Vysoké hladiny GRP78 u infekce Covid-19: Případová kontrolní studie

Infekce Covid-19, způsobená novým typem koronaviru (SARS-CoV-2), který se objevil v Číně koncem roku 2019 a poté byl importován do celého světa, byla WHO dne 11. března 2020 prohlášena za globální pandemii (1). Infekce Covid-19 se u symptomatických pacientů může projevit v závažných klinických stavech, od virové infekce horních cest dýchacích až po zápal plic, sepsi, septický šok a dokonce syndrom akutní respirační tísně (ARDS).

Tato studie se snaží poskytnout určitý pohled na variace hladin proteinu GRP78 u pacientů s Covid-19 (-) pneumonií, Covid-19 (+) pneumonií a CT negativní infekcí Covid-19 ve srovnání s normální populací prostřednictvím většího počtu. případů.

Tato studie je prospektivní případová-kontrolní studie a požadovaný souhlas byl před studií získán od Etického výboru Univerzity Pamukkale (číslo 60116787-020 / 26598).

Do této studie budou zahrnuti pacienti, kteří byli přijati mezi dubnem 2020 a červnem 2020 na pandemickou ambulanci Covid-19 urgentního příjmu (ED) s příznaky infekce horních cest dýchacích a zápalem plic, byli asymptomatičtí, bylo zjištěno, že jsou covid- 19 PCR (+) během sledování kontaktu a předložen na ED k dalšímu vyšetření a léčbě. Poté, co budou požadované informace týkající se studie poskytnuty jak skupině pacientů, tak zdravé kontrolní skupině, budou získány formuláře písemného souhlasu od všech subjektů, které souhlasily s účastí ve studii. Do studie budou jako kontrolní skupina zařazeni zdraví dobrovolníci bez známého chronického nebo akutního onemocnění nebo užívání drog, stejně jako bez nedávné infekce. Jakmile budou tito jedinci posouzeni v souladu s kritérii pro zařazení a vyloučení, budou rozděleni do tří skupin jako skupina s Covid-19(-) pneumonie, skupina s infekcí Covid-19 a zdravá kontrolní skupina.

CT hrudníku provedené v době přijetí pacientů na ED bylo hodnoceno podle kritérií Expertního konsenzu Radiologické společnosti Severní Ameriky lékařem na pohotovosti, který pacienta klinicky sledoval. Případy pneumonie budou klasifikovány v souladu s těmito kritérii a zaznamenány v souboru údajů o klinické klasifikaci.

Kompletní krevní obraz, C-reaktivní protein (CRP), kreatinin, urea, d-dimer a parametry feritinu, které jsou rutinně kontrolovány při příjmu na ED, budou zaznamenány do souboru dat. Pro měření hladiny GRP78 se po odebrání 3 cc vzorku krve do suché zkumavky a centrifugaci při 4000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut oddělí jeho sérová část a hladina GRP78 bude analyzována metodou ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). . Naproti tomu v kontrolní skupině byla po odebrání 3 cm3 krve do suché zkumavky a po vložení dalších 3 cm3 krve do zkumavky s EDTA analyzována hladina GRP78 stejnými metodami ve stejné laboratoři.

Hladiny GRP78 v séru subjektů budou měřeny pomocí komerčně dostupné soupravy ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) (Human Glucose Regulated Protein 78 (GRP78) ELISA Kit, Sun Long, SL2048Hu, Čína), podle protokolu výrobce.

Výsledkem analýzy síly provedené v souladu s předpoklady, protože obdobně organizovaná referenční studie neexistovala, bylo nejméně 84 lidí (min. 28 pro každou kohortu) bylo potřeba k dosažení 90% síly při 95% intervalu spolehlivosti za předpokladu, že předpokládaná velikost účinku bude středně vysoká (f = 0,4).

42 pacientů bylo nakonec zařazeno do skupiny Covid-19 (-) pneumonie.

Celkem 72 pacientů (30 pneumonie Covid-19; 42 CT-negativní infekce Covid-19) bude zahrnuto do skupiny infekcí Covid-19.