Epigalokatechin galát snižuje koncentrace cirkulujících katecholaminů a mění metabolismus lipidů.

Od všech subjektů byl získán písemný informovaný souhlas a všechny subjekty vyplnily dotazník zdravotního screeningu AHA/ACSM, aby se ujistily o svém zdravotním stavu a prokázaly svou způsobilost k účasti v této studii.

V randomizované, placebem kontrolované, jednoduše zaslepené, zkřížené studii účastníci dokončili dvě studie po akutní konzumaci buď EGCG nebo placeba (PLAC) po celonočním hladovění. Po dvouhodinovém období sledování po požití provedli účastníci kontinuální stupňovaný cyklický zátěžový test až do vyčerpání vůle. Mezi studiemi bylo alespoň 7denní vymývací období.

Účastníci byli náhodně zařazeni buď do intervenční studie, nebo do studie s placebem. Po celonočním půstu dorazili účastníci do laboratoře a byli pozorováni při požití dvou tobolek EGCG (minimálně 94 % EGCG < 0,1 % kofeinu) od komerčně dostupné značky (TEAVIGO™; TAIYO GmbH, 1450 mg) nebo placeba (1450 mg kukuřice Mouka). Kapsle byly zváženy a roztříděny s přesností ±5 %. Doplněk byl konzumován ve dvou vegetariánských želatinových kapslích velikosti 00 spolu se standardizovaným množstvím destilované vody (200 ml).

Experimentální protokol Před účastí na experimentálních testech byli účastníci seznámeni s laboratorním vybavením a testovacími postupy. Ráno v den testu se účastníci hlásili do Laboratoře fyziologie cvičení po 8-10hodinovém půstu, kde byla standardní měření tělesné hmotnosti účastníků (váhy; Seca 770 Digital Scales, Seca Ltd, Birmingham, UK) výška (stadiometr; Stadiometr Holtain, Holtain Ltd, Cymrych, Wales) a procento tělesného tuku pomocí analýzy bioelektrické impedance (Bodystat Quadscan 4000, Bodystat Ltd, Isle of Man, Spojené království) při minimálním oblečení.

Účastníci pak byli usazeni po dobu 10 minut, přičemž byla do antekubitální žíly zavedena kanyla. Ten byl napojen na trojcestný kohout pro opakovaný odběr žilní krve v klidu a při zátěžovém testu. Pravidelně byl podáván fyziologický roztok (2-3 ml), aby byla kanyla dobře průchodná. Po 10 minutách odpočinku byl odebrán vzorek žilní krve (7 ml) do vakuového kontejneru s heparinizovaným lithiem. Kromě toho byla v této době také odebrána základní měření srdeční frekvence (Polar RS800CX) a 10minutový vzorek dýchacího plynu (Jaeger Vyuntus CPX, Erich Jaeger GmbH, CareFusion Hoechbegh, Německo). Vydechovaný vzduch byl měřen pro frakční koncentraci kyslíku (FEO2 %) a oxidu uhličitého (FECO2 %) a pro objem vzduchu (SentrySuite Software, Erich Jaeger GmbH, CareFusion Hoechbegh, Německo) vydechlého během období, aby bylo možné stanovit objemy využití O2 a produkce CO2. Tato data byla použita pro stanovení oxidačního energetického výdeje pomocí principů nepřímé kalorimetrie (Frayn 1983; Jeukendrup & Wallis, 2005).

Po sběru klidových parametrů odpočívali účastníci dvě hodiny v pololehu. Poté, po 5minutovém přechodném období, účastníci namontovali cyklistický ergometr (Lode Excalibur Sport Ergometer, Lode BV Groningen, Nizozemsko), aby provedli klasifikovaný zátěžový test. Účastníci byli instruováni, aby cyklovali mezi 60-70 otáčkami za minutu při počátečním výkonu 60 Wattů (W) se zvýšením o 30 W každé 3 minuty. Účastníkovi bylo po celou dobu poskytováno slovní povzbuzování. Srdeční frekvence byla měřena neustále během zátěžového testu v reálném čase prostřednictvím telemetrického hrudního pásu a bezdrátového přijímače (Polar RS800CX) spolu s měřením dýchacích plynů. Dvě a půl minuty po každé fázi bylo účastníkovi odebráno hodnocení vnímané námahy (RPE) (Borg, 1982) a byl odebrán vzorek žilní krve. Test pokračoval až do dobrovolného vyčerpání, které bylo definováno následujícími kritérii: 1) pokles kadence pod 50 ot./min., 2) srdeční frekvence do 10 tepů od věkově předpokládaného maxima, 3) vyrovnání VO2, i když se pracovní zátěž zvýšila. V tomto okamžiku byly zaznamenány kardiorespirační proměnné a konečný vzorek krve byl odebrán při vyčerpání.

Účastníci dostali deník o jídle a fyzické aktivitě, který měli vyplnit 72 hodin před prvním experimentálním pokusem. Účastníci byli také instruováni, aby se během tohoto období vyhýbali alkoholu, potravinám s vysokým obsahem polyfenolů a další konzumaci zeleného čaje. Účastníci byli také instruováni, aby neprováděli žádnou fyzickou aktivitu v období 24 hodin bezprostředně před cvičební zkouškou.

Krevní analýzy Vzorky žilní krve byly okamžitě analyzovány na hladiny laktátu a glukózy (Biosen C-Line, EKF Diagnostics). Poté byl zbytek vzorku centrifugován (Heraeus Megafuge 8, Thermo Scientific) po dobu 10 minut při 3000 ot./min. s ~3 ml plazmy extrahované do jednotlivých 1ml mikrocentrifugačních zkumavek a ihned zmrazené (-80 °C) pro pozdější analýzu metanefrinu, koncentrace normetanefrinu a katecholaminu (adrenalinu a noradrenalinu) pomocí komerčně dostupných enzymatických absorpčních testů (ELISA, Eagle Biosciences Inc, Nashua, New Hampshire, USA). Krevní body vybrané pro použití s ​​testovacími soupravami byly výchozí (REST), dvě hodiny po požití v klidu (POST-ING) a během cvičení při nejvyšší rychlosti oxidace lipidů (FATpeak), laktátovém prahu (LT) a při maximální rychlosti kyslíku byla analyzována spotřeba (VO2peak) u každého jednotlivce. Laktátový práh byl vypočten pomocí softwaru Lactate-E (Newell et al, 2007).

Data byla analyzována pomocí Statistical Package for the Social Sciences software (verze 22, SPSS, inc). Data byla uvedena jako průměr ± SD s přijatým P0,05. Všechny proměnné byly zkoumány pomocí párových t-testů pro srovnání rozdílů experimentálních pokusů.