-testi yhdessä puolisonsa kanssa. Tällä hetkellä suurin osa raskaana olevista naisista käy sosiaalis-taloudellisista haasteista johtuen poliklinikoilla synnytystä edeltävässä ilmoittautumisessa, kun heidän raskauksensa on jo edennyt, tilanne, joka asettaa heidän syntymättömät lapsensa HIV-tartuntariskiin, ja näin köyhyyden ja HIV-tartunnan noidankehä jatkuu. Esitutkimuspaikan toteutettavuusarvioinnin jälkeen 12 poliklinikasta Kuwadzana, Dzivaresekwa (Rujeko), Glenview ja Budiriro valittiin äitien ja lasten terveydenhuoltopalvelujen suuremman määrän, HIV-positiivisuuden esiintymistiheyden ja kilpailevien tutkimusten puuttumisen perusteella. sama väestö. Valittujen neljän poliklinikan vaikutusalueilla on suhteellisen vakaat yhteisöt, jotka eivät usein vaihda vuokra-asuntoaan. Näiden laitosten kunnalliset sairaanhoitajat ja kätilöt auttavat opiskelutoimenpiteissä, kuten tiedonkeruussa myöhään yöllä tapahtuvissa synnytyksen aikana. Kaikki osallistujat asuvat Lounais-Hararen tiheästi asutuilla alueilla. Tämän yhteisön asukkailla on suhteellisen huono sosioekonominen asema ja korkea työttömyysaste. Useimmilla ihmisillä ei yleensä ole varaa kolmeen sopivaan ateriaan päivässä. Suurin osa perheistä (72 %) elää alle 1 dollarilla päivässä ja täydentää ruokavaliotaan pienimuotoisella puutarhanhoidolla talojensa ympärillä. Perheet asuvat rakenteellisesti ja samankokoisissa taloissa (200 neliömetriä). Näissä suhteellisen pienissä taloissa asuu keskimäärin 2-6 perhettä ja joissakin ääritilanteissa jopa 5 perheenjäsentä jakaa yhden huoneen. Veden saanti on epäsäännöllistä, mikä edellyttää yhteisten porausreikien käyttöä 200-1500 metrin etäisyydellä. Tätä käsin haettua vettä käytetään juomiseen, ruoanlaittoon, kylpemiseen ja wc-huuhtelemiseen. Jätevesipurkaukset ovat yleisiä, ja niitä voi esiintyä porausreikien lähellä. Saastuneet porausreiät kahdessa neljästä tutkimuspaikastamme, Budirirossa ja Glenviewssa, ovat olleet vuoden 2018 koleraepidemian keskus. Näiden tiheästi asuttujen alueiden asukkailla on suhteettoman suuri taakka sekä tartuntataudeista että ei-tarttuvista taudeista verrattuna saman kaupungin harvaan asutuilla alueilla asuviin.

Otoskoko ja tilastollinen teho Tutkimuksemme ensisijainen päätepiste on kahden vuoden ikään asti HEU:n ja HUU-vauvojen imeväiskuolleisuuden vertailu. Zimbabwessa odotetaan 50 vauvakuolemaa ensimmäisenä vuonna ja 5 vauvakuolemaa toisena elinvuotena. HAARTia edeltäneellä aikakaudella 3,2-3,9-kertainen korkeampi kuolleisuus ensimmäisenä elinvuotena ja kaksinkertainen kuolleisuus toisena elinvuotena. HEU-kuolleisuus HAART-aikakaudella tehokkaammalla HIV-hoidolla saattaa nyt parantua, ja konservatiivisen arvion mukaan oletimme kaksinkertaisen kuolleisuuden HEU-vauvojen kahden ensimmäisen elinvuoden aikana. Siksi odotimme 5,5 %:n kuolleisuuden HUU-vauvoilla ja 11 %:n HEU-vauvoilla. G*Power3:a käyttävän tehoanalyysimme mukaan tällaisen eron havaitsemiseen tarvittiin 1 198 naisen otos, jonka teho oli 90 % ja merkitsevyystaso 0,05 kaksipuolisessa analyysissä. Siksi valitsimme otoskoon 1 200 äitiä, joista 600 oli HIV-tartunnan saaneita ja 600 ei ilman HIV-infektiota. Mahdolliset osallistujat tunnistettiin rutiininomaisten synnytystä edeltävien hoitojen (ANC) käyntien aikana missä tahansa neljästä Hararen kaupungin poliklinikasta. Mahdollisille osallistujille kerrottiin tutkimuksesta ja suullisesti osallistuneille annettiin osallistujatietolomake joko englanniksi tai käännettynä kansankielelle shona-kielelle, jotta varmistetaan tutkimuksen tavoitteiden ja toimintojen täydellinen ymmärtäminen sillä kielellä, jota osallistuja ymmärtää parhaiten. Osallistuminen on vapaaehtoista ja naisilla on mahdollisuus vetäytyä milloin tahansa tutkimuksen aikana. Lukutaito on lähes yleistä Zimbabwessa, ja kaikkien mahdollisten osallistujien tulisi pystyä lukemaan ja ymmärtämään tietoinen suostumuslomake.

