Požadavek na leucin u dospělých nad 60 let

Leucin je esenciální aminokyselina, která je důležitou složkou bílkovin a stimulátorem syntézy svalových bílkovin. Je známo, že jak lidé stárnou, ve věku nad 60 let, naše tělo prochází mnoha změnami, jako je nárůst tukové hmoty a pokles svalové hmoty. To je důvod, proč studujeme, kolik esenciální aminokyseliny, leucinu, tělo potřebuje v tomto konkrétním věku.

Metoda indikátorové oxidace aminokyselin (IAAO) je minimálně invazivní metoda pro stanovení potřeby esenciálních aminokyselin.

Protože esenciální aminokyseliny nemohou být v těle skladovány, jsou buď rozděleny do syntézy proteinů, nebo oxidovány, pokud jsou nadbytečné. Předpokladem IAAO je, že když je jakákoli esenciální aminokyselina v těle omezující, pak všechny ostatní aminokyseliny ztrácejí svou schopnost přispívat k syntéze bílkovin a jsou místo toho oxidovány. Metoda proto zahrnuje poskytnutí odstupňovaného příjmu (od nedostatku po nadbytek) testované aminokyseliny, leucinu, a poté měření oxidace další aminokyseliny, která se nazývá indikační aminokyselina. To se provádí izotopovým značením indikační aminokyseliny (často používáme 13C-fenylalanin) a poté měřením výskytu značeného oxidu uhličitého (13CO2) v dechu s různým příjmem testované aminokyseliny, leucinu. Potřeba leucinu bude určena „bodem zlomu“ – bodem, ve kterém se oxidace 13C-fenylalaninu ustálí.

V rámci studie se subjekty nejprve zúčastní hodnocení před studií, ve kterém se bude posuzovat výška, hmotnost, tělesné složení (tuková hmota a svalová hmota) a klidový energetický výdej a anamnéza. Rovněž bude odebráno 10 ml krve k vyšetření na cukrovku a funkci ledvin. Účelem předběžného hodnocení je vypočítat dietní požadavky subjektu pro studii a posoudit zdravotní stav, úroveň aktivity a stravovací návyky.

Subjekty se poté zúčastní až 8 různých 3denních studií, které budou mezi každou 3denní studií odděleny minimálně 1 týdnem. První 2 dny jsou adaptační dny a subjekty budou konzumovat udržovací dietu doma se 4 stejnými jídly. 3. den se nazývá studijní den a subjekty konzumují 8 hodinových vzorců; první 3 se konzumují doma a zbývajících 5 se spotřebuje v Centru klinického výzkumu v Nemocnici pro nemocné děti. Ihned po 4. jídle se odeberou 4 základní vzorky dechu a 3 základní vzorky moči. Po 5. jídle se měří rychlost produkce oxidu uhličitého (VCO2) nepřímou kalorimetrií po dobu 20 minut. 5., 6., 7. a 8. jídlo bude obsahovat malé množství izotopem označeného fenylalaninu (13C fenylalaninu). Dvě a půl hodiny po podání izotopu (13C fenylalaninu) se odeberou 4 vzorky dechu v plató a 3 vzorky moči v plató.

Vzorky dechu se používají k měření obohacení izotopově značeného CO2 (13CO2). Vzorky moči se používají k měření obohacení izotopově značeného fenylalaninu (13C fenylalaninu). Sérií výpočtů a aplikací dvoufázové regresní analýzy budeme schopni určit potřebu leucinu.