Vliv kouření na periodontální terapii u parodontitidy

Parodontální onemocnění je zánětlivý proces, který může vést ke ztrátě zubů a je také považován za modifikující faktor pro systémové zdraví. V kostní tkáni se resorpce kosti osteoklasty a tvorba kosti osteoblasty neustále opakuje. Osteoklasty jsou vícejaderné buňky, které pocházejí z buněk monocytární/makrofágové linie a resorbují kost. Naproti tomu osteoblasty zprostředkovávají osteoklastogenezi tím, že exprimují receptorový aktivátor ligandu nukleárního faktoru-kappa B (RANKL), který je exprimován jako cytokin asociovaný s membránou. Osteoprotegerin (OPG) je rozpustný RANKL návnadový receptor, který je převážně produkován osteoblasty a který zabraňuje tvorbě osteoklastů a osteoklastické kostní resorpci inhibicí interakce RANKL-RANKL receptor. IL-34 sdílí vitální funkce M-CSF a řídí přežití, diferenciaci a proliferaci myeloidních buněk.

Tato studie je první kontrolovanou klinickou studií, která zkoumá hladiny RANKL, OPG a IL-34 ve slinách a séru u kuřácké a nekuřácké parodontitidy a hodnotí situaci před a po léčbě. První hypotéza této studie; ve skupině kuřáků s parodontitidou budou hladiny RANKL, OPG a IL-34 ve slinách a v séru vysoké, na rozdíl od skupiny nekuřáků a skupiny zdravých periodontů. Druhou hypotézou této studie je, že po parodontální léčbě se sníží hladiny RANKL a IL-34 ve slinách a séru, zvýší se sliny a sérový OPG. Na základě těchto hypotéz je cílem studie; porovnat hladiny RANKL, OPG a IL-34 ve slinách a séru zdravých kontrol, subjektů P-III-C a P-III-CS a zhodnotit účinek parodontologické léčby.

Celkem 60 systémově zdravých pacientů; Do této studie bylo zahrnuto 20 periodontálně zdravých, 20 P-III-C, 20 P-III-CS. Klinické parodontologické vyšetření celých úst zahrnovalo měření hloubky sondování (PPD), úrovně klinického připojení (CAL), přítomnosti krvácení při sondování (BOP), gingiválního indexu (GI) a indexu plaku (PI) na 6 místech na zub, kromě třetí stoličky. Přítomnost a typ alveolární kostní ztráty byly hodnoceny na digitálním panoramatickém rentgenovém snímku u každého účastníka, který byl v případě potřeby doplněn o periapikální rentgenové snímky.

Parodontální stav každého pacienta byl hodnocen jedním kalibrovaným parodontologem s manuální sondou. Diagnóza parodontitidy neboli zdraví parodontu byla stanovena podle Světového workshopu o klasifikaci parodontálních a periimplantátových onemocnění a stavů v roce 2017.

Léčba

Rekrutovaní pacienti s parodontitidou dostávali konvenční škálování kvadrantů a plánování kořenů (SRP) v lokální anestezii celkem ve 4 sezeních během dvou týdnů. SRP prováděl stejný parodontolog pomocí ultrazvukových vložek a manuálních parodontálních kyret. Přehodnocení byla provedena 1 a 3 měsíce po dokončení SRP. U periodontálně zdravých kontrol nebyla provedena žádná periodontální intervence.

Odběr vzorků slin a séra Celkem 5 ml nestimulovaných celých slin bylo odebráno metodou pasivního slintání mezi 9:00 a 10:00. Účastníkům bylo doporučeno vyhýbat se konzumaci jídla po dobu tří hodin před odběrem vzorků. Účastníci se posadili vzpřímeně a sliny byly odebírány po dobu 5 minut s instrukcemi, aby se sliny shromáždily na dně úst a pasivně je slintaly do sterilní skleněné kádinky. Poté se vzorky slin okamžitě přenesou do 2ml polypropylenové zkumavky a skladují se při -80 °C. Z antekubitální jamky bylo odebráno celkem 5 ml krve metodou venepunkce. Sérum bylo izolováno z krve centrifugací při 5000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut s následným rychlým přenesením do sterilní polypropylenové zkumavky a skladováním při -80 °C.

Biomarker Immunoassays Vzorky slin a séra byly rozmraženy na ledu. Vzorky slin byly odstřeďovány při 5 000 otáčkách za minutu po dobu 15 minut při teplotě místnosti a supernatanty byly okamžitě použity pro testy. Vzorky séra a slin RANKL, OPG a IL-34in byly měřeny pomocí ELISA za použití komerčních souprav.

Statistická analýza Všechny statistické analýzy byly provedeny se standardním statistickým softwarovým balíkem. Pro srovnání v rámci skupiny, pokud data nebyla normálně narušena, byly použity Friedmanův test a Dunnův test s Bonferroniho korekcí k analýze změny mezi výchozí hodnotou a 1 měsíc a 3 měsíce po léčbě. Pro srovnání mezi skupinami Mann-Whitney U test pro normálně a nenormálně narušená data. Ke zjištění korelací biochemických parametrů s klinickými parametry a mezi sebou navzájem ve skupině nemocných před a po léčbě byl použit Spearmanův test korelace pořadí. Všechny testy byly provedeny na hladině významnosti P <0,05.