Äitien kyselylomakkeet ja mittaukset Ilmoittautuessaan kaikki äidit vastasivat strukturoituun kyselyyn, jonka tavoitteena oli kattava kliininen, käyttäytymis- ja ympäristökuvaus. Erityiskysymyksissä käsitellään seksuaalista käyttäytymistä ja lisääntymisterveyttä koskevia kysymyksiä, mukaan lukien sukupuolitaudit ja ehkäisyn käyttö. Arvioidaan yleisterveyttä, terveyttä tavoittelevaa käyttäytymistä, äidin stressiä ja huumeiden/yrttien käyttöä. HIV-positiivisilla äideillä kirjataan HAART:n käyttö ja kesto, rinnakkaissairaudet sekä HIV-statuksen paljastamiseen ja leimaamiseen liittyvät ongelmat.

Käsitelläkseen hygieniaa koskevia erityiskysymyksiä, jotka koskevat sanitaatiota (wc-tilojen tyyppi ja lukumäärä, viemärijärjestelmä), juomavettä, käytetyn energian tyyppiä (sisäsaaste), talotyyppiä, perheen nukkumiseen käyttämien huoneiden lukumäärää ja jakavien henkilöiden lukumäärää yhden hengen huone kysytään. Arvioidaan taloudellista tietoa, joka sisältää työllisyystilanteen, perheen kuukausitulot, ruokaturvan, ruokavalion, ruokaan varatut varat, terveydenhuollon, ruoanlaittopolttoaineen ja säästöt. Maatalousmaan tai kotitalousomaisuuden, mukaan lukien radiot, televisiot, matkapuhelimet/kiinteät puhelimet, jääkaapit, polkupyörät, moottoripyörät/skootterit ja autot, omistus antaa lisätietoja sosiaalis-taloudellisesta asemasta. Lisäkysymykset koskevat äidin elämäntyyliä, kuten alkoholin käyttöä, tupakointia, nukkumistapoja, fyysisiä aktiviteetteja, perheväkivaltaa ja kumppanin tukea, mukaan lukien tiedot, uskomukset ja käytännöt.

Fyysinen tarkastus ja hoitopistetestaus Ilmoittautuessaan tutkimuskätilö suoritti täyden fyysisen tutkimuksen, verenpaineen mittaukset, turvotuksen arvioinnin ja antropometrian. WHO:n kliininen vaiheistus tehdään kaikille HIV-positiivisille naisille. Ravitsemustilan arviointi tehdään käyttämällä tavanomaisia ​​antropometrisiä indeksejä, mukaan lukien painoindeksi (BMI). Keskiolkavarren ympärysmitta (MUAC) käytetään aliravitsemuksen tai liikalihavuuden indikaattorina. MUAC mitataan keskipisteen etäisyydeltä (acroionin ja olecranon. Eteläafrikkalainen tutkimus osoitti, että MUAC <23 cm, ennusti ennen raskautta BMI:ksi <18,5 kg/m2. Käytännön syistä aliravitsemuksen merkkinä käytetään äidin MUAC-rajaa ≤ 25 cm.

Verenpaine (BP) mitataan sen jälkeen, kun äidille on annettu vähintään 5 minuutin lepo. Käytössä on Tenso MED BP -kone, jossa on normaali tai suuri mansetti, joka peittää vähintään puolet käsivarren pituudesta. Raskaudenaikainen hypertensio määritellään verenpaineella ≥140/90 mmHg vähintään kahdella erillisellä mittauksella 4 tunnin välein, milloin tahansa raskauden aikana. Lievä tai kohtalainen hypertensio systolisella verenpaineella 140-159 mmHg tai diastolisella paineella 90-109 mmHg vakavalla verenpainetaudilla tarkoittaa systolista verenpainetta vähintään 160 mmHg tai diastolista verenpainetta vähintään 110 mmHg. Krooninen verenpainetauti määritellään hypertensioksi, joka diagnosoidaan joko ennen 20 raskausviikkoa tai ensimmäisen kerran raskauden aikana ja jatkuu yli 12 viikkoa synnytyksen jälkeen. Kaikki äidit, joilla on virtsan mittatikkuihin perustuva proteinuria, lähetetään sairaalaan preeklampsian tutkimuksiin. Preeklampsian diagnoosi tehdään vahvistettujen kriteerien mukaisesti.

Äiti- ja vauvaseurantakäynnit Äitejä muistutetaan tulevista seurantakäynneistä puhelimitse tai tekstiviestillä. Tietoja voidaan edelleen kerätä myöhästyneiden käyntien tapauksista, mikäli osallistuja saapuu paikalle seitsemän päivän sisällä suunnitellusta vierailusta. Jos äiti ei saavu sovituille seuranta-ajoille, lähiomaiseen yritetään ottaa yhteyttä puhelimitse ja/tai tutkimushoitajan kotikäyntejä tehdään tiukasti ilmoittautumisen yhteydessä dokumentoitujen äidin mieltymysten mukaan. Sairaat vauvat tulevat tutkimukseen lastenlääkäri. Kerätään tietoa toimituspaikasta, -päivästä ja -tavasta, pitkittäisruokintakäytännöistä sekä kattavaa tietoa terveydestä, kehityksestä ja ympäristöstä. Laajat kyselylomakkeet, jotka muistuttavat ilmoittautumista, täytetään uudelleen 6, 12, 18 ja 24 kuukauden iässä. Äideille ja heidän vauvoilleen tehdään fyysinen tarkastus äideille viikkoon 6 asti ja vauvoille jokaisella käynnillä. Tutkimustoimenpiteisiin kuuluu myös laaja bionäytteenotto verestä, rintamaidosta ja ulosteesta. Jokaisella käynnillä maksetaan kuljetuskorvaus klinikalla käymisestä sekä virvokkeita. Äitiä voidaan pyytää keskeyttämään, jos hän ei peräkkäin saavu vähintään kahdelle peräkkäiselle suunniteltuun opintokäyntiin ilman syytä tai yhteydenottoa.

Imeväiskuolleisuus Tämän tutkimuksen keskeinen tulos on yhdistetty päätetapahtuma "lapsekuolema", joka määritellään kuolleena syntyneeksi (raskausikä syntyessä ≥ 20 viikkoa) ja vauvat, jotka kuolevat kahden ensimmäisen elinvuoden aikana. Vastasyntyneiden kuolemat (0–364 päivää) jaetaan edelleen kolmeen alaryhmään: varhainen vastasyntyneiden kuolema (0–6 päivää), myöhäinen vastasyntyneiden kuolema (7–27 päivää) ja vastasyntyneen jälkeinen kuolema (28–364 päivää). Myös myöhäiset kuolemat (365-730 päivää) kirjataan. Hiv-altistuneiden ja -tartunnan saaneiden (HEI), HEU- ja HUU-vauvojen kuolleisuus arvioidaan erikseen.

Synnytyksen haitallisia seurauksia ovat ennenaikainen synnytys. Raskausikä jaetaan varhaiseen keskosuuteen ≤31 viikkoa, myöhäiseen keskosuuteen (32-36 viikkoa), aikaiseen (vähintään 37 viikkoa) ja jälkeiseen synnytykseen (>42 raskausviikkoa). Haitallisia synnytystuloksia ovat synnytyksen elvytyksen tarve synnytyksen tukehtumisen tai hengitysvaikeusoireyhtymän vuoksi. Synnytyksen asfyksia määritellään sairaudeksi, joka johtuu vastasyntyneen hapensyötön vähenemisestä tai keskeytyksestä ennen syntymää, sen aikana tai pian sen jälkeen. Muita haitallisia seurauksia ovat alhainen Apgar 5 minuutin kohdalla (<7), pieni gestaatioikään nähden, eli paino/pituus alle 10. persentiilin raskausiän osalta, LBW (<2500 g, punnitaan ensimmäisen elämäntunnin aikana, erittäin LBW (<1000) g), sikiön makrosomia (syntymäpaino > 4 000 g, mikrokefalia < 2 SD keskiarvosta, synnynnäiset epämuodostumat (epämuodostumat, ylimääräiset sormet) ja monisikiö).

Vauvan kasvu ilmaistaan ​​Z-pisteinä WHO:n määritelmien mukaisesti: Ikäpaino (WAZ), pituus-ikä (HAZ), paino-pituus (WHZ) ja pään ympärysmitta iän mukaan (HCAZ) ). Kasvutuloksia arvioidaan jatkuvina muuttujina (saavutettu Z-piste ja muutos Z-pisteissä käyntien välillä). Lisäksi kategoriset tulokset; kohtalainen laihtuminen, stunting, vakava stunting, alipaino ja mikrokefalia arvioidaan HAZ <-2, HAZ <-3, WAZ <-2; ja HCAZ <-2. Vauvan kasvun biologisena merkkiaineena plasman insuliinin kaltaisen kasvutekijä 1:n seerumitasot määritetään 6 viikon iässä käyttämällä ELISA-testejä, R&D Systems, Minneapolis.

Vauvan MUAC mitataan 6 viikon iästä alkaen ja MUAC:n herkkyys, spesifisyys, positiivinen ennustearvo ja negatiiviset ennustearvot 0–<6 kuukauden ikäisten HEI-, HEU- ja HUU-vauvojen stunting, alipainon, laihtumisen, anemian ja haitallisen hermoston kehityksen osalta. , 6-<12 kuukautta ja 12-24 kuukautta määritetään. WHZ:tä käytetään tuhlauksen kultastandardina.

Arvio imeväisten sairastuvuudesta Sairauspäiväkirjat laaditaan äideille synnytyksen yhteydessä. Lääketieteen ammattilaiset dokumentoivat lääketieteelliset raportit sairastuvuuspäiväkirjaan sairaskäyntien tai sairaalahoidon aikana. Näitä ovat: vastasyntyneen hypoglykemia, vastasyntyneen keltaisuus, lapsen anemia, ihottumat, synnynnäiset infektiot, infektion leviäminen pystysuorassa 2 vuoden aikana, mahdollinen sairaalahoito (tiheys ja kesto), sairaskäynnit (päivämäärät ja kesto), dokumentoidut paikalliset sairaalahoidot, stunting , kuihtuminen ja epänormaali hermoston kehitys. Sairausjaksojen jälkeen seurantamerkinnät kirjataan päiväkirjaan. Äidit myös arvioivat jatkuvasti subjektiivisesti vauvojen hyvinvointia ja rohkaistaan ​​kirjaamaan kaikki lasten sairaudet päiväkirjaan kattavaa dokumentointia varten. Päiväkirja toimitetaan tutkimukseen poistuttaessa, 24 kuukauden kuluttua.

Vauvan kehitys Neurokehityksen tuloksia arvioidaan kuudesta viikosta kahden vuoden ikään Denver II -seulontatyökalun avulla. Tämä työkalu arvioi karkea- ja hienomotorisia kykyjä, kielen kehitystä, sosiaalisia taitoja, keskittymiskykyä, yleistä mukautumiskykyä ja pelkoa. Lisäksi vauvan kehityksen virstanpylväät (esim. hampaiden syntymisaika, ensimmäinen istuma, kävely tai puhuminen) tallennetaan.

Äidin bionäytteet Biologisia näytteitä, mukaan lukien kokoveri, plasma ja seerumi, virtsa ja rintamaito, otetaan kaikilla käynneillä. uloste, napanuoraveri, lapsivesi ja istukka kerätään synnytyksen yhteydessä. Herkät näytteet (uloste, maito, virtsa) sijoitetaan 4 °C:seen enintään 4 tunniksi ennen käsittelyä. Kaikki näytteet säilytetään biopankissa -80°C:ssa enintään 6 tunnin sisällä hankinnasta.

Äidin ulostenäytteistä seulotaan suoliston alkueläimet ja helmintit, trofosoiitit ja munasolut käyttämällä suoraa märkämikroskopiaa ja formal-eetterikonsentraatiotekniikkaa.

Äidin täysverenkuvan määritys Täyden verenkuvan (FBC) arvioimiseksi laskimoveri kerätään 5 ml:n etyleenidiamiinitetraetikkahappoa (EDTA) oleviin putkiin vacutainer-järjestelmällä ja analysoidaan Mindray© Hematology 3-osaisella differentiaalilla, 16 parametrilla BC3600 Analyser, Kiina käyttää kokoverta. Raskausajan anemian diagnosoinnissa käytetään WHO:n määritelmää (hemoglobiinipitoisuus <11,0 g/dl.) Imeväisten verinäytteet Imeväisten laskimoveri kerätään aina kun mahdollista 7-10 päivän kohdalla FBC:tä varten. Plasmanäytteet säilytetään aina kun mahdollista. Kerätyn veren määrä on suositeltujen määrien sisällä vauvan painon mukaan (esim. ≤ 1-5 % kokonaisveren tilavuudesta 24 tunnin aikana ja ≤ 10 % 8 viikon aikana). Kliinisen arvion mukaan verta ei oteta vakavasti sairailta imeväisiltä ja niiltä, ​​joilla epäillään vakavaa anemiaa. Kuivuneet veripisteet kerätään jokaisella käynnillä kokoverinäytteillä tai kantapään neulanpistopisteellä. Kerätään 3-5 tippaa verta, kuivataan Whatman-suodatinpaperilla ja säilytetään -80 ◦ Celsiusasteessa.

Äidin verensokeritasot Raskausdiabeteksen seulonta seerumin ei-paastoamattomilla satunnaisilla verensokeritasoilla tehdään alaryhmälle naisia, jotka ovat ilmoittautuneet Mindray BS200 Chemistry Analyzer -laitteella (Mindray, Kiina), mukaan lukien glykosyloidun hemoglobuliinin (HbA1c) tasot. 6,5 %:n HbA1c:n raja tunnistaa diagnosoimattoman diabeteksen, kun taas HbA1c ≥5,6 % merkitsee henkilöitä, joilla on lisääntynyt riski sairastua diabetekseen WHO:n ohjeiden mukaan.

Äidin munuaisten ja maksan toimintaprofiilit Kreatiniini, urea ja elektrolyytit (natrium, kalium ja kloridi) mitataan äitien seeruminäytteistä käyttämällä Beckman Coulter AU680 -kemiallista analysaattoria, Saksa. Kreatiniinitasoja käytetään äidin munuaiskerästen suodatusnopeuden arvioimiseen käyttämällä Modified for Diet in Renal Disease -yhtälöä. Maksan toiminta ja kolestaasi arvioidaan käyttämällä seerumin albumiinia, fibrinogeenia, bilirubiinia, laktaattidehydrogenaasia (LDH), alaniinitransaminaasia (ALT), aspartaattiaminotransferaasia (AST), alkalista fosfataasia (ALP) ja gammaglutamyylitransferaasia (GGT).

Imeväisten maksa- ja munuaisten toimintakokeet arvioidaan kaikille vauvoille 6 ja 24 kuukauden iässä, mikäli aineistoa on riittävästi saatavilla.

Äidin lipidi- ja luuprofiilit Korkeatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli (HDL-C), matalatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli (LDL-C), kokonaiskolesteroli (TC) ja TC/HDL-C-suhde lähtötilanteessa määritetään käyttämällä seerumia rekisteröinnin yhteydessä ja 24 kuukauden kuluttua seuranta. TC:tä käytetään LDL-kolesterolin laskemiseen, kun pitoisuudet ovat alle 4,4 mmol/L. Äidin luuprofiilien osalta suoritetaan pitkittäiset seerumin ionisoituneen kalsium-, fosfori-, albumiini- ja ALP-tasojen mittaukset raskauden ja vieroituksen aikana.

Äidin HIV-diagnoosi Äidin HIV-infektion seulonta tehdään käyttämällä sarjatestausalgoritmia Zimbabwen kansallisten HIV-testaus- ja neuvontaohjeiden mukaisesti. Alkuseulonnassa käytetään kvalitatiivisia nopeita immunokromatografisia määrityksiä, Standard Diagnostics (SD) Bioline HIV-1/2 3.0 (SD Inc., Kyonggi-Do, Etelä-Korea). Positiiviset testit vahvistetaan käyttämällä Alere DetermineTM HIV-1/2 -sarjaa (Abbott Diagnostics, USA. Western blot -menetelmää käytetään määrittelemättömiin testituloksiin. HIV-tartunnan saamattomien äitien HIV-testaus toistetaan 6 kuukauden välein serokonversioiden tunnistamiseksi.

Imeväisten HIV-diagnoosi Kaikilla HIV:lle altistuneilla imeväisillä HIV havaitaan varhaisessa vaiheessa käyttämällä COBAS1 AmpliPrep/COBAS1 TaqMan1 HIV-1 kvalitatiivista testiä (Roche Molecular System) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Testit tehdään jokaisella käynnillä synnytyksestä vieroittamiseen tai HIV-infektion diagnoosiin asti.

HIV-1 RNA -kuormituksen kvantifiointi Äidin ja vauvan plasmanäytteistä määritetään HIV-1 RNA -kuormitus rekisteröinnin yhteydessä ja 24 kuukauden iässä käyttäen automaattista TaqMan Cobas AmpliPrep Roche Diagnostics -laitetta, Branchburg NJ) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Määrityksen alaraja on 20 kopiota/ml.

Äidin ja lapsen immuunitilan arviointi Äidin absoluuttiset CD4+ T-lymfosyyttien määrät lasketaan EDTA-verinäytteissä kaikille HIV-positiivisille käyttämällä Partec Cyflow -laskijaa, Saksa rekisteröinnin yhteydessä ja 12 kuukauden välein. Analyysit tehdään 6 tunnin sisällä veren ottamisesta.

HAART-tasot Efavirentsin, lamivudiinin ja tenofoviirin tasot eri äidin osastoissa, mukaan lukien plasma, äidinmaito, virtsa ja lapsivesi mitataan korkean erotuskyvyn nestekromatografialla.

Äidin rinnakkaisinfektioiden arviointi Kaikkien äitien ja kaikkien altistuneiden imeväisten HBV-seulonta tehdään mittaamalla HBV:n pinta-antigeeni (HBsAg), anti-HBsAg- ja anti-core-vasta-aineet havaitaan käyttämällä immunokromatografia-, Pointecare Diagnostics-, USA-pakkauksia valmistajan ohjeiden mukaisesti. . Äidin seerumin CMV-DNA-kuormitukset ja synnynnäinen CMV mitataan RealStar CMV PCR -sarjalla v1.0 Germany, sen jälkeen, kun virus-DNA on eristetty käyttämällä QIAamp MinElute Virus Spin Kit Germany -laitetta.

Imeväisten kuivuneet veripisteet arvioidaan kaikkien altistuneiden imeväisten infektiomarkkerien, CMV-, HBV-, HCV- ja HIV-tartuntojen suhteen. Anti-Treponema pallidum -vasta-aineiden isotyyppejä käytetään äidin kupan profilointiin käyttämällä SD Bioline 3.0 kvalitatiivista immunokromatografiasarjaa. Rapid Plasma Reagin (RPR) -testiä käytetään sukupuolitautien tutkimuslaboratorion (VDRL) mikropartikkelihiiltä sisältävän antigeenin havaitsemiseen. Syfilisserologia tehdään 24 kuukauden ikäisen vauvan plasmalle altistuneilla vauvoilla käyttämällä SD Bioline 3.0 kvalitatiivista immunokromatografiasarjaa.

HIV-herkkyyden ja rinnakkaisinfektioiden immunogenetiikka Ihmisen leukosyyttiantigeenin (HLA) ja tappajasolujen immunoglobuliinin kaltaisten reseptorien (KIR) tyypitys suoritetaan äidin ja lapsen DNA-näytteille käyttämällä DNA-sekvensointia ja sekvenssispesifistä alukepolymeraasiketjureaktiota (PCR) aiemmin kuvattu. HLA- ja KIR-variantit korreloidaan äidin virologiseen tilaan, immuunitilaan ja kliinisiin tuloksiin.

Vauvojen huumori-immuunivasteet EPI-rokotteille Korrelaatioita tartuntatauteja vastaan ​​​​vastaavat immuniteetit HEU-vauvojen keskuudessa ovat edelleen huonosti ymmärrettyjä. Tuhkarokon, vihurirokon, rotaviruksen, polioviruksen, hepatiitti B -viruksen (HBV), difterian, tetanustoksoidin, hinkuyskän, pneumokokin ja Haemophilus influenza tyypin b (Hib) vasta-ainetiitterit mitataan kaupallisilla ELISA-pohjaisilla menetelmillä. Mittaukset tehdään rokotuksen jälkeen 12, 18 ja/tai 24 kuukauden iässä. Seerumititterit, jotka korreloivat suojan kanssa (esim. anti-rotavirus-immunoglobuliini A ≥20 U/ml arvioidaan HUU-, HEI- ja HEU-lapsilla.

Vauvan atooppisten ilmenemismuotojen ja herkistymisen arviointi Atooppisen ihottuman syyt ja ajoitus ovat edelleen huonosti kuvattu SSA:ssa. Äidin allergiset tilat kolmannella raskauskolmanneksella arvioidaan yksityiskohtaisella kyselylomakkeella, joka koskee äidin ruokavaliota, mukaan lukien ruokahalu, äidin huumeiden käyttö sekä allergiset ja suoliston oireet. Synnytyksestä alkaen tutkimuskätilö tai hoitaja tutkii fyysisesti kaikki vauvot atooppisen ihottuman varalta, joka määritellään kutiava ihottuma ja/tai näkyvä taivutusihottuma. Vaippaihottumaa, ihottumaa silmien ympärillä ja/tai päänahan hilseilyä ei pidetä ekseeman diagnoosina. Kokonais- ja spesifinen seerumin immunoglobuliini E (IgE) valituista imeväisten verinäytteistä mitataan Immuno-määritysanalysaattorilla (Thermofisher, Freiburg, Saksa) atooppisen tilan kliinisen diagnoosin tukemiseksi, kuten aiemmin on kuvattu. Erityisesti IgE-vasta-aineet kananmunaa, lehmänmaitoa, maapähkinöitä, aeroallergeeneja, ruohon siitepölyä, kissan, koiran hilsettä ja pölypunkkia vastaan ​​arvioidaan. Imeväisten, joiden seerumin IgE-tasot ylittävät 0,3 IU/ml yhtä tai useampaa testattua ruokaa tai inhaloitavaa allergeenia vastaan, pidetään herkistyneinä. Ruoka-aineallergiat korreloivat imeväisten sairastuvuuteen, synnytystä edeltävään huumeiden käyttöön ja ravitsemukseen, mukaan lukien äitien raskauden aikana kaipaama ruoka.

Yhteenveto osatutkimuksista

1. Suoliston mikrobiotan alatutkimus Tämän alatutkimuksen tavoitteena on arvioida, miten HIV-infektio ja HAART-käyttö vaikuttavat suoliston mikrobiotan kypsymiseen, jotta voidaan ymmärtää ympäristön suolistohäiriön (EED) patogeneesi. Peräkkäisiä äidin ja vauvan ulostenäytteitä raskaudesta 24 kuukauden ikään käytetään 16 pienten alayksiköiden (S) ribosomaalisen ribonukleiinihapon (rRNA) sekvensointiin, jotta voidaan arvioida syntyperä ja operatiivisen taksonomisen yksikön koostumus ≥ 97 %:n sekvenssi-identtisyyden sekä mikrobien kanssa. monimuotoisuus. Valituissa näytteissä tehdään bakteerien koko genomin metagenomiikka haulikkosekvensointi mikrobiotan metabolisen potentiaalin tunnistamiseksi. Lisäksi metabolomille suoritetaan massaspektrometria, mukaan lukien mikrobien translokaatioiden vaurioituneen suoliston seinämän poikki tapahtuvien merkkiaineiden, kuten lipopolysakkaridit (LPS) ja endotoksiinin ydinvasta-aineen (EndoCAb) ja suoliston rasvahappoja sitovan proteiinin (I-FABP) arvioiminen enterosyyttien markkerina. vahingoittaa. Mikrobiota- ja metaboliittimarkkerit korreloivat vauvan kasvun, kehityksen ja tartuntataudeille alttiuden kanssa.
2. Immunometabolomiikan alatutkimus Tämän alatutkimuksen tavoitteena on tutkia vähintään 24 plasman tulehduksellista immuuniaktivaatiomarkkeria käyttämällä ELISA-pohjaista multipleksitestausta Luminex-teknologialla HIV-tartunnan saaneiden naisten haitallisten raskaustulosten riskitekijöinä ja sitä seuraavan vauvojen kasvun ja kehityksen heikkenemisen riskitekijöinä. Tähän tutkimustutkimukseen valitsemme ≥50 HIV-tartunnan saanutta naista, joilla on pitkäaikainen (>7 kuukautta), keskipitkä (1-7 kuukautta) ja ei/lyhytaikainen (ei tai <1 kk) HAART-altistus ja joilla ei ole tartuntaa. naiset kontrolleina. Metabomin ja mitokondrioiden toimintahäiriön arvioimiseksi massaspektrometriatekniikoilla mitataan monenlaisia ​​metaboliitteja, mukaan lukien aminohapot, reaktiiviset happilajit, triglyseridit, diasyyliglyseridit, kolesteroli, fosfolipidit, rasvahapot, peroksidoituneet lipidit ja oksilipidit.
3. Soluvälitteisen immuniteetin alatutkimus Oletamme, että muutoksia NK-solujen määrässä ja toiminnassa saattaa esiintyä HEU-vauvoilla ja altistaa heidät vakaville infektioille ja pahanlaatuisille kasvaimille, jotka liittyvät pysyviin viruksiin. Imeväisillä, joiden veritilavuus on riittävä ≥2 ml, eristetään ääreisverestä peräisin olevat mononukleaarisolut HUU- ja HEU-vauvoista, joilla on lyhyt, keskipitkä ja pitkäaikainen äidin HAART-altistus 24 kuukauden kohdalla T-solujen ja NK:n määrän ja toiminnan määrittämiseksi. solut kuten aiemmin on kuvattu.
4. Piilevän tuberkuloosin rinnakkaisinfektio-alatutkimus Oletamme, että diagnosoimaton piilevä tuberkuloosi voi osittain selittää lisääntyneen imeväiskuolleisuuden pienissä resursseissa olevilla vauvoilla. TST:tä on käytetty piilevän tuberkuloosin seulomiseen; kuitenkin johtuen vuorovaikutuksesta BCG-rokotteen kanssa, jota annetaan rutiininomaisesti Zimbabwessa, TST-spesifisyys voi olla huomattavasti heikentynyt tutkimuspopulaatiossamme. TB, IGRA:t) käytetään latentin tuberkuloosin testaamiseen naisten alaryhmässä raskauden aikana ja 6 viikkoa synnytyksen jälkeen, ja se arvioidaan TST:tä vastaan. Lisäksi istukkanäytteistä testataan TB-tulehdukseen viittaavia histologisia vaurioita. IGRA-mittaukset ja TST-leesioiden koko korreloivat äidin ja lapsen haitallisten tulosten kanssa.
5. Äidin stressin alatutkimus Tässä arvioidaan äidin stressin esiintyvyyttä, riskitekijöitä ja selviytymismekanismeja käyttämällä koettua stressiä koskevaa kyselylomaketta ilmoittautumisen yhteydessä ja 6 viikkoa synnytyksen jälkeen.
6. HIV/HAART-altistuminen ja hermoston kehityksen tulokset Tässä alatutkimuksessa arvioidaan mahdollisia pitkäaikaisia ​​hermoston kehitykseen liittyviä jälkitauteja, jotka liittyvät HIV-infektioon ja pidennettyyn HAART-altistumiseen Mullen-työkalulla 12 ja 24 kuukauden kohdalla.

Tulevat tutkimukset saattavat seurata pikkulapsia murrosikään asti. Rinnakkainen maaseudun havainnointikohortti on toivottavaa, jotta voidaan hallita nykyiseen kaupunkipohjaiseen tutkimukseen liittyviä kotitalouksien ja ympäristön hämmentäviä